高效液相含量测定注意事项

缓冲盐使用不当对色谱柱的影响及解决办法! 2015-07-09实验与分析实验与分析在色谱分析过程中常常需要使用缓冲盐来调节流动相的pH 值，缓冲盐的不当使用对色谱柱可能造成柱压升高、柱效下降以及使化合物的保留时间发生变化等影响：

1)柱压升高; 原因：缓冲盐使用不当导致缓冲盐析出，堵塞塞板和键合相颗粒之间的孔隙，阻碍流动相传质，引起柱压升高;2)相同化合物的保留时间发生变化; 原因：如果没有冲洗干净就进行进样，色谱柱内含有的盐会使化合物的保留时间发生变化;3)柱效下降; 原因：i)有些缓冲盐会渗入到键合相的深处，损害硅胶基体，导致色谱柱键合相流失，柱床变松，柱效下降;ii)凝结在键合相表面，使C18碳链难以舒展，对物质的保留能力下降，导致柱效下降。因此用过缓冲盐后需要对色谱柱进行冲洗，水中缓冲盐浓度较大时应特别引起注意。流动相中缓冲盐的正确使用方法1. 使用前的处理: 在使用缓冲盐作流动相之前需要用不含缓冲盐的流动相冲洗色谱柱，直至基线平稳。 原则上，用于冲洗的流动相与分析时所用的流动相含水的比例相同(或含水更多)，不同的只是用于冲洗用的流动相中不含缓冲盐。 理由：缓冲盐通常易溶于水，难溶于有机溶剂。用含缓冲盐的(特别是做流动相的水为饱和

岛津液相色谱仪注意事项

1.流动相必须用HPLC级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。

2.流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。 3.不能用纯乙腈作为流动相，这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。 4.使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时，然 后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上，以充分洗去离子。对于柱塞杆 外部，做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。 5.长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水保存柱子，而应该用有机相(如甲醇等)，因为纯水易长霉。 6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。 7.C18柱绝对不能进蛋白样品，血样、生物样品。

8.堵塞导致压力太大，按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查 并清洗。清洗方法；①以异丙醇作溶剂冲洗：②放在异丙醇中间用超声波清 洗；③用10％稀硝酸清洗。

