巨噬细胞Cx3cr1表达
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CX3CR1缺失成体小鼠海马新生神经元树突复杂性降低及成熟延迟
SICENCE新闻发布 作者:肖峰 稿号:NRR_323_14
CX3CR1缺失成体小鼠海马新生神经元树突复杂性降低及成熟延迟
来自中国中南大学湘雅二医院肖锋博士所在团队一项有关CX3CR1缺失的转基因小鼠的研究中发现,CX3CR1缺失可导致海马新生神经元树突复杂性降低及新生神经元成熟延迟。
fractalkine/CX3CR1信号参与多种神经疾病中小胶质细胞的神经毒性,响应小胶质细胞,并可在炎症条件下抑制小胶质细胞活性。既往研究显示小胶质细胞通过fractalkine/CX3趋化因子受体1信号通路积极参与海马神经再生过程中的增殖和分化。但是小胶质细胞是否可以影响海马神经再生中新生神经元的成熟及树突生长目前还不清楚。
此次,肖锋等发现CX3CR1缺失(CX3CR1 GFP/GFP)转基因小鼠海马小胶质细胞中doublecortin阳性细胞数量减少,海马新生神经元树突的长度缩短,交叉点数量减少。CX3CR1 GFP/GFP小鼠在海人酸诱导的癫痫发作后其海马齿状回中c-fos表达较少。说明小胶质细胞中fractalkine/CX3趋化因子受体
巨噬细胞与动脉粥样硬化
研究动脉硬化了解细胞,实验前参考
维普资讯
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实验六、小鼠巨噬细胞吞噬的观察
实验四 小鼠巨噬细胞吞噬的观察 一、实验目的: 实验目的: 通过观察小鼠巨噬细胞吞噬红细胞的实验, 通过观察小鼠巨噬细胞吞噬红细胞的实验, 了解巨噬细胞对异物吞噬的原理和功能。 了解巨噬细胞对异物吞噬的原理和功能。 了解吞噬在机体非特异免疫中的重要作用。 了解吞噬在机体非特异免疫中的重要作用。
二、实验原理: 实验原理: 高等动物体内的巨噬细胞、单核细胞和嗜中性粒细胞,具有吞噬的功能。它们广泛分布在组织和血液中,在机体 的非特异免疫功能中起着重要的作用。当病原微生物或其 他异物侵入机体时,能招引巨噬细胞,而巨噬细胞又具有 趋化性,它通过产生活跃的变形运动,主动向病原体和异 物移行聚集,首先把异物吸附在细胞表面,随之,吸附区 域的细胞膜向内凹陷,伸出伪足包围异物,并吞入胞质, 形成吞噬泡,继而在细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡融合, 形成吞噬溶酶体,把病原体杀死,异物消化分解。
三、实验仪器、材料和试剂 实验仪器、 (1)仪器、用具:显微镜、、解剖盘、注 )仪器、用具:显微镜、、解剖盘、 、、解剖盘 射器、吸管、载玻片、盖玻片。 射器、吸管、载玻片、盖玻片。 (2)材料:小鼠(体重 左右),鸡血。 )材料:小鼠(体重20g左右),鸡
巨噬细胞与动脉粥样硬化
研究动脉硬化了解细胞,实验前参考
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巨噬细胞吞噬作用的观察
四川大学实验报告
题目:巨噬细胞吞噬作用的观察
实验目的
1. 通过小鼠腹腔巨噬细胞对异物吞噬作用的观察,了解巨噬细胞在非
特异性免疫中的功能。
2. 掌握小鼠等实验动物腹腔巨噬细胞采集和制片的方法。
3. 学习小鼠腹腔注射的操作方法和步骤。
实验原理
1. 向小鼠腹腔内注射无菌淀粉肉汤,排异反应使小鼠产生大量巨噬细
胞,且巨噬细胞吞噬淀粉肉汤后不会对细胞造成伤害,反而被“喂养” 。连续多天注射使小鼠腹腔内聚集大量巨噬细胞。
2. 台盼蓝是一种生物染料,专一染色死细胞。活细胞的细胞质膜对台
盼蓝有不透过性。巨噬细胞吞噬含有台盼蓝的淀粉肉汤后,可以消化其中的淀粉和蛋白质,但是不能消化其中的台盼蓝,因此台盼蓝会聚集在溶酶体中。是一种溶酶体染色的方法。
3. 当向小鼠腹腔中注射鸡红细胞时,鸡红细胞作为外源物质,会被小
鼠细胞识别并吞噬,在适当的的时机,我们就有可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程
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四川大学实验报告
.实验材料及设备
1. 实验材料:
a) 连续2~3 天向腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤的小鼠一只
b) 鸡红细胞悬液
c) 生理盐水
2. 实验设备:
a) 普通光学显微镜
b) 载玻片、盖玻片若干
c) 注射器
d) 染色皿若干、吸水纸、滴管、剪刀、白瓷板等
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IgA肾病尿巨噬细胞检测的临床意义
IgA肾病尿巨噬细胞检测的临床意义
朱国贞;王曙曼;李荣山;朱镭;齐悦;王利华;于为民;黄晓光;黄轶嵘
【摘要】目的:研究尿巨噬细胞含量与IgA肾病(IgAN)患者临床表现、肾脏病理损伤程度的关系.方法:用流式细胞仪(FCM)测定38例IgAN患者尿巨噬细胞含量,并与临床表现、肾活检Katafuchi积分进行对照.结果:38例IgAN患者尿巨噬细胞含量与蛋白尿程度及小管间质积分呈正相关,相关系数分别为0.45(P<0.05);0.52(P<0.05);而与血尿、肾小球积分、血管积分无明显相关性.结论:流式细胞仪检测尿巨噬细胞含量可间接反映IgAN肾小管间质病变程度,协助判断疾病的预后.
