hplc原理和操作详解

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HPLC原理

标签:文库时间:2025-02-18
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1906年俄国植物化学家茨维特(Tswett)首次提出“色谱法(”Chromotography)和“实验室最常用的P230高效液相色谱仪色谱图”(Chromatogram)的概念。他在论文中写到: “(原文)一植物色素的石油醚溶液从一根主要装有碳酸钙吸附剂的玻璃管上端加入,沿管滤下,后用纯石油醚淋洗,结果按照不同色素的吸附顺序在管内观察到它们相应的色带,就象光谱一样,称之为色谱图。”

1930年以后,相继出现了纸色谱、离子交换色谱和薄层色谱等液相色谱技术。

1952年,英国学者Martin和Synge 基于他们在分配色谱方面的研究工作,提出了关于气-液分配色谱的比较完整的理论和方法,把色谱技术向前推进了一大步,这是气相色谱在此后的十多年间发展十分迅速的原因。

1958年,基于Moore和Stein的工作,离子交换色谱的仪器化导致了氨基酸分析仪的出现,这是近代液相色谱的一个重要尝试,但分离效率尚不理想。 1960年中后期,气相色谱理论和实践的发展,以及机械、光学、电子等技术上的进步,液相色谱又开始活跃。到60年代末期把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱就出现了HPLC。

1970年中期以后,微处理机技术用于液相色谱

HPLC操作规程和注意事项

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HPLC操作规程

1.所需的流动相,应该用合适的0.45μm滤膜过滤。

2.样品溶液和标准溶液 ,也应该用合适的0.45μm滤膜过滤,滤膜也分为水相和有机相。

3.开机顺序:开泵,开检测器,进入色谱工作站。

4.泵的启动:用流动相冲洗滤器,再把滤器浸入流动相中,启动泵。打开泵的排放阀,用专用注射器从阀口抽出流动相约20ml,设置高流速(9ml/min)或用冲洗键 PURGE 进行排气,观查出口处流动相呈连续液流后,将流速逐步回零或停止(STOP)冲洗,关闭排放阀。

5 .将流速调节至分析用流速,对色谱柱进行平衡,同时观察压力指示应稳定,用干燥滤纸片的边缘检查柱管各连接处应无渗漏,初始平衡时间,一般约需30分钟。平衡的标志是泵压不波动和基线平直,说明已经平稳。

6. 检测器的开启:开启电源,选择光源(氘或钨)灯,选定检测波长,待预热15分钟方可用于分析测试。

7.压力表无压力显示或压力波动时不能进行分析,应检查泵中气泡是否已排除,各连结处有无漏液,排除故障后方能进行操作。如压力升高,甚至自动停泵,应检查柱端有无污染堵塞,如有堵塞,应该用相应的溶剂清洗。如果清洗不了,可小心卸下开柱的进口螺帽,挖出被污染填冲剂后,补入同类填充剂,仔细安装好,再进行

Agilent Technologies HPLC 日常维护和故障诊断

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Agilent Technologies HPLC 日常维护 & 故障诊断

安捷伦科技有限公司 生命科学与化学分析仪器部

1100/1200 HPLC 日常维护 & 故障诊断

Agilent 1100/1200系列 HPLC 工作原理 日常维护 故障诊断 技术支持&服务流程安捷伦科技有限公司 生命科学与化学分析仪器部

1100/1200 HPLC 日常维护 & 故障诊断1.在线脱气机 (G1322A/G1379A)2.四元/二元/单元泵 (G1311A/G1312A/G1310A)

3.手动/自动进样器 (G1313A)4.二极管阵列检测器 (G1315B) 5.可变波长紫外检测(G1314A)

1100/1200 HPLC 日常维护 & 故障诊断

Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊断

Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊断工作原理

Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊 断 何时需要使用Agilent 1100/1200在线脱气机

Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊 断

标准脱气机(G1322A).标准脱气机每个通道体

zemax操作详解

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ZEMAX光学设计软件操作说明详解

找到一些资料 希望对大家有用!

【ZEMAX光学设计软件操作说明详解】 介绍

这一章对本手册的习惯用法和术语进行说明。ZEMAX使用的大部分习惯用法和术语与光学行业都是一致的,但是还是有一些重要的不同点。 活动结构

活动结构是指当前在镜头数据编辑器中显示的结构。详见“多重结构”这一章。 角放大率

像空间近轴主光线与物空间近轴主光线角度之比,角度的测量是以近轴入瞳和出瞳的位置为基准。 切迹

切迹指系统入瞳处照明的均匀性。默认情况下,入瞳处是照明均匀的。然而,有时入瞳需要不均匀的照明。为此,ZEMAX支持入瞳切迹,也就是入瞳振幅的变化。

有三种类型的切迹:均匀分布,高斯型分布和切线分布。对每一种分布(均匀分布除外),切迹因素取决于入瞳处的振幅变化率。在“系统菜单”这一章中有关于切迹类型和因子的讨论。

