木聚糖酶检测方法

木聚糖酶活力的测定

分光光度法

1 原理

木聚糖酶能将底物木聚糖（本实验采用Xylan from oat spelt，燕麦木聚糖，Sigma NO. :X0627）降解成寡糖和单糖，具有还原性末端的寡糖和有还原基团的单糖在沸水浴条件下可以与DNS试剂发生显色反应。反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，而还原糖的生成量又与反应液中木聚糖酶的活力成正比。因此，通过分光比色测定反应液颜色的强度，可以计算待测木聚糖酶的活力。 2 木聚糖酶活力单位（U）的定义

在40℃、pH值为5.0的条件下，1.0 min从浓度为5 mg/mL的木聚糖溶液中降解释放1 μmol还原糖（以木糖表示）所需要的酶量为一个酶活力单位（U）。其中样品的酶活力以 U / g（固体酶）或U / mL（液体酶）表示。

桦木木聚糖（Xylan from birch wood）山毛榉木聚糖（Xylan from beechwood） 3 主要仪器 3.1 分光光度计 3.2 精密电子天平

精确至0.0001 g。 3.3 恒温水浴锅

30-60℃可调，精度为0.1℃。 3.4 酸度计

精确至0.01。 3.5 秒表

每小时误差不超过5s。 3.6 刻度试管（15mL）

带玻璃

蜂房芽孢杆菌木聚糖酶的活性

维普资讯

第2 7卷第 4期20 0 3年 8月

江西师范大学学报 (自然科学版 )J OUR NAL OF J I ANG RMAL UN V S T XINO I ER I Y

V0 . 7 No. 12 4Au 2 0 g. 0 3

文章编号：0 0—56 (0 3 0—0 1—0 10 8 2 2 0 )4 3 3 3

蜂房芽孢杆菌木聚糖酶的活性黄运红，李长生，龙中儿 (西师范大学生命科学学院，西南昌江江 3O2) 3 O7

摘要：实验研究了温度、H值和 A、 p P条件下，酶活性稳定； 、 、该 c M抑制作用，的抑制作用最强 . C

、、a M、 K c2 、

、e F3 c等几种常见金属离子对蜂 及和对木聚糖酶有

房芽孢杆菌木聚糖酶活性的影响，果表明该酶最适温度为 4结 o℃,最适 p H为 6 0在低温及 p . .. H 7 0—9 0 .对木聚糖酶有激活作用，、P c A、

关键词：蜂房芽孢杆菌；木聚糖酶；酶活性中图分类号： 9 8 O6 . 2 文献标识码： A

木聚糖酶 ( C . . . )一类以内切方式水解木聚糖分子中』—1 4一木糖苷键的酶 .造纸工业中， E 3 2 18是 9,在该

年产6000吨木聚糖酶发酵车间的设计

作 者 姓 名 李斌 专 业 生物技术及应用 指导教师姓名 张大伟

目 录

摘 要 …………………………………………………………………1 ABSTRACT ……………………………………………………………2 第一章 绪论 ……………………………………………………3

1.1木聚糖酶简介 ………………………………………………………3 1.1.1木聚糖酶的理化性质 ……………………………………………3 1.1.2木聚糖酶的生产简史 ……………………………………………4 1.1.3木聚糖酶用途 ……………………………………………………4 1.1.4木聚糖酶产业发展现状 …………………………………………5 1.2巴斯德毕赤酵母简介 ………………………………………………6 1.2.1巴斯德毕赤酵母表达系统 ………………………………………6 1.2.2巴斯德毕赤酵母的优缺点 ………………………………………6 1

木聚糖酶的热稳定性以及最适pH值、

温度的研究

冯焱白永胜黄增辉

摘要：木聚糖酶是一类内切糖苷酶酶系,同自然界中五碳糖的循环相联系,在能量循环中占

有重要地位。试验通过采用DNS(3,5-二硝基水杨酸)法,在540 nm处用紫外分光仪测OD值,对某生物木聚糖酶进行研究,得出该木聚糖酶的最适pH值为4.2;分别在30～85℃测定木聚糖酶酶活,得该木聚糖酶的最适反应温度为50℃。同时发现,该酶的热稳定性较好、耐酸碱性好,木聚糖酶对pH值不敏感。

