拟南芥t-dna突变体鉴定

本科生文献综述

题 目

拟南芥突变体的筛选综述

系 别

林学与园艺学院

班 级

姓 名

园艺102班

唐辉

学 号 103231228

答辩时间 年 月

新疆农业大学 林园 学院

拟南芥突变体的筛选综述

唐辉 指导老师：王燕凌

摘要：本文归纳了拟南芥抗旱、抗氧化、耐低钾、耐硒、耐盐、晚花突变体筛选的研究内容。在拟南芥抗旱突变体筛选中将用到甘露醇模拟干旱胁迫来进行试验。在抗氧化、耐低钾、耐硒中将用到Na2SeO3、钾、硒、NaCl等化合物或者化学元素对拟南芥突变体的生长发育影响来进行拟南芥突变体的筛选。概括了拟南芥突变体在甘露醇模拟干旱中的生长影响以及

RMD水稻突变体信息及基因型鉴定

1. 背景介绍：

突变体对于遗传学研究有着重要作用，随着拟南芥和水稻等物种全基因组测序的开展，人类积累了前所未有的基因序列信息，为了弄清这些基因序列的生物学信息，寻找该基因区段序列发生变异的突变体是阐释基因功能最直接最有效的方法。

植物在自然的环境条件下也会产生突变性状，早期普通正向遗传学研究往往通过寻找与某种生物学特性相关的突变体来发掘或定位某个特定基因。为配合植物功能基因组研究高通量的策略，构建水稻等物种的大型突变体库已成为必然，借助水稻全基因组测序信息、通过反向遗传学的手段大规模地筛选突变体库，理论上可以获得基因组中任一基因的突变体，最终实现阐释基因功能的目的。

2. 原理：

2.1农杆菌介导的T-DNA 插入

农杆菌是寄主范围非常广泛的土壤杆菌，它能通过伤口侵染植物导致冠瘿瘤 和毛状根的发生。1974从根癌农杆菌中分离出一种与肿瘤诱导相关的质粒，称为致瘤质粒（Tumor-inducing plasmid），简称Ti 质粒。Ti 质粒上存在一段DNA，能够转移并整合到植物基因组中，称为Transferred DNA，简称T-DNA。 研究发现，T-DNA 两端存在非常保守的同向重复的25bp 序列，

作物学报,农作物,期刊,一级学报

作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2011, 37(4): 629 634

ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9

/zwxb/

E-mail: xbzw@

DOI: 10.3724/SP.J.1006.2011.00629

水稻颖壳和浆片异常突变体ahl的基因定位

王 增 李云峰** 马 娇 任德勇 王德仲 游小庆 桑贤春 何光华*

西南大学水稻研究所 / 转基因植物与安全控制重庆市重点实验室, 重庆400716

摘 要: 研究水稻花发育基因对于水稻相关性状的分子育种具有十分重要的意义。本研究报道了一个水稻颖壳和浆片异常突变体ahl (abnormal hull and lodicule), 来源于优良恢复系缙恢10号的EMS诱变群体。该突变体内外稃变小并发生严重扭曲, 浆片顶端伸长。内外稃异常导致灌浆后米粒变小、畸形, 千粒重下降。该性状遗传稳定, 受1对隐性基因控制, 利用群体分离分析法 (bulked segregation analysis, BSA)将AHL基因定位在第2染色体上的SSR标记RM14153与RM14167之间, 遗传

利用不同理化条件诱变获得果蝇突变体的研究

赵 颖，马志红，赵航渊，马雅钦，李承贤，赵宝存，齐志广

（河北师范大学 生命科学学院，河北 石家庄 050024）

摘 要：以野生型黑腹果蝇和白眼突变体为材料，采用紫外线、热激和EMS的方法分别在幼虫、蛹、成虫等发育阶段进行诱变处理，结果表明，紫外线照射白眼果蝇的蛹2h，可使羽化当代出现无翅果蝇，其子二代可出现纯合致死的残翅突变型和可遗传的双焦翅突变型；而紫外线照射成蝇虽使果蝇有突变体出现，但突变体要么死亡要么其后代性状恢复正常。热激白眼果蝇幼虫2h可引起遗传突变，并能得到稳定遗传的突变体，4h、8h可引起不能稳定遗传的突变；热激果蝇蛹和成蝇也能引起遗传突变。用含0.5%EMS的培养基培养对果蝇雌蝇的卵细胞影响较大，其后代的突变体较多，而对雄蝇的精子影响则相对较小，后代几乎没有突变体出现。