【期刊名称】《中国临床医学》
【年(卷),期】2007(014)004
【总页数】2页(P549-550)
【关键词】巨噬细胞;流式细胞仪;IgA肾病
【作者】朱国贞;王曙曼;李荣山;朱镭;齐悦;王利华;于为民;黄晓光;黄轶嵘
【作者单位】山西医科大学第二医院肾内科,山西太原,030001;山西医科大学第二医院肾内科,山西太原,030001;山西医科大学第二医院肾内科,山西太原,030001;山西医科大学第二医院血液科,山西太原,030001;山西医科大学第二医院肾内科,山西
昆虫细胞表达系统
昆虫细胞表达系统
昆虫细胞表达系统是四大表达系统(昆虫细胞、细菌、酵母、哺乳动物细胞表达系统)之一。昆虫细胞表达系统原理是通过转座作用将转移载体中的表达组件定点转座到能在大肠杆菌中增殖的杆状病毒穿梭载体(Bacmid)上,通过抗性和蓝白斑筛选到重组穿梭质粒,提取穿梭质粒DNA转染昆虫细胞后,得到的子代病毒即为重组病毒。将病毒上清浸染昆虫细胞,获得表达的重组蛋白。杆状病毒是一类闭合环状双链病毒,病毒粒子呈杆状,以昆虫为主要宿主。杆状病毒还是一种出芽型分泌性病毒粒子,在感染细胞后能迅速在培养细胞中水平传播而保持细胞在相当长的时间内不裂解,从而最大限度地保持了外源蛋白的稳定,昆虫细胞表达系统又被称为昆虫杆状病毒系统。昆虫细胞表达系统本身是一个蛋白裂解性系统,在杆状病毒感染昆虫细胞的过程中,杆状病毒可以编码一些蛋白酶如木瓜蛋白酶等导致蛋白的降解。因此,收集细胞后,在裂解细胞之前要加入蛋白酶抑制剂防止蛋白的降解。昆虫细胞表达系统属于真核细胞表达系统,但又不同于酵母及哺乳动物细胞表达系统,酵母表达的蛋白易纯化但也易降解,而哺乳动物细胞表达系统表达的蛋白具有生物活性但成本高。细菌表达系统属于原核表达系统,操作简单、周期短收益大、表达产物稳定,但是表达基因的相
外源基因在宿主细胞中的表达1
外源基因在宿主细胞中的高效表达- I
影响外源基因表达的因素
有效的转录起始
? 主要的限速步骤
? 选择强的可调控的启动子及相关的调控序列,是组建一个高效表达载体的首要问题
启动子:位于结构基因5’端上游区的DNA序列,活化RNA聚合酶 启动子的特征: 序列特异性、方向性、位置特性、种属特异性 举例说明原核生物的启动子和真核生物的启动子。
启动子根据作用方式及功能分类:
? 组成型启动子(constitutive promoter) :在个体的任何细胞中均有表达活性的启动子
? 诱导型启动子 ? 组织特异型启动子
最理想的强的可调控的启动子应该是:在发酵的早期阶段表达载体的启动子被紧紧地阻遏,这样可以避免出现表达载体不稳定,细胞生长缓慢或者由于产物表达而引起细胞死亡等问题。当细胞达到一定的密度,通过多种诱导使阻遏物失活,RNA聚合酶快速启动转录。
原核细胞的启动子:lac, trp, tac, phoA, ?PL , ?PR都是这一类启动子(诱导型启动子,inducible promoters))。
T7噬菌体启动子则是另一种类型的启动子,即组成型启动子(constitutive promoters)
"小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验"方法的改进与研究
安徽农学通报, An h u i A . S c i . B u l 1 . 2 0 1 3, 1 9 ( 2 3 )
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“小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验"方法的改进与研究顾曙余梁鲁晓雪 李莲张雪茜李静曹祥荣(南京师范大学生命科学学院,江苏南京 2 1 0 0 2 3 )
摘
要:连续3 d给小鼠腹腔注射淀粉液,诱导并激活巨噬细胞,使用鱼红细胞为吞噬物,替代细胞实验教材所用的
鸡红细胞、羊红细胞,探索和改进实验方法,以便更清晰、有效地观察, J、鼠腹腔巨噬细胞对外来异物的吞噬作用。取鼠腹腔液制备涂片并固定,用G i e ms a染色法进行染色,显微观察巨噬细胞对鱼红细胞的吞噬作用。结果显示,采
用鱼红细胞作为吞噬物,细胞染色清晰,吞噬结果明显,可清晰显示大量吞噬鱼红细胞的巨噬细胞,吞噬百分率高, 便于实验观察和计数,有助于学生对巨噬细胞吞噬作用的理解和掌握。关键词:巨噬细胞;鱼红细胞;实验方法;吞噬
中图分类号
G 6 4 2 . 0
文献标识码
A
文章编号
1 0 0 7— 7 7 3 1 ( 2 0 1 3 ) 2 3 - 1 7 - 0 2
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