9.气泡会致使压力不稳，重现性差，所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。

10.如果进液管内不进液体时，要使用注射器吸液：通常在输液前要进行流动相 的清洗。

11.要注意柱子的PH值范围，不得注射强酸强碱的样品，

高效液相色谱测定苯萘蒽的含量

一 实验目的

1 熟悉HPLC的结构和操作 2 了解反相高效液相色谱法 3 掌握峰面积归一化法定量方法 二 实验原理 1 仪器结构

储液器→高压泵→进样器→色谱柱→检测器→记录仪 ↓ ↓

梯度洗脱 馏分收集器

2 分离原理

在反相高效液相色谱中其分离原理取决于组分与固定相间作用力的大小差异，组分的非极性相对最强，与固定相作用最强，故保留时间最长，最后被洗脱。

3 归一化法

（1） 定量校正因子：fi’ 即 mi=fi’*Ai

（2） 实验一般用相对定量校正因子：fi fi =As*mi/Ai*ms式中i指样品；

s指标准品，用各组分的标准样品可求出各组分的fi （3） 求各组分含量

Xi=Ai*fi/(A1f1+A2f2+…Anfn)*100%

三 仪器与试剂

1 shimudza高效液相色谱仪，7725i手动进样伐，微量注射器（25μL）,C18柱（250mm×4.6mm,5μm）,超声波脱气机，抽滤器。

2 试剂：甲醇、苯、萘和蒽均为分析纯，水为二次蒸馏水，苯、萘和蒽标准溶液（浓度均为100μg/mL）

高效液相色谱测定苯萘蒽的含量

一 实验目的

1 熟悉HPLC的结构和操作 2 了解反相高效液相色谱法 3 掌握峰面积归一化法定量方法 二 实验原理 1 仪器结构

储液器→高压泵→进样器→色谱柱→检测器→记录仪 ↓ ↓

梯度洗脱 馏分收集器

2 分离原理

在反相高效液相色谱中其分离原理取决于组分与固定相间作用力的大小差异，组分的非极性相对最强，与固定相作用最强，故保留时间最长，最后被洗脱。

3 归一化法

（1） 定量校正因子：fi’ 即 mi=fi’*Ai

（2） 实验一般用相对定量校正因子：fi fi =As*mi/Ai*ms式中i指样品；

s指标准品，用各组分的标准样品可求出各组分的fi （3） 求各组分含量

Xi=Ai*fi/(A1f1+A2f2+…Anfn)*100%

三 仪器与试剂

1 shimudza高效液相色谱仪，7725i手动进样伐，微量注射器（25μL）,C18柱（250mm×4.6mm,5μm）,超声波脱气机，抽滤器。

2 试剂：甲醇、苯、萘和蒽均为分析纯，水为二次蒸馏水，苯、萘和蒽标准溶液（浓度均为100μg/mL）

液相色谱系统的日常维护及注意事项

液相色谱系统的日常维护及注意事项（之一）

仪器安装条件与注意事项

1、 安装本仪器的实验台应水平、稳固、并具有足够的放置空间。避免在具有腐蚀性气体、大量灰尘或能产生强磁场的地方安装本仪器，否则将会影响仪器的正常运转及缩短仪器的使用寿命。

2、 由于仪器所用溶剂是易燃并且有毒，故安装设备的房间应通风良好，应具有向外排风的装置，否则可能引起中毒或身体不适，也可能会引起火灾。 3、 应安装四个以上三芯电源插座（220V，5～10A），必须具有专门的接地线（注意，绝不能将电源线的中线作为接地线），并确保输出电源的电压稳定，否则会导致仪器的不正常运作。如果实验室无专用接地线，一般可用φ15～20mm的铜棒打入地下1～1.5米，用φ1.2mm左右的塑胶单股导线连接到电源插座的接地端。

4、如果实验室电压不稳定，应使用稳压器等必要设备，使电源电压稳定。 5、实验室的室温应控制在15℃～30℃范围内，并且波动要小；湿度在45～80%范围内。

6、由空调或其他设备产生的气流不要直吹仪器，避免光线直射及振动。

仪器的启动顺序：先开高压恒流泵和紫外检测器，待紫外检测器自检完毕，回到默认波长254nm后，再开计算机及打开工作站软件。

高效液相法测定阿托伐他汀钙胶囊含量以及有关物质。。。。

药物分析杂志 C i hr nl 0 72 ( 2 hnJP am A a 20,7 0 )

6 - - 7 ——2——

H L P C法测定阿托伐他汀钙胶囊的含量及有关物质李文莉，钟庆元，文庆(湖南省药品检验所，长沙 4 0 0 ) 10 1摘要目的：建立 H L P C法测定阿托伐他汀钙胶囊的含量及有关物质。方法：采用 Mir o c sr o b—MV 10— 。 0 5C。色谱柱 ( 5 l 2 0nn l

x . m, m)以醋酸铵缓冲液[ 15 醋酸铵溶于 10 L水中， 4 6m 5 , (. 4g 00m用醋酸调节 p H为( . 0 0 ) 4 0士 .5]一乙腈 (0 4 ) 6:0为流动相，流速为 0 8m m n检测波长为 24 a柱温为 3 . L i~, 4 m, 0℃。结果：阿托伐他汀钙在 02 1 2 4 1mg L . 2~ .3 m的浓度范围内呈良好的线性关系(= .9 7 n= )回收率为 1 12 ( S r 0 99, 6, 0 .% R D=12 ) .%。结论：方法简便、本快速、准确、可靠。 关键词：阿托伐他汀钙胶囊； P C法； HL含

? 南方的冬季总是来的特别慢，突然杀到冷空气带来暴雨与寒潮，也令我想起了我们

的防冻液。相信大部分南方车主估计也和我一样，对于防冻液并不是太过在意，除了那次“百年一遇”的雪灾之外，很多时候貌似我们并不太需要防冻液。其实，这个观念是有点偏颇的。万一遇到冰冷天气你的爱车被冻住了，那时候你将束手无策。 一、无水防冻液对发动机更好

现在市面上的防冻液一般分为无机型防冻液与有机型防冻液。简单来说，无机型防冻液不可以兑水使用，而有机型防冻液则可以。两者之间，使用无水防冻液对发动机会更有利。 使用兑水的防冻液，当发动机温度在80℃以上的时候，钢壁就会产生水蒸气。而这些水蒸气的热传递性比较差，会慢慢在气缸的外围金属形成气泡层，使发动机里的热量无法及时传递出来，严重的时候可能会使发动机产生爆燃爆震的情况。同时，水份的产生必然会带来水垢，腐蚀缸体，一定程度上缩短爱车的寿命。虽然这种危害在短期内很难发现。 二、添加时使用同品牌的防冻液

