设计营养缺陷型菌株的筛选与鉴定实验方案

实验二、芽孢杆菌氨基酸营养缺陷型菌株的筛选、检出与鉴定

一、实验目的

掌握各种培养基的配制方法；

理解选育营养缺陷突变株的选育原理；

掌握细菌氨基酸营养缺陷型的诱变、筛选与鉴定方法； 获得芽孢杆菌氨基酸营养缺陷型菌株并对其鉴定。 二、实验原理

营养缺陷型是指野生型菌株由于基因突变，致使细胞合成途径出现某些缺陷，丧失合成某些物质的能力，必须在基本培养基中外源补加该营养物质,才能正常生长的一类突变菌株。其本质是一种减低或消除末端产物浓度，以解除反馈控制的代谢调控中间产物或分支合成途径中末端产物得以积累。营养缺陷型菌株广泛应用于氨基酸、核苷酸、维生素的生产中。也广泛应用于基因定位、杂交及基因重组等研究中的遗传标记制作。

筛选营养缺陷型菌株一般具有四个环节：诱变处理、淘汰野生型、营养缺陷型的检出、

[1]

鉴定缺陷型。

1.诱变处理

基因突变可分为自发突变和诱发突变，许多物理、化学、生物因素对微生物都有诱变作用，这些能使突变率提高到自发突变水平以上的因素称为诱变剂，对于氨基酸营养缺陷型的诱变常选用亚硝基胍。

亚硝基胍(NTG，N-甲基-N-硝基-亚硝基胍)为诱变剂，在低致死率的情况下又很强的诱变作用，有超诱变剂之称。在碱性时NTG 能形成重氮甲烷(CH

实验六十 淀粉酶产生菌株的筛选

实验项目性质：设计性

所涉及的知识点：无菌技术、富集培养、纯种分离、淀粉酶性质、酶活测定 计划学时：8学时

一、实验目的

1．掌握从环境中采集样品并从中分离纯化某种微生物的完整操作步骤。 2．巩固以前所学的微生物学实验技术。 3．掌握产酶微生物筛选的方法。

二、实验原理

α-淀粉酶是一种液化型淀粉酶，它的产生菌芽孢杆菌，广泛分布于自然界，尤其是在含有淀粉类物质的土壤等样品中。从自然界筛选菌种的具体做法，大致可以分成以下四个步骤：采样、增殖培养、纯种分离和性能测定。

1、采样：即采集含菌的样品

采集含菌样品前应调查研究一下自己打算筛选的微生物在哪些地方分布最多，然后才可着手做各项具体工作。在土壤中几乎各种微生物都可以找到，因而土壤可说是微生物的大本营。在土壤中，数量最多的当推细菌，其次是放线菌，第三霉菌，酵母菌最少。除土壤以外，其他各类物体上都有相应的占优势生长的微生物。例如枯枝、烂叶、腐土和朽木中纤维素分解菌较多，厨房土壤、面粉加工厂和菜园土壤中淀粉的分解菌较多，果实、蜜饯表面酵母菌较多；蔬菜牛奶中乳酸菌较多，油田、炼油厂附近的土壤中石油分解菌较多等。

2、增殖培养（又称丰富培养）

增殖培养就是在所采集的土壤

陈桂庭 08333035

抗菌药物筛选的实验方法与技术

一、 实验原理

体外实验是筛选抗菌药物或测试新药抗菌性能的重要环节。药物对细菌代谢的影响、可以使细胞呼吸量减低，或酶系统受到抑制等，因而出现细菌不生长或部分抑制，可借以判断药物对细菌有无抗菌作用，或抗菌范围。

培养基是指利用人工方法将适合微生物生长繁殖成积累代谢产物的各种营养物质混合配制而成的营养基质。主要用于微生物的分离、培养、鉴定以及菌种保藏等方面。培养基一般应含有微生物生长繁殖所需要的碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子和水等营养成分。此外，为了满有微生物生长繁殖或积累代谢产物的要求，还必须控制培养基的pH。

按培养基的物理状态，可将培养基分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基。固体培养基是指在液体培养基中加入一定量的凝固剂(常加1.5%-2%的琼脂)经融化冷凝而成。半固体培养这是指在液体培养基中加入0.8％-1％左右的琼脂，经融化冷凝而成。液体培养基是指培养基中不加凝固剂琼脂，培养基呈液体状态。

正确掌握培养基的配制方法是从事微生物学实验工作的重要基础。由于微生物种类及代谢类型的多样性，因而用于培养微生物培养基的种类也很多，它们的配方及配制方法虽各有差异。但一般培养基的配制程序却

