细菌的染色方法及操作过程

Insar操作过程（一）

仰天长啸 发表于2010年03月29日 18:28 阅读(9) 评论(0) 分类： InSAR 举报

1，命令介绍.

生成模板：run –g 编辑模板：

编辑第一步模板：run –e1 编辑第二步模板：run –e2 编辑第三步模板：run –e3 编辑第四步模板：run –e4 编辑第五步模板：run –e5 编辑第六步模板：run –e6 编辑第七步模板：run –e7 编辑第八步模板：run –e8

（每行前加 C 表示屏蔽该行。 打开模板文件后，按“i“表示可以对进行插入操作，如果删去时，直接用delete或后退键。按ESC键时则退出当前的编辑状态。若要退出文件时，则先按ESC，然后：q！，或：wq，其中：q！表示退出不保存修改，：wq为保存修改。） 运行处理：

运行第一步：run –s1 运行第二步：run –s2 运行第三步：run –s3 运行第四步：run –s4 运行第五步：run –s5 运行第六步：run –s6 运行第七步：run –s7 运行第八步：run –s8 2，参数解说及设置。

2.1，第一步：读取主影像信息。 （1）需要处理步骤。

必需：m_readfiles(读取

振动流化床仿真操作过程及参数选择

1创建流化床模型。

根据靳海波论文提供的试验机参数，创建流化床模型。流化床直148mm，高1m，开孔率9%，孔径2mm。在筛板上铺两层帆布保证气流均布。

因为实验机为一个圆形的流化床，所以可简化为仅二维模型。而实际实验中流化高度远小于1m，甚至500mm，所以为提高计算时间，可将模型高度缩为500mm。由于筛板上铺设两层帆布以达到气流均分的目的，所以认为沿整个筛板的进口风速为均匀的。最终简化模型如下图所示：

上图为流化后的流化床模型，可以看出流化床下端的网格相对上端较密，因为流化行为主要发生的流化床下端，为了加快计算时间，所以采用这种下密上疏的划分方式。其中进口设置为velocity inlet；出口设置为outflow；左右两边分为设置为wall。在GAMBIT中设置完毕后，输出二维模型vfb.msh。

outflow边界条件不需要给定任何入口的物理条件，但是应用也会有限制，大致为以下四点：

1.只能用于不可压缩流动

2.出口处流动充分发展

3.不能与任何压力边界条件搭配使用（压力入口、压力出口） 4.不能用于计算流量分配问题（比如有多个出口的问题）

2打开FLUENT 6.3.26，导入模型vfb.ms

Western Blot

Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄（NC）膜或聚偏二氟乙烯（PVDF）膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术广泛应用于检测蛋白水平的表达。

流程：蛋白样品的提取→蛋白样品定量与变性→PAGE凝胶电泳→转膜→丽春红染色→封闭→抗体孵育→底物显色。

实验器材和试剂：

一． 蛋白提取试剂

1.10% SDS裂解液：

称取10g SDS粉末加入双蒸水至90mL，充分溶解，定容至100ml室温保存。 2.RIPA裂解液

1ml裂解液工作液配方： 10ul 100mmol/L PMSF (1mM) 0.2ul 10mg/ml Aprotinin (2ug/ml) 5.0ul 1mg/ml Leupeptin (5ug/

关于问卷一致性检验（重测信度检验问题操作步骤）

1.信度是指测量结果一致性、一贯性和稳定性。对于量表可采用ALPHa系数来检验量表的内在信度，即一组题目在测量某一概念的一致性。这种方法在我的讲义中已经讲述，这里不再细述。

2.对于一般问卷，特别是分类变量形式的题目，比如：您每周锻炼多少次？ ① 不锻炼，②每周1-2次，③每周3-4次，④每周5次以上

对这类问卷进行信度分析，主要是分析多次调查同一群体，所选结果的一致性程度，即重测信度，也称外部信度。所采用的方法主要是分析两次测量选项频率分布是否一致，如果两次测量选项百分比分布一致，说明信度较高。如果用定量指标来反映的话，可采用Kappa一致性系数。Spss具体操作步骤如下：