不同生产厂商的防冻液不能混用，因为防冻液是一种含有特殊添加剂的冷却液。不同厂家之间的配方都会有一定的差异，混合使用难免会出现不某些化学反应，保护不成反成害。如果添加后还有剩余的防冻液，而你并不打算继续使用同一款的防冻液，小编劝你还是及

资源二室四平地区二类调查注意事项

1、外业前，各组组长负责检查各项资料及工作程序准备是否齐全。各单位要与

相临单位进行接图，防止外业出现错、漏。

2、应充分收集利用局方掌握的与本次调查相关的各种资料和信息，对调查单位的情况进行充分的了解，保证工作的顺利开展。

3、样地除落入大片耕地外，其它都应现地落实。改设样地的GPS坐标值一般应为“00”点。样地地类是按中心点小班地类确定，当样地落在小班边缘时要注意地类的确定。

4、样地应进行有林地成数计算，计算过程可记录在样地最后一页（即样地位置图的背面），精确到0.1。

5、当一个乡镇内含有多个国营林场时，要注意区分。

6、各级被调查单位驻址、非林地小班的四旁树、新修建的主要道路和水渠等，调查时不要漏。部分道路和渠在卫片上分辨不清的，要现地落实，并及时修改线图。

7、林带不要含跨公路、铁路、水渠等扣面积的非林地线性小班。

8、明确小班因子借用条件。林带小班借用因子后，林带宽度仍需实测。借用的小班号在备注栏注明。

9、做样圆时，严格用皮尺实测样木距离，禁止目测。

10、能使用PDA调绘的，要注意原始数据（包括小班、样圆、样带、角规、踩点

数据）的备份，注意严格按程序要求的步骤操作，避免因操作失误引起错误。

实验六高效液相色谱法分离和测定α-ＶE

一、实验目的

1. 了解高效液相色谱仪的基本结构，掌握液相色谱仪的基本操作方法。 2. 掌握液相色谱分析的定性及外标定量方法。

二、原理

1. 高效液相色谱的特点

高压泵输送流动相，梯度洗脱，可在柱后直接检测流出液成分，通过改变溶剂极性或强度进而改变色谱柱效能，分离选择性和组分的容量因子，实现改善色谱系统分离度的目的。

2. 高效液相色谱仪

(1) 高压输液系统，是提供足够恒定的高压，使流动相以稳定的流量快速渗透通过固定相。

(2) 进样系统，一般采用旋转式六通阀在高压下进样。 (3) 分离系统，在液相色谱柱中完成。

(4) 检测系统，液相色谱常见检测器有：紫外光度检测器，示差折光检测器、荧光检测器电化学检测器。

3. 高效液相色谱的类型

根据固定相和分离机理的不同，高效液相色谱如下几种类型

(1) 液—固吸附色谱：基于各组分在固体吸附剂表面上具有不同吸附能力而进行分离。 (2) 液—液分配色谱：组分在两相间经过反复多次分配各组分间产生差速迁移，从而实现分离。

(3) 化学键合相色谱：通过共价键将有机固定液结合到硅胶载体表面得到各种性能的固定相。

(4) 离子交换色谱：离子交换树脂上可电离的离子与流

资源二室四平地区二类调查注意事项

1、外业前，各组组长负责检查各项资料及工作程序准备是否齐全。各单位要与

相临单位进行接图，防止外业出现错、漏。

2、应充分收集利用局方掌握的与本次调查相关的各种资料和信息，对调查单位的情况进行充分的了解，保证工作的顺利开展。

3、样地除落入大片耕地外，其它都应现地落实。改设样地的GPS坐标值一般应为“00”点。样地地类是按中心点小班地类确定，当样地落在小班边缘时要注意地类的确定。

4、样地应进行有林地成数计算，计算过程可记录在样地最后一页（即样地位置图的背面），精确到0.1。

5、当一个乡镇内含有多个国营林场时，要注意区分。

6、各级被调查单位驻址、非林地小班的四旁树、新修建的主要道路和水渠等，调查时不要漏。部分道路和渠在卫片上分辨不清的，要现地落实，并及时修改线图。

7、林带不要含跨公路、铁路、水渠等扣面积的非林地线性小班。

8、明确小班因子借用条件。林带小班借用因子后，林带宽度仍需实测。借用的小班号在备注栏注明。

9、做样圆时，严格用皮尺实测样木距离，禁止目测。

10、能使用PDA调绘的，要注意原始数据（包括小班、样圆、样带、角规、踩点

数据）的备份，注意严格按程序要求的步骤操作，避免因操作失误引起错误。