2011——2012学年商丘市一高第一学期高三化学第一轮复习 《第三节 制备实验方案的设计》 编制：耿玉琴 2011年7月27日 总第 43 期

高三化学

质量检测

【班级】__________

【姓名】__________

第三节 制备实验方案的设计

一、选择题

1．下列说法正确的是 A．仅用AgNO3溶液便可鉴别亚硝酸钠和食盐

B．重结晶时，溶液冷却速度越慢得到的晶体颗粒越大 C．乙酸与乙醇的混合溶液可用分液漏斗进行分离

D．用盐酸标准溶液滴定待测的氢氧化钠溶液时，水洗后的酸式滴定管未经标准润洗，则测定结果偏低

2．下列实验能达到实验目的且符合安全要求的是

3．下列实验方法合理的是 A.可用水鉴别己烷、四氯化碳、乙醇三种无色液体

B.油脂皂化后可用渗析的方法使高级脂肪酸钠和甘油充分分离 C.可用澄清石灰水鉴别Na2CO3溶液和NaHCO3溶液

D.为准确测定盐酸与NaOH溶液反应的中和热，所用酸和碱的物质的量应相等 4．下列除去杂质的方法正确的是

龙文教育教师1对1个性化教案

学生 姓名 张学宇 教师 授课 曾金平 姓名 日期 2013.4.21 授课 时段 8:00—10：00 课题 教学 目标 教 学 步 骤 及 教 学 内 容 化学实验方案的设计 1.理解化学实验方案设计时的内容﹑方法﹑要求。 2.学会设计化学实验方案及科学评价实验方案。 教学过程： 一、教学衔接（课前环节） 1、回收上次课的教案，了解家长的反馈意见； 2、检查学生的作业，及时指点 3、捕捉学生的思想动态和了解学生的本周学校的学习内容 二、教学内容 知识点1、化学实验方案设计时的内容﹑方法﹑要求 知识点2、设计化学实验方案及科学评价实验方案 三、教学辅助练习（或探究训练） 四、知识总结 1 方法：情境创设”、“引导式实验探究”、“对比分析”、“启发式 2、目标完成： 通过九个事例，掌握实验的基本步骤，提高科学探究能力； 五、知识的延伸和拓展 实验原理综合 六、布置作业 见后 8题 教导处签字：

日期： 年 月 日

教学过程中学生易错点归类 作业 布置 一、 学生对于本次课的评价 O 特别满意 O 满意 O

龙文教育教师1对1个性化教案

学生 姓名 张学宇 教师 授课 曾金平 姓名 日期 2013.4.21 授课 时段 8:00—10：00 课题 教学 目标 教 学 步 骤 及 教 学 内 容 化学实验方案的设计 1.理解化学实验方案设计时的内容﹑方法﹑要求。 2.学会设计化学实验方案及科学评价实验方案。 教学过程： 一、教学衔接（课前环节） 1、回收上次课的教案，了解家长的反馈意见； 2、检查学生的作业，及时指点 3、捕捉学生的思想动态和了解学生的本周学校的学习内容 二、教学内容 知识点1、化学实验方案设计时的内容﹑方法﹑要求 知识点2、设计化学实验方案及科学评价实验方案 三、教学辅助练习（或探究训练） 四、知识总结 1 方法：情境创设”、“引导式实验探究”、“对比分析”、“启发式 2、目标完成： 通过九个事例，掌握实验的基本步骤，提高科学探究能力； 五、知识的延伸和拓展 实验原理综合 六、布置作业 见后 8题 教导处签字：

日期： 年 月 日

教学过程中学生易错点归类 作业 布置 一、 学生对于本次课的评价 O 特别满意 O 满意 O

八种灵芝菌株的比较及筛选

摘 要：比较了8个灵芝菌株的菌丝生长速度、菌丝体生物量及多糖含量等指标。试验结果表明，在PDA培养基上，沂山灵芝菌株菌丝生长速度最快，为9.91 mm/d；经150 r/min、25 ℃液体摇床培养10 d后，安丘大灵芝菌株获得的菌丝体生物量最高，为1.22 g/100 mL；济宁圆芝菌丝体中的多糖含量最高，为117.59 μg/mg。经过综合分析比较，初步认为沂山灵芝为优势菌株。

