烟草转基因流程

一、取出保存的甘油菌，用接种环划线接种到LB固体培养基上，培养8—12h至单克隆长到2mm左右。

二、挑选独立的单克隆，用牙签接种到含相应抗生素的LB液体培养基中，37℃，220rpm的摇床上培养6—7h。

三、收获细菌，碱裂解法小量抽提质粒。 1、用1.5ml离心管收集菌液12000rpm离心1min

2、加100μL预冷溶液I，悬浮细菌，吸打均匀，也可vortex 3、加200μL溶液II，迅速颠倒离心管3—5次，至溶液澄清透明 4、加150μL预冷溶液II，迅速颠倒离心管3—5次，有大量白色沉淀生成

5、12000rpm离心5min，上清转移到干净的1.5ml离心管中，(加200微升Tris饱和酚和200微升氯仿：异戊醇24:1，颠倒混匀，放置5min，12000rpm离心10min，上清转到新的离心管)

加两倍体积的95%乙醇，放置2min。

6.12000rpm离心5min，弃上清，倒置10min，除尽残液

7.加1ml75%的乙醇洗涤，12000rpm离心5min，弃上清，倒置10min，除尽残液 8、加50μL含RNAse的TE(20μg/ml)，-20℃贮存

四、酶切质粒和目的基因

2μLBuffer

2．材料与方法

2.1实验材料

植物材料：K326烟草种子

药品：MS大量元素，MS微量元素，MS铁盐,吲哚乙酸（IAA），6-苄氨基腺嘌呤（6-BA），烟肌醇(B1B6),蔗糖，琼脂，头孢霉素（Cef），羧苄青霉素（Carb），卡那霉素（Kn）、庆大霉素、利福平等；

MS培养基(1L):大量元素(20x)50ml、微量元素(100x)10ml、Fe2+(100x)10ml、蔗糖30g、琼脂8g，PH值约为6.0

预培养基(1L)：大量元素(20x)50ml、微量元素(100x)10ml、Fe2+(100x)10ml、6-BA(1000x)2ml、B1B6(200x)5ml、甘氨酸(1000x)1ml、琼脂8g，PH值约为6.0。高温灭菌后加IAA(0.2mg/L)1ml

分化培养基(1L)：预培养基的基础上加入头孢霉素2ml，羧苄青霉素1ml，卡那霉素1ml.

生根培养基(1L)：1/2MS、IAA 2mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.8g/L，pH=5.8 LB液体培养基(1L)：胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、NaCI 10g MS0培养基：为不加琼脂的只含大量元素MS培养基

2.3实验方法

2.3.1浸染菌液制备

将含有目的基因的农杆

TaNAC提高转基因烟草的抗旱功能

82

中国烟草学报 2010年12月第16卷第6期

生物技术

TaNAC提高转基因烟草的抗旱功能

刘美英1,2,冶晓芳2,唐益苗2,高世庆2,张 朝1,2,赵昌平2,陈学平1

1中国科学技术大学研究生院,化学系,合肥市金寨路96号230026;

2北京市农林科学院,杂交小麦工程技术研究中心,北京市海淀区西郊板井曙光花园中路9号100097

摘 要:NAC(NAM ATAF CUC)转录因子在植物逆境胁迫应答反应中发挥重要作用。通过同源克隆的方法从小麦中分离得到一个编码NAC转录因子的基因 TaNAC,该基因编码的蛋白序列结构特殊,N端为保守性差的NAC保守域,只包含A,B,D3个亚结构域,进化关系上与DREB家族更近,其C端共同享有多个基序。实时荧光定量PCR实验证实TaNAC基因受干旱诱导24h后强烈表达。将该基因构建到PBI121双元植物表达载体的35S启动子下游,通过农杆菌介导的叶盘转化法转入烟草,获得T1代转基因苗。模拟干旱胁迫处理实验表明,过量表达TaNAC的转基因烟草表现出明显优于野生型对照的抗旱功能,说明TaNAC基因的过量表达能够提高烟草抗旱能力,TaNAC可以作为烟草抗旱育种的优良候选基因资源

第四节 转基因生物和转基因食品

一、学习目标：

（1）简述基因工程的基本原理。

（2）举例说出基因工程在农业、医药等领域的应用。 （3）收集基因工程所取得的成果以及发展前景。

（4）通过对书中插图、照片等的观察，学会科学的观察方法，培养学生收集和处理科学信息的能力、获取新知识的能力、分析和解决问题的能力。 二、学习重点和难点 1.重点

(1)基因工程的基本原理。 (2)基因工程的安全性问题。 2.难点

(1)基因工程的基本原理。

(2)转基因生物与转基因食品的安全性。 三、知识结构：

（一）基因工程的概念：按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里， 地改造生物的遗传性状。又叫基因拼接技术或DNA重组技术。 （二）基因工程的基本内容 1．基因的操作工具

