冰冻切片最常用于检测组织内的

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冰冻切片

标签：文库时间：2025-01-16

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1. 体式显微镜下，用显微剪刀沿角膜缘剪下角膜，将眼杯置于固定液内（0.2M NaH2PO4

10ml + 0.2M Na2HPO4 40ml + 8%多聚甲醛 50ml），４℃固定过夜

2. 体式显微镜下，用显微剪剪除虹膜，并剪断晶体悬韧带，晶体自动游离出眼杯，尽量减

少对眼杯扰动，将眼杯置于30%蔗糖（sucrose）溶液内（0.1M PB配置 PH=7.4），４℃脱水过夜沉底

3. 将眼杯由30%蔗糖溶液取出，置于20%蔗糖溶液与OCT包埋剂（TFM? Tissue Freezing

Medium）2：1体积比例混合液中，室温浸泡摇动30min 4. 体式显微镜下，于平皿内用软纸采用虹吸方式吸干眼杯内外水份，尽量减少对眼杯扰动 5. 在模具（tissue-tek 4565）上标记样品情况，向模具内倒入20%蔗糖溶液与OCT包埋剂

2：1体积比例混合液，将眼杯开口向上置于液体上，先用显微镊子按压一侧眼球（下方），使液体缓慢浸满眼杯，而后将眼杯在琼脂糖翻转，杯口朝下置底，上方眼球标记点朝向模具标记位置并置中，并使鼻侧或颞侧眼球靠近模具壁，将模具置于钢板上，移至-80℃冰箱（保证眼杯在内不动），静置10min

6. 将模具置于冰冻切片机恒冷箱内1

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冰冻切片免疫组化步骤

标签：文库时间：2025-01-16

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冰冻切片免疫组化步骤

1. 需要准备的材料

APES包被的载玻片 PBS（pH7.4） 4%多聚甲醛

PBST（含Tween-20）

PBST-G（含0.3mol/L甘氨酸）

2. 冰冻切片

取出组织块放于软塑料盖或特制的小盒内，之后将其缓慢平放于盛有液氮的小杯内，让盒底部接触液氮（小盒及组织块切勿浸入液氮内），大约10-20秒组织即迅速冰冻成块。取出组织冰块立即置于-80℃冰箱储存备用，或置于恒温切片机冰冻切片。

切片厚度4-8 um (5 um)，对于免疫组化的需要用APES包被的载玻片，以增加组织片的粘附性。

切片后如不立即染色，必须吹干，储存于低温冰箱内保存。

3. 免疫组化染色步骤

固定：取出切片，室温放置5mins。用4%的多聚甲醛PBS溶液室温固定15mins，PBS冲洗三次（冲洗可以采用侧斜淋洗，也可至于平皿中摇晃）。

打孔：如果是需要染细胞内的蛋白，用曲拉通（TritonX-100）打孔：组织样品浸于含0.25% TritonX-100的PBS中10mins，之后用PBS洗3次，每次5mins。如果是染膜蛋白的，不需要曲拉通打孔。

封闭：将组织置于含1%BSA的PBST溶液中30mins，封闭非特异性粘合的抗体。对于多聚

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冰冻切片检查注意事项

标签：文库时间：2025-01-16

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手术中冰冻切片检查规范

一、手术中冰冻切片检查注意事项

(一) 手术中冰冻切片检查是临床医师在实施手术过程中，就与手术方案有关的疾病诊断问题，尤其需要临床医师与病理医师间的密切合作。

(二) 手术中冰冻切片检查要求病理医师在很短时间内，根据对切除标本的巨检和组织块快速冷冻切片的观察，向手术医师提供参考性病理诊断意见，由于组织未得到充分有效的固定、脱水以及切片较厚等等，与石蜡切片病理诊断的准确率有一定的差距，一般仅限于良、恶性的鉴别。与常规石蜡切片的病理诊断相比，手术中冰冻切片检查具有更多的局限性和误诊的可能性，误诊率5%以上。有的病例难以快速诊断，需要等待常规石蜡切片进一步明确诊断。

(三) 有关临床医师应于手术前向患者和／或患者授权人说明手术中冰冻切片检查的意义和局限性等，取得患者和／或患方的知情和理解。患者和／或患者授权人应在由医院制定的《手术中冰冻切片检查知情同意书》签署意见和签名。

(四) 主持手术的临床医师应在手术前一天向病理科递交手术中冰冻切片检查申请单，填写患者的病史，重要的影象学、实验室检查结果和提请病理医师特别关注的问题等。一般不接受电话预约和临时申请手术中冰冻切片检查。