关键词：灵芝；菌丝生长速度；菌丝体生物量；多糖含量；优势菌株

灵芝是灵芝属(Ganoderma) 内所有真菌的统称，是一种坚硬、多孢子和微带苦涩的菌类, 生长在腐树或是阔叶树木的根部［1］。世界上已知约有120种，分布广泛，在中国发现的灵芝亚科真菌就达98种［2］。它是我国传统中医药宝库中的珍品，素有“仙草”之称，长期以来一直被视为滋补强壮、扶正固本、延年益寿的珍贵中草药［3］，其中灵芝多糖是灵芝滋补强壮的主要成分，它具有抑制肿瘤、提高机体免疫力、消除体内自由基、抗辐射、降血脂等功效［4~6］。灵芝的药用价值、营养价值及其应用已为世界各国所重视，近年来，灵芝生产发展迅速，但目前栽培的灵芝品种多而复杂，长期以来一直缺乏对不同灵芝菌种

中考精英,化学,包头

中考精英,化学,包头

考点1:实验方案的设计 1.实验设计的基本要求 (1)科学性：实验原理、实验方法和操作过程必须 科学、严谨、合理。 (2)安全性：实验操作要尽量防止带有危险性的操 作 ， 尽量避免与有毒物质接触。若无法避免有毒 物质 ， 则应采取安全措施 ， 以防造成环境污染和 人身伤害。

中考精英,化学,包头

(3)可行性：设计的实验方案要切实可行，所选药品、仪器、装置要经济可靠。

(4)简约性：实验设计应简单易行。装置简单，实验操作简便，实验现象明显。

中考精英,化学,包头

2.解题思路和方法 (1)明确目的原理：明确实验的目的要求，弄清题目给的新 信息。 (2)选择仪器药品：选择合理的化学仪器和药品。 (3)设计装置步骤：设计出合理的实验装置和实验操作步骤。 (4)记录现象数据：全面而准确地记录实验过程中的现象和 数据。 (5)分析得出结论：根据实验观察的现象和记录的数据，通 过分析、计算、画图表、推理等处理，得出正确的结论。

中考精英,化学,包头

考点2:实验方案的评价 1.这类试题的出现，使化学实验命题思想得到更新和升 华。对实验方案的评价一般从以下角度进行： (1)可行性 ①实

微生物与转基因技术

摘 要 微生物目前已是生物技术领域主要的模式生物之一，微生物可以为转基因

技术提供工具酶、基因载体；微生物本身也常作为目的基因的受体细胞。通过转基因的方式，可以将人类所需要的基因转移到特定物种上，从而表达出人类想要的性状。本文综述了转基因微生物在食品、农业、医药以及环境保护、传统工业改造等领域研究与应用的国内外现状。在食品生产领域，转基目微生物主要用于食品用群制剂的生产，如凝乳酶．淀粉酶，蛋白酶等，转基因酵母也应用于啤酒的生产．在农业生产领域，转基因微生物主要用于微生物农药、微生物肥料和饲料酶制剂的生产．在医药生产领域，转基因微生物主要用于兽用和人用疫苗的生产，以及利用转基因镟生物生产某些药物。此外，转基因微生物在环境保护，传统工业的改造、印染业，以及新能薄开发等方面也有应用，本文也同样大致介绍了一些目前国内外关于微生物转基因方面的前沿研究。

关键词 微生物转基因，DNA重组技术，目的基因，基因载体

1 引 言

转基因技术的理论基础来源于进化论衍生来的分子生物学。基因片段[1]的来源可以是提取特定生物体基因组中所需要的目的基因，也可以是人工合成指定序列的基因片段。基因片段被转入特定生物中，与其本身的基因组进行重组，再

转载自别人的论文,希望对大家的学习作以借鉴

安徽农业科学,JournalofAnhuiAgri.Sci.2009,37(12):5362-5363,5371　　　　　　　　　　　　　　　责任编辑　张杨林　责任校对　

傅真治

高产淀粉酶芽孢杆菌菌株的筛选

唐丽江,王振华,王迪　(成都农业科技职业学院畜牧兽医分院,四川温江611130)

摘要　[目的]筛选高产淀粉酶的芽孢杆菌菌株。[方法]选用10株芽孢杆菌,采用染色法初选和3,5-二硝基水杨酸显色法复选对其产淀粉酶的能力进行测定,筛选高产淀粉酶的芽孢杆菌菌株。[结果]10株芽孢杆菌菌株中有9株具有产淀粉酶能力,其中编号为Pab03、Pab02的2株枯草芽孢杆菌产酶活性最高,染色圈直径/菌落直径分别为2.284、1.961;在未作发酵条件优化的前提下,其酶活力分别达到(31.331±(21.521±0.985)、1.390)U,在作为新型的消化酶饲料添加剂方面具有广阔的应用前景。而菌株凝结芽孢杆菌PSAF1和枯草芽

(0.704±孢杆菌PJK01所产淀粉酶活力最低,分别为(0.366±0.022)、0.089)U。[结论]成功筛选了2株高产淀粉酶的枯草芽孢杆菌菌株,

分别