关键词：果蝇 紫外线 热激 EMS 突变体

The research of fruit flies’ mutants which are produced by different physical and chemical methods

ZHAO Ying，MA Zhihong，ZHAO Han

中国农业科学 2010,43(2):223-229 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.02.001

两个新的水稻叶色突变体形态结构与遗传定位研究

1

2

1

2

1

2

1

2

1

张力科，李志彬，刘海燕，李如海，陈满元，陈爱国，钱益亮，华泽田， 高用明，

11,3

朱苓华，黎志康

（1中国农业科学院作物科学研究所，北京 100081；2辽宁省稻作研究所，沈阳 110101；3 International Rice Research Institute, DAPO Box7777,

Metro Manila, Philippines）

摘要：【目的】对2个新的水稻叶色突变体进行形态结构与遗传分析，并且初步定位这2个突变基因。【方法】在水稻育种材料中分别发现了一株白色条纹叶突变体和一株黄叶突变体，经多代自交已形成稳定的突变系。对突变体的主要形态特征与叶绿素组分等进行分析，观察叶绿体的超微结构，并以这2个突变系杂交产生的F2群体作为定位群体，应用SSR标记对突变基因进行初定位。【结果】与

农药学学报　2008,10(3):3032310

C h inese J ourna l of Pesticide Science

?研究论文?

番茄叶霉病菌异菌脲抗药性突变

体的诱导与生物学性状

张传清31,2,　马忠华2,　朱国念2

(1.浙江林学院农业与食品科学学院,杭州311300;2.浙江大学农业与生物技术学院,杭州310029)

摘　要:测定了苯并咪唑类杀菌剂敏感2乙霉威抗性(B en S2D ie R)、苯并咪唑类杀菌剂抗性2乙霉威敏感(B en R2D ie S)和苯并咪唑类杀菌剂抗性2乙霉威抗性(B en R2D ie R)3种类型的番茄叶霉病菌

C ladospo rium fulvum菌株对不同类型药剂的敏感性。结果表明,蕃茄叶霉病菌对供试药剂的敏感

性与其对苯并咪唑类杀菌剂及乙霉威的敏感性无关。根据药剂对3类菌株EC

值的平均值,

50 16种杀菌剂抑制菌丝生长的活性依次为腐霉利>乙烯菌核利>异菌脲>戊唑醇>百菌清>嘧霉胺>醚菌酯>代森锰锌>82羟基喹啉铜>丙环唑>苯醚甲环唑>嘧菌酯>灭锈胺>烯酰吗啉>烟酰胺>三唑酮;抑制孢子萌发的活性依次为醚菌酯>腐霉利>百菌清>乙烯菌核利>灭锈胺>82羟基喹啉铜>异菌脲>代森锰锌>嘧菌酯>烟酰胺>嘧霉胺

质粒营救法和TAIL-PCR法获得水稻 T-DNA旁邻序列的效率比较

农业生物技术学报JournalofAgriculturalBiotechnology2004,12渊1冤院13~18

·研究论文·

质粒营救法和TAIL-PCR法获得水稻T-DNA旁邻序列的效率比较

张帆金维正陈双燕

吴运荣刘非燕吴平*

（浙江大学生命科学院，植物生理学与生物化学国家重点实验室，杭州310029）

摘要：获得突变体中T-DNA的旁邻序列是通过反向遗传学进行功能基因研究的重要手段。实验比较了用质粒营救法和TAIL-PCR法获得T-DNA在水稻(

基因组中旁邻序列的效率。利用质粒营救法获得T-DNA在水稻中的旁邻序列

效率可高达90%左右，而利用TAIL-PCR法的效率只有62%。质粒营救法和TAIL-PCR法获得的旁邻序列中水稻基因组DNA水稻基因组DNA的效率是的效率分别是80%左右和89%左右。根据实验结果，质粒营救法从转基因植株获得的旁邻序列，72%，比TAIL-PCR法高18%。