（五）手术中冰冻切片检查的手术标本

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卵巢肿瘤术中冰冻切片病理诊断分析

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卵巢肿瘤术中冰冻切片病理诊断分析

作者：袁继华

来源：《健康之路（医药研究）》2015年第03期

【摘要】目的研究冰冻切片病理检查应用于卵巢肿瘤诊断中的准确性，评估其诊断价值。方法本次研究将120例卵巢肿瘤患者作为研究对象，并将术后石蜡切片病理检查结果作为诊断标准，计算冰冻切片病理检查在卵巢肿瘤中的诊断正确率、误诊率，分析误诊原因。结果冰冻切片病理检查共诊断出17例恶性肿瘤，6例交界性肿瘤和93例良性肿瘤，误诊率为3.33%，诊断正确率为96.67%；冰冻切片病理检查诊断正确率（96.67%）与石蜡切片病理诊断正确率（100.00%）比较，P>0.05；切片读取错误所致误诊及取材不当所致误诊均为2例。结论冰冻切片病理检查诊断卵巢肿瘤有较高正确率，严格取材和切片读取能进一步提高诊断正确率，为手术治疗提供重要指导。

【关键词】卵巢肿瘤；冰冻切片；诊断正确率；误诊原因

【中图分类号】R4 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2015）03-0105-01 卵巢肿瘤形式较多，不同形式卵巢肿瘤具有不同临床症状

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冰冻切片技术在植物显微结构和组织化学中的应用

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切片技术!

第2 6卷第 3期 20 0 9年 6月d i 0 3 6/.sn 10 -6 2 2 0 . 3 0 2 o: . 9 9 jis. 0 89 3 . 0 9 0 . 7 1

生物学杂志J RNA I OG OU L OF B OL Y

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冰冻切片技术在植物显微结构和组织化学中的应用谢佩松，中根，存虚徐韦(州大学生物科学与技术学院，苏扬州 2 5 0 )扬江 2 0 9摘要：介绍了冰冻切片法研究植物显微结构和组织化学的一般程序。结果表明，冰冻切片过程简单有效且图版

清晰， 1d内可获得高质量图片，决了利用普通石蜡切片观察植物样品需要进行脱水、在解浸透、包埋操作且耗时长的问题，植物显微结构和组织化学研究中具有广阔的应用前景。在关键词：冻切片；物；冰植显微结构；化反应组

中图分类号： 3 6 Q一 3

文献标识码： B

文章编号：0 8— 6 2 20}3— o 2一 3 10 9 3 (0 9 0 0 7 O

冰冻切片是利用低温使组织迅速冻结达到一定的硬度进行切片的一种方法。与常规的石蜡切片相比，冰冻切片因其不经过脱水和透明等步骤，具有快速、简

112仪器 ..

Li M10

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最常用的Shell命令

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Shell命令行操作

Linux shell 简介

Linux shell指的是一种程序，有了它，用户就能通过键盘输入指令来操作计算机了。Shell会执行用户输入的命令，并且在显示器上显示执行结果。这种交互的全过程都是基于文本的，与其他各章介绍的图形化操作不同。这种面向命令行的用户界面被称为 CLI(Command Line interface)。在图形化用户界面(GUI)出现之前，人们一直是通过命令行界面来操作计算机的。现在，基于图形界面的工具越来越多，许多工作都不必使用Shell就可以完成了。然而，专业的 Linux用户认为Shell是一个非常有用的工具，学习 Linux时一定要学习Shell，至少要掌握一些基础知识和基本的命令启动shell

在启动Linux桌面系统后，Shell已经在后台运行起来了，但并没有显示出来。如果想让它显示出来，

按如下的组合键就可以： + +

组合键中的F2可以替换为F3、F4、F5、F6。如果要回到图形界面，则按如下组合键： + +

另外，在图形桌面环境下运行“系统终端”也可以执行Shell命令，与用组合键切换出来的命令行界面

是等效的。“系统终端”启动后是一个命令行操作窗口，可以随时放

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组织切片制作步骤、

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1.从组织中提取材料的方法是制作切片的重要步骤。根据教学，科研和外部检查的具体要求，从人体（手术标本，活检标本，尸检标本）或动物中提取，确定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖学，组织学和病理学的基本理论知识，还需要掌握实际的手术技术。每个组织器官都有一定的位置和方法，不能随意切割组织作为生产材料，否则就无法实现教学，科研和临床诊断。具体要求如下：

（1）材料的新鲜度：获得的组织越新鲜越好。通常将人体组织分离，并杀死动物组织后将其快速固定以确保原始的形态结构。

（2）纸巾块的大小：所取纸巾块的理想体积为50px×50px×7.5px，以使固定液能快速，均匀地渗透到组织中，但纸巾块的理想体积因不同的准备材料和目的。例如，在进行病理检查和科学研究切片时，可以将组织块变薄0.1?5px，这可以缩短固定脱水的时间和透明度。如果制作示教部分，则厚度为0。

（3）请勿挤压纸巾块：用于切割纸巾块的刀子和剪刀应锋利，并且在切割过程中切勿来回锉刀。请勿将组织夹得太紧，以免因挤压而使组织和细胞变形。

（4）标准化采样位置：准确地根据解剖位置，并根据不同的病理位置和性质标准化病理标本的采样。

（5）选择组织块的切片：根据各器官的组织结构，确定切片的方向。纵向或横向切割通常是

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