关键词：木聚糖酶;稳定性;最适;温度;pH值

中图分类号Q566+.5

冯焱,山西农业大学生命科学学院,030801,山西太谷。

白永胜、黄增辉,单位及通讯地址同第一作者。收稿日期:2007-06-18

木聚糖是一种多聚五碳糖,主要成分是D-木糖,是植物半纤维素的重要组成部分,它占植物碳水化合物总量的1/3,在自然界中是继纤维素之后的含量第二丰富的再生生物资源。木聚糖酶(E.C3.2.1.8)是一类以内切方式降解木聚糖分子中β-1,4木聚糖苷键的酶系。它对自然界中大量存在的半纤维素起着重要的作用,该酶广泛应用于食品、饲料添加剂等方面,已受到广泛的关注[1,2]。木聚糖酶的酶学性质决定了其在应用上的潜力及应用

饲料添加剂 木聚糖酶

编制说明

（报批稿）

1 标准制定背景及任务来源 1.1制定背景

木聚糖酶指可将木聚糖降解为低聚糖和木糖的一类酶。目前，随着玉米等常规饲料原料供应日趋紧张，麦类及杂粕类非常规饲料原料的使用逐渐增多。麦类及杂粕类原料中的木聚糖具有一定的抗营养作用，由此，作为木聚糖的降解酶，木聚糖酶在畜禽养殖业的用量正在不断提高。但是，尽管饲料添加剂木聚糖酶产品市场活跃，但我国目前没有相应的产品标准。所以制定《饲料添加剂 木聚糖酶》标准，用以规范饲料添加剂木聚糖酶产品的生产和经营，尤为必要，将对保障我国饲料安全具有重要的意义。 1.2任务来源

本标准制订任务于2011年度下达，项目计划编号20100293-Q-469，由中国农业科学院北京畜牧兽医研究所、武汉新华扬生物股份有限公司和广东溢多利生物科技股份有限公司负责起草，由农业农村部提出并归口。

2 国内外木聚糖酶生产和质量标准情况 2.1国内外木聚糖酶生产情况

目前国内外生产厂家大多采用液体深层发酵生产木聚糖酶，产品以固体剂型为主，也有少量液体产品。其中，木聚糖酶液体产品生产工艺流程为：菌种培养→接种→发酵→板框过滤→精滤→浓缩或稀释→成品包装。菌种经过斜面培养、摇瓶培养后接种到

甘露聚糖酶活力的测定

1.甘露聚糖酶活力单位定义

在37℃、pH值为5.5的条件下，每分钟从浓度为3mg/ml的甘露聚糖（Sigma G0753）溶液中降解释放1umol还原糖所需要的酶量为一个酶活力单位u。 2.测定原理

甘露聚糖酶能将甘露聚糖降解成寡糖和单糖。具有还原性末端的寡糖和有还原基团的单糖在沸水浴条件下可以与DNS试剂发生显色反应。反应液颜色的强度与酶解产生的还原糖量成正比，而还原糖的生成量又与反应液中甘露聚糖酶的活力成正比。因此，通过分光比色测定反应液颜色的强度，可以计算反应液中甘露聚糖酶的活力。 3.试剂与溶液

除特殊说明外，所用的试剂均为分析纯，水均为符合GB/T6682中规定的三级水。 3.1甘露糖溶液，c（C6H12O6）为10.0mg/ml：

称取无水D-甘露糖1.000g，加水溶解，定容至100ml。 3.2 乙酸溶液，c（CH3COOH）为0.1mol/L：

吸取冰乙酸0.60ml。加水溶解，定容至100ml。 3.3 乙酸钠溶液，c（CH3COONa）为0.1mol/L：

称取三水乙酸钠1.36g。加水溶解，定容至100ml。 3.4 氢氧化钠溶液，c（NaOH）为200g/L：

称取氫氧化鈉20.0g。加水溶

　2004年31(2)　　　　　　　　　　　　微生物学通报 49

嗜热真菌耐热木聚糖酶的产酶条件和酶谱分析

李秀婷　李里特　江正强

1

1

133

3

(中国农业大学食品科学与营养工程学院　北京　100083)1

摘要:嗜热真菌ThermomyceslanuginosusCBS2881542M18析结果表明:白胨作为复合氮源时效果最好70,最适培养温度为50℃。在uΠmL。另外,SDS2PAGE和酶谱分析(变性)26kD的GΠ11族木聚糖酶。,,发酵条件,酶谱

:Q932939　文献标识码:A　文章编号:025322654(2004)0220049206

ZYMOGRAPHYANDPRODUCTIONOFATHERMOSTABLEXYLANASE

FROMTHERMOMYCESLANUGINOSUS3

LIXiu2Ting1　LILi2Te1　JIANGZheng2Qiang133

(CollegeofFoodScienceandNutritionalEngineering,ChinaAgriculturalUniversity,Beijing100083)1