关键词：水稻；T-DNA；质粒营救法；TAIL-PCR

ComparisonoftheEfficiencyBetweenPlasmidRescueandTAIL-PCRMeth

“DNA 的粗提取与鉴定”实验研究综述

摘要：“DNA 的粗提取与鉴定”的实验，实验原理较抽象复杂，实验步骤多，实验效果不理想，因此目前我国在实验材料的选择、实验试剂的处理和用具的选择、实验方法的优化和实验教学设计的创新等方面有较多的研究。本文试对DNA 的粗提取与鉴定的实验研究进展和教学作一综述。 关键词：DNA 的粗提取与鉴定 实验改进 教学设计 中图分类号：G633.91

“DNA 的粗提取与鉴定”实验是人教版高中生物选修1《生物技术实践》专题五课题1 的实验内容，教材中详细介绍了动植物细胞DNA 提取、分离、提纯所涉及到的一般原理、方法和实验材料的选取，但并没有以哪一种材料为例具体介绍其操作过程。且在DNA 分离、提纯过程中理想的方法应该是通过离心来不断分离、提纯，而一般中学的实验室又不具有离心设备，这就对本实验的可行性带来了一定的影响。为了使实验变得简单、可行，许多学者对该实验进行了研究与改进。

1.实验原理

真核生物DNA 核蛋白的溶解度随NaCl 浓度的变化而改变。在0.14 mol/L时,溶解度最小, 而在纯水或1 ～ 2 mol/L的盐溶液中, 溶解度则较大。利用这一原理, 可以将DNA 溶于NaCl 溶液中, 而与其

“DNA 的粗提取与鉴定”实验研究综述

摘要：“DNA 的粗提取与鉴定”的实验，实验原理较抽象复杂，实验步骤多，实验效果不理想，因此目前我国在实验材料的选择、实验试剂的处理和用具的选择、实验方法的优化和实验教学设计的创新等方面有较多的研究。本文试对DNA 的粗提取与鉴定的实验研究进展和教学作一综述。 关键词：DNA 的粗提取与鉴定 实验改进 教学设计 中图分类号：G633.91

“DNA 的粗提取与鉴定”实验是人教版高中生物选修1《生物技术实践》专题五课题1 的实验内容，教材中详细介绍了动植物细胞DNA 提取、分离、提纯所涉及到的一般原理、方法和实验材料的选取，但并没有以哪一种材料为例具体介绍其操作过程。且在DNA 分离、提纯过程中理想的方法应该是通过离心来不断分离、提纯，而一般中学的实验室又不具有离心设备，这就对本实验的可行性带来了一定的影响。为了使实验变得简单、可行，许多学者对该实验进行了研究与改进。

1.实验原理

真核生物DNA 核蛋白的溶解度随NaCl 浓度的变化而改变。在0.14 mol/L时,溶解度最小, 而在纯水或1 ～ 2 mol/L的盐溶液中, 溶解度则较大。利用这一原理, 可以将DNA 溶于NaCl 溶液中, 而与其

DNA的粗提取与鉴定（选修）

一、实验原理

1．DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl溶液浓度的变化而改变的。当NaCl物质的量浓度为0.14mol / L时，DNA的溶解度最低。

2．DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的其他许多物质则可以溶于酒精溶液。 3．DNA遇二苯胺会染成蓝色（遇甲基绿溶液被染成蓝绿色）。 4．鸟类红细胞有细胞核，核内DNA与蛋白质结合成染色质。

二、实验步骤

实验步骤 制备鸡血细胞液 （由教师完成） 1．提取鸡血细胞细胞核物质 操作方法 实验原理 取质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液100mL，柠檬酸钠能防止血液与新鲜的鸡血混合并搅拌，然后在冰箱内静置一凝固，静置使血细胞天，除去上清液，即得鸡血细胞液 与血浆分离 取20mL蒸馏水与约5－10 mL的鸡血细胞液混合并沿一个方向快速充分搅拌，然后用单层纱布过滤，取滤液于烧杯中 取质量浓度为2mol/L的NaCl溶液40mL与上述滤液混合后，沿一个方向轻轻搅拌，核中DNA溶解，染色质中的DNA与蛋白质分离 沿烧杯内壁慢慢加入蒸馏水并沿一个方向轻轻搅拌，至白色丝状粘稠物不再增加时停止加水 用多层纱布过滤，取纱布上的粘稠物 使细胞过度吸水而破裂 DNA在高浓度Na