1） 数据录入

对同一题目两次调查结果录入两列，即两个变量。

2）Spss菜单：Analyze(分析)->descriptive statistic（描述统计）->Crosstab…（联表）

点击统计量（statistic）按钮，在弹出界面中选择卡方检验，点选kappa选项。

返回到主界面点击单元格（cell），选择行百分比，列百分比等。返回主界面。点击确定得到如下结果（选最后一个结果表）：

Symmetric Mea

Western Blot

Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄（NC）膜或聚偏二氟乙烯（PVDF）膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术广泛应用于检测蛋白水平的表达。

流程：蛋白样品的提取→蛋白样品定量与变性→PAGE凝胶电泳→转膜→丽春红染色→封闭→抗体孵育→底物显色。

实验器材和试剂：

一． 蛋白提取试剂

1.10% SDS裂解液：

称取10g SDS粉末加入双蒸水至90mL，充分溶解，定容至100ml室温保存。 2.RIPA裂解液

1ml裂解液工作液配方： 10ul 100mmol/L PMSF (1mM) 0.2ul 10mg/ml Aprotinin (2ug/ml) 5.0ul 1mg/ml Leupeptin (5ug/

蛋白质的双向电泳

一、 实验原理：

2-DE的第一向电泳等电聚焦是基于等电点不同而将蛋白粗步分离，第二向SDS-PAGE是基于蛋白质分子量不同，而将一向分离后的蛋白进一步分离。这样就可以得到蛋白质等电点和分子量的信息。 二、 实验步骤：

1. 芽孢杆菌蛋白质的提取

2. 蛋白质样品的纯化

将经过硫酸铵沉淀的蛋白质冷冻干燥，放在-80度冰箱里备用，取出蛋白质干粉300mg加水化液(尿素水化储备溶液)400ul，加丙酮酸（加DTT）1.6ml，放置-20度冰箱2h，离心，吸除丙酮酸，用超纯水中（加DTT），清洗两次，离心，加水化液溶解。 水化液配置：用dd H20定容

水化液 尿素（60.06）

硫脲（76.12） CHAPS DTT(154.2)

浓度 7M/L 2M/L 4% 1%

100ml 42.0g 15.2g 4g 1g

20ml 8.4g 3.04g 0.8g 0.2g

（注：DTT现用现加）

3. Bradford法测蛋白含量

取0.001g BSA（牛血清白蛋白）用1ml超纯水溶解,测定BSA标准曲线及样品蛋白含量。 取7个10ml的离心管，首先在5个离心管中按次序加入0ul, 20ul, 40

4 基因工程的操作过程

A DNA的体外重组(切、接) B 重组DNA分子的转化和扩增(转、增) C 转化子的筛选和鉴定(检)

4 基因工程的操作过程切 接 转

增 检

4 基因工程的操作过程A DNA的体外重组(切与接)同种内切酶生产的粘性末端的连接 同尾酶生产的粘性末端的连接 重组率

同种内切酶生产的粘性末端的连接5' GAATTC CTTAAG EcoRI 5' G CTTAA 5' 5' AATTC G G CTTAA 5' 5' AATTC G GAATTC CTTAAG 5'

5'

退火5' 5' G AATTC CTTAA G G AATTC CTTAA G T4-DNA ligase 5' 5' GAATTC CTTAAG GAATTC CTTAAG G AATTC CTTAA G G AATTC CTTAA G

5'

5'

5' 5'

GAATTC CTTAAG

GAATTC CTTAAG

同尾酶生产的粘性末端的连接5' BclI 5' T ACTAG 5' 5' GATCA T TGATCA ACTAGT 5'

5'

GGATCC CCTAGG BamHI 5' GATCC G

GGATCC CCTAGG

5'

5'

G CCTAG 5'