⑴基因的剪刀— ：主要存在于 中，一种限制性

内切酶只能识别一种特定的 ，因此限制性内切酶也具有专一性。

⑵基因的针线— ：把前一条脱氧核苷酸序列中的脱氧核糖基团与后一条脱氧核苷酸序列中的 “缝合”起来需要DNA连接酶。

⑶基因的运输工具— ：运载体必须具备的条件有：①能够在宿主细胞内 并稳定

中国转基因作物现状

201013020427杨艳艳

摘要：上世纪八十年代，转基因烟草开始在中国种植，迄今为止，中国已有20年转基因作物种植历史。

当前，全球转基因作物研发和产业化迅猛发展，中国也紧随其后，商业化的转基因作物种植铺展开来。与此同时，公众对转基因作物的质疑不断，公众要求去转基因化的呼声也愈来愈高。转基因作物是否就如专家所说的那样对人体、环境有益而无害？

关键词：转基因作物；中国；现状

21世纪伊始，作为生物革命前沿的转基因农作物日益成为全球化进程中的热点与焦点问。围绕着转基因技术及产品的讨论与争端，诸如进出口贸易、生物安全、食品安全、知识产权等一系列问题，不仅频频出现在科技、经济领域，也成为政治、社会领域中纷争不断的话题。转基因技术被视为一种全球化的生物技术革命，而它在不同的国家，因各自不同的政治体制、社会构成与文化传统，又遭遇不同的市场反映。有着不同的命运。

而在中国，转基因农作物不断遭到质疑。跨国企业的垄断，转基因作物对环境，人类健康的危害等问题一直是人们热议的话题。本文将对转基因作物对中国所带来的一些问题进行探讨。

1 我国已发放安全证书的转基因作物种类

1.1已发放安全证书的转基因作物种类

截至目前为止，我国已为7种转基因

所谓转基因食品， 就是通过基因工程技术将一种或几种外源性基因转移到某种特定的生物体中，并使其有效地表达出相应的产物（多肽或蛋白质），此过程叫转基因。以转基因生物为原料加工生产的食品就是转基因食品

那么我们来详细分析转基因食品的利与弊，就我们现在所认知的转基因的优点为：

第一.解决粮食短缺问题，这是转基因当初研制的基础想法，也是转基因的最大优势，转基因是取优秀基因进行优化的。

第二.减少农药使用，避免环境污染，转基因食品取了其他基因的优点，这样可以减少农药的使用，从一定程度上避免了污染环境。

第三.节省生产成本，降低食物售价， 转基因食品因为成本低，所以它的售价也相对要低，这是人吗最看重的优点之一。

第四.增加食物营养，提高附加价值，增加附加值是转基因食品的特点，可以很大程度的提高食品营养。 第五.增加食物种类，提升食物品质，转基因从一定程度上，是在创造一种新的物种，自然也就能增加食物种类。

第六.促进生产效率，带动相关产业 ，转基因食品体验很大的促进生产效率，带动产业的发展。 第七。从某一方面对健康有保障。比如说，抗虫的转基因玉米不会被虫咬，这就减少了微生物侵害的几率，对我们的健康是一个保障。

转基因的缺点

第一，

羊转基因育种

动物的转基因与转基因育种

--体细胞核移植技术在转基因山羊上的研究 1 前言

转基因技术是近年来生命科学中最热门、发展较陕的领域之一，由于转基因技术是一种能通过对基因的操作，在RNA、蛋白质、形态学或生理学等水平直接观察基因在活体内的活动情况及其表达产物所引起的表型效应的四维实验体系，应用已广泛渗透于分子生物学、发育生物学、免疫学及畜牧育种等各个研究领域。动物转基因技术是在经典遗传学、分子遗传学、结构遗传学和DNA重组技术的基础上, 运用基因工程等实验技术手段, 将分离得到的外源目的基因或重组基因导入动物受精卵或早期胚胎细胞中, 使之整合到宿主细胞基因组内, 随细胞的分裂而增殖, 并稳定地遗传给下一代的一种生物技术。目前，动物育种的方法都是建立在利用种内变异的基础上的，因而其变异来源就很有限。转基因动物技术的应用，可以打破种间生殖隔离的天障，从而极大地提高畜禽遗传改良的幅度和速度，同时还可根据人们的需求创造出一些非常规的畜牧产品。然而，转基因动物技术应用于动物育种的工作仍处实验研究阶段，许多关键性的技术问题未得到完善解决。尽管如此，科学家们对转基因动物技术的应用仍寄予厚望。随着基因工程技术的不断发展，转基因动物技术将会不断得到完善，从