Abstract:CultivationconditionsofthethermophilicfungusT

高纯度燕麦β-葡聚糖测定方法研究

随着人类物质生活水平的提高，人类的饮食结构反而愈不均衡。因此具有显著降血脂、降血糖及维持肠道微生物生态环境功能的燕麦葡聚糖[1~4]的需求市场明显增大，而高纯度的燕麦葡聚糖因其功效更为显著，其需求更为明显。但目前国内外对于高纯度燕麦葡聚糖的检测并无统一标准，这极其不利于高纯度燕麦葡聚糖的研究发展。

目前，谷物麸中β-葡聚糖的测定[4~7]主要是采用AOAC995.16酶法，该方法应用于测定高纯度燕麦葡聚糖的原理虽然相同，但是由于含量的增加，产品的分子量不同，对于酶解的用量，水解的时间等条件有所不同，因此，本文着重研究酶解测定高纯度葡聚糖时的作用条件，并通过对方法的精密度和回收率进行判断方法的准确性。

1 材料

1.1试剂与待测样

70%纯度燕麦β-葡聚糖：广东省食品工业研究所 试剂盒：Megazyme ；K-BGLU 1.2主要仪器设备

移液枪：Tomos；L1160471

恒温水浴锅：上海申胜生物技术有限公司；W201B 漩涡混合振荡器：上海琪特分析一起有限公司；XW-80A 紫外可见分光光度仪：上海美谱达仪器有限公司；UV-6300PC 2 实验方法 2.1测定步骤

准确称量约10mg70%纯度燕麦β-葡聚糖样品到试管

辣木的正确食用方法,如何食用辣木,辣木可以直接食用吗？辣木可以直接吃吗？

辣木的正确食用方法

在辣木进入我们的生活中之后，因其浑身是宝，几乎含有人体所需的所有营养成分和微量元素，甚至可以直接治疗多达29种疾病，而大受市场和消费者的热烈追捧，很多朋友也咨询过我如何食用辣木等问题，我们也总是习惯的学习印度人的食用方式，首先我不得不承认辣木的确具有各位所知和媒体报道的高营养含量和价值，但作为科学的安全的食用方式，这样做真的正确吗？

印度当地人在日常生活中食用辣木，鲜叶可作为蔬菜食用，嫩叶类似菠菜，可以作汤或沙拉。嫩果荚也可以食用，干种子可以打成粉末作为调味料，幼苗的根干燥后也可以打成粉末作为调味料，有辣味。辣木的花在略微变白之后也可以加入沙拉中食用。但是印度每年有数以千计的人因为错食辣木而导致腹泻或中毒，甚至危及了生命，那又是为什么呢？我们应该如何正确食用呢？我们带着这些疑惑，查阅了相关的资料和文件，咨询了相关的专家，才得到以下答案。

据资料所示，辣木最早在非洲、印度种植，并食用，20世纪末传入美国，在我国兴盛是近几年，是因为习,主.席2011年和2014年2次作为国礼送给了古巴领导人Castro，2012年卫,生.部也发布了文件规定辣木作为新型食品。但是

壳聚糖

脱乙酰基程度

脱乙酰基程度(D.D)决定了大分子链上胺基(NH2)含量的多少，而且D.D增加，由于胺基质子化而使壳聚糖在稀酸溶液中带电基团增多，聚电解质电荷密度增加，其结果必将导致其结构，性质和性能上的变化，至今壳聚糖稀溶液性质方面的研究都忽略了D.D值对方程的影响。VANDUM等人曾研究了不同离子强度对壳聚糖在稀溶液中的分子尺寸和粘度的影响。结果认为离子强度不同会改变无规线团的膨胀度进而改变分子尺寸和特性粘度，通过对不同D.D壳聚糖进行MARK-HOUWINK方程常数的测定，结果表明K,A值随D.D值的变化。从而由MARK-HOUWINK方程常数K,A有规律地依赖于壳聚糖的脱乙酰度而变化，而且在相同分子量时，随着脱乙酰度的增加，壳聚糖在稀溶液中分子尺寸，特性粘度和扩张因子等增加，而特性比和空间位阻因子随着脱乙酰度的增加而减少。从而在适用范围内的任意一个壳聚糖样品通过比较简单的特性粘度测量，即可计算其平均分子量。

结构式如图

在特定的条件下，壳聚糖能发生水解、烷基化、酰基化、羧甲基化、磺化、硝化、卤化、氧化、还原、缩合和络合等化学反应，可生成各种具有不同性能的壳聚糖衍生物，从而扩大了壳聚糖的应用范围。

壳聚糖大分子中有活泼的羟基和氨基