退火5' 5' T G

Panel Data模型的EViews操作过程

两种模式：

Ⅰ. 关于Panel工作文件； Ⅱ. 关于Pool对象。

数据的预处理

1.在EXCEL文件中，将每个变量各年的原始数据按照年份顺序排成一列，称之为堆积数据（见表“汇总0”）。

2．输入截面单元的标识（表示地区的符号，前面加_；如：_HB、_NMG等）。 3．将数据表按照时间分类（即排序，见表“汇总”）。

Ⅰ. 关于Panel工作文件的操作过程

案例1：我国农村居民消费函数（2000-2010年，27个省市数据，工作文件：NXF） 一、输入数据

1、创建Panel工作文件

选择File / New / Workfile，在出现的创建工作文件对话框中： （1）在文件结构类型中，选择“平衡面板（Balanced Panel）”； （2）输入起始、终止期，截面单元个数。

- 1 -

工作文件中将生成分别表示截面标识和时期标识的两个序列： Crossid — 截面标识 dateid — 时期标识

2．更改截面标识（可以省略）

序列crossid中是以数字1、2、?标记截面标识，为了便于区分，可以重新定义一个字符串序列。

（1）点击object / New object，选择serie

大孔树脂吸附操作流程及注意事项

一、〖大孔吸附树脂的说明书、规格、标准〗 .... - 2 - 二、〖大孔吸附树脂的选择〗 .................. - 3 - 三、〖大孔吸附树脂的预处理〗 ................ - 5 - 四、〖大孔吸附树脂的吸附条件和解吸附条件的选择〗- 6 -

五、〖大孔吸附树脂的吸附〗 .................. - 8 - 六、〖大孔吸附树脂的工艺验证〗 ............. - 10 - 七、〖大孔吸附树脂的再生及使用有效期〗 ..... - 11 - 八、〖大孔吸附树脂的残留测定〗 ............. - 12 -

- 1 -

一、〖大孔吸附树脂的说明书、规格、标准〗

大孔吸附树脂是一类新型非离子型高分子聚合物，具有选择性吸附有机化合物的能力，其吸附作用是通过表面吸附、表面电性或形成氢键等完成的，被广泛应用于药学领域，如抗生素的提取分离、天然产物的分离、中药有效成分的提取分离和复方制剂中杂质的去除等。

大孔吸附树脂是以苯乙烯和丙烯酸酯为单体 ,加入二乙烯苯为交联剂 ,甲苯、二甲苯为致孔剂 ,它们相互交联聚合形成了多孔骨架结构。树脂一般为白色的球状颗粒 ,粒度为

1.问：word里边怎样设置每页不同的页眉？如何使用不同的章节显示的页眉不同？答：分节，每节可以设置不同的页眉 文件--页面设置--版式--页眉和页脚---首页不同。 2.问：word中怎样让每一章用不同的页眉？答：在插入分隔符里，选插入分节符，可以选连续的那个，然后下一页改页眉前，按一下“同前”钮，再做的改却就不影响前面的了。简言，分节符使得它们独立了。这个工具栏上的“同前”按钮就显示在工具栏上，不过是图标的形式把光标移到上面就显示出“同前”两个字来。 3.问：如何合并两个word文档，不同的页眉需要先写两个文件，然后合并，如何做？答：页眉设置中，选择奇偶页不同/与前不同等选项。

4.问：word编辑页眉设置，如何实现奇偶页不同？比如单页浙江大学学位论文，这一个容易设双页，（每章标题），这一个有什么技巧啊？答：插入节分隔符，与前节设置相同 再设置奇偶页不同。

5.怎样使word文档只有第一页没有页眉，页脚？答：页面设置--页眉和页脚，选首页不同，然后选中首页页眉中的小箭头，格式--边框和底纹，选择无，这个只要在“视图”--页眉页脚，其中的页面设置里，不要整个文档就可以看到一个“同前”的标志，不选，前后的设置情况就不同了。

6.如何从第