转基因技术的利与弊

摘要 21世纪是生物技术的世纪，这是一个新兴独立的技术领域。随着基因技术的快速发

展，它对人类社会带来了巨大的冲击, 转基因技术在农业、 食品、 医药、环保等方面有着广泛应用, 但转基因技术具有双重性，它在给人类社会的发展带来巨大的经济效益和社会效益的同时也存在着潜在危险，并引起一系列的社会问题、伦理问题， 还有可能影响生态环境,危害人类健康。 关键词 转基因 伦理问题 生态环境

一、转基因技术的定义及其获得

转基因技术是以重组DNA技术为核心，利用分子生物学技术，将人工分离和修饰过的基因导入到生物体基因组中，由于导入基因的表达，引起生物体性状的可遗传修饰，这一技术称之为转基因技术（Transgene technology）。人们常说的\遗传工程\、\基因工程\、\遗传转化\均为转基因的同义词。转基因的获得是取自现有的生物体的 DNA，制内切酶或外酶把 DNA切割成若干小段，然后再把这些小段用连接酶接入载体,并建成载体克隆 把理想基因载体放入大肠杆菌等宿主细胞中扩大 增殖，或采用 PCR 的方法扩增 再对扩增的 DNA片断进行适当修饰，然后进行转移，或将特定的控制序列连接到目的基因的结构序列上，从而创造一个新的重组基因

基因与人类生活课程论文

姓名： 陈杰 学号： 1103070601 学院： 计算机 老师： 周跃钢 日期： 2014/4/18

题目：论转基因技术的利与弊 前言：

随着科技的飞速发展，基因世纪渐渐地走进了我们的生活，为此，大量的转基因食品、花卉奔向了市场。例如2005年，中国载人航天飞船顺利升空，不仅带去了荣耀，也附带的带去了一些植物种子。 例如带去的青椒的种子，强大的宇宙辐射让种子发生了变异，内部的基因发生了翻天覆地的变化。结果，种出来的请教，形状与原来纯种的青椒有明显不同，我们把这种新型的转基因变异青椒叫做“太空椒”。这种青椒，个头大，颜色浅，营养含量高。备受大多数消费者喜爱。

转基因技术在某些方面的优势：

一、转基因技术可以制药

随着生活水平的提高，人们的生活质量越来越高，饮食种类日益丰富，糖尿病患者也随之日益增加，如果但是从动物胰脏中提取胰岛素，一个病人一年的用量相当于从40头牛的胰脏中提取的胰岛素量，造成胰岛素价格昂贵且供不应求。后来，科学家尝试利用细菌合成人胰岛素，将胰岛素基因插入到细菌的质粒中，通过细菌繁殖开始生产人胰岛素，由于

转基因食品目录

转基因食品目录（转）(2010-03-14 20:30:56)转载标签：转基因食品目录健康 分类：新闻资讯站

中国农业部已经批准种植的转基因农作物有：甜椒、西红柿、木瓜；主粮作物有玉米、水稻。今后可能陆续批准的农作物有小麦、甘薯、谷子、花生、高粱等主要食粮。进口大豆全部是转基因的。目前只有花生油不是转基因的。麦当劳、肯德基的食品基本全部是转基因的。猪、牛、鸡饲料是转基因玉米、转基因大豆。转基因大豆油是用6号轻汽油浸出的。这种轻汽油含有致癌成分。

没有承诺不使用转基因成份，或没有回应查询的品牌：

食用油和调味品：太太乐、辣得劲、迎春楼、四季宝、金象牌、粤皇、味好美牌、美味鲜牌、贵夫人、家乐、老蔡、阿香婆、元宝牌、百味佳牌、老才臣牌、鹰唛、好乐门、红宝牌、福临门、红灯牌、狮头唛、大满贯、鸿禧牌、金龙鱼、花旗、刀唛

希望大家都能看到啊..

饼干：乐之、趣多多、鬼脸嘟嘟、奥利奥、天伦、美嘉思、丹麦蓝罐曲奇

即溶饮品及冲调食品：雀巢、美禄、雀巢巧伴伴、麦斯威尔、果珍、伊利、南方、金味、南国、百草堂、荔八江。

饮料及奶制饮品：康师傅、伊利、杨协成 、非常可乐、京华、娃哈哈、新奇士

婴儿食品及奶粉：雀巢、三鹿、伊利、安