ZEMAX也支持用户定义切迹类型。这可以用于任意表面。表面的切迹不同于入瞳切迹,因为表面不需要放置在入瞳处。对于表面切迹的更多信息,请参看“表

面类型”这一章的“用户定义表面”这节。 后焦距

ZEMAX对后焦距的定义是沿着Z轴的方向从最后一个玻璃面计算到与无限远物体共轭的近轴像面的距

zemax操作详解

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ZEMAX光学设计软件操作说明详解

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【ZEMAX光学设计软件操作说明详解】 介绍

这一章对本手册的习惯用法和术语进行说明。ZEMAX使用的大部分习惯用法和术语与光学行业都是一致的,但是还是有一些重要的不同点。 活动结构

活动结构是指当前在镜头数据编辑器中显示的结构。详见“多重结构”这一章。 角放大率

像空间近轴主光线与物空间近轴主光线角度之比,角度的测量是以近轴入瞳和出瞳的位置为基准。 切迹

切迹指系统入瞳处照明的均匀性。默认情况下,入瞳处是照明均匀的。然而,有时入瞳需要不均匀的照明。为此,ZEMAX支持入瞳切迹,也就是入瞳振幅的变化。

有三种类型的切迹:均匀分布,高斯型分布和切线分布。对每一种分布(均匀分布除外),切迹因素取决于入瞳处的振幅变化率。在“系统菜单”这一章中有关于切迹类型和因子的讨论。

ZEMAX也支持用户定义切迹类型。这可以用于任意表面。表面的切迹不同于入瞳切迹,因为表面不需要放置在入瞳处。对于表面切迹的更多信息,请参看“表

面类型”这一章的“用户定义表面”这节。 后焦距

ZEMAX对后焦距的定义是沿着Z轴的方向从最后一个玻璃面计算到与无限远物体共轭的近轴像面的距

详解透视原理

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一、透视图 物体上各点与视点相连,形成的各个直线与画面的交点,为物体在画面上的透视点,将这些透视点连接,便形成透视图。

二、透视术语 ? ? ? ? ? ? ? ?

基面/地面(G.P)— 放置物体的水平面,通常是指地面。如下图1

画面(P.P)— 画者于被画物体之间置一假想透明平面,物体上各关键点 聚向 视点的视线被该平面截取(即与该平面相交),并映现出二维的物体透视图。这一透明平面被称为画面。如下图2

视平面(H.P)— 视点、视线和视中线所在的平面为视平面;视平面始终垂直于画面;平视的视平面平行于基面;俯视、仰视的视平面倾斜或垂直于基面。如下图3:

线

视平线(H.L)— 视平面与画面的交线。如图4:

地平线/基线(G.L)— 画面于基面/地面的交线。如图5:

视中线 — 视点引向正前方的视线为视中线(即从视点做画面的垂线)(视点引向物体任何一点的直线为视线,)。

平视的视中线平行于基面;俯、仰视的视中线倾斜或垂直于基面。如图5:

? ? ? ?

真高线 — 在透视图中能反映物体空间真实高度的尺寸线。

变线 — 凡是与画面不平行(包括与画面垂直的线段)的直线均为变线,此类线段在视圈内有时会消失。 原线 — 凡是与画面平行

详解透视原理

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一、透视图 物体上各点与视点相连,形成的各个直线与画面的交点,为物体在画面上的透视点,将这些透视点连接,便形成透视图。

二、透视术语 ? ? ? ? ? ? ? ?

基面/地面(G.P)— 放置物体的水平面,通常是指地面。如下图1

画面(P.P)— 画者于被画物体之间置一假想透明平面,物体上各关键点 聚向 视点的视线被该平面截取(即与该平面相交),并映现出二维的物体透视图。这一透明平面被称为画面。如下图2

视平面(H.P)— 视点、视线和视中线所在的平面为视平面;视平面始终垂直于画面;平视的视平面平行于基面;俯视、仰视的视平面倾斜或垂直于基面。如下图3:

线

视平线(H.L)— 视平面与画面的交线。如图4:

地平线/基线(G.L)— 画面于基面/地面的交线。如图5:

视中线 — 视点引向正前方的视线为视中线(即从视点做画面的垂线)(视点引向物体任何一点的直线为视线,)。

平视的视中线平行于基面;俯、仰视的视中线倾斜或垂直于基面。如图5:

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真高线 — 在透视图中能反映物体空间真实高度的尺寸线。

变线 — 凡是与画面不平行(包括与画面垂直的线段)的直线均为变线,此类线段在视圈内有时会消失。 原线 — 凡是与画面平行

Agilent Technologies HPLC 日常维护和故障诊断

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Agilent Technologies HPLC 日常维护 & 故障诊断

安捷伦科技有限公司 生命科学与化学分析仪器部

1100/1200 HPLC 日常维护 & 故障诊断

Agilent 1100/1200系列 HPLC 工作原理 日常维护 故障诊断 技术支持&服务流程安捷伦科技有限公司 生命科学与化学分析仪器部

1100/1200 HPLC 日常维护 & 故障诊断1.在线脱气机 (G1322A/G1379A)2.四元/二元/单元泵 (G1311A/G1312A/G1310A)

3.手动/自动进样器 (G1313A)4.二极管阵列检测器 (G1315B) 5.可变波长紫外检测(G1314A)

1100/1200 HPLC 日常维护 & 故障诊断

Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊断

Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊断工作原理

Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊 断 何时需要使用Agilent 1100/1200在线脱气机

Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊 断

标准脱气机(G1322A).标准脱气机每个通道体

HPLC Method development

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液相色谱方法的建立

高丽萍 June 4,20111

目 录1.HPLC方法建立过程中的常见问题 方法建立过程中的常见问题 1. 2.HPLC建立的一般程序 建立的一般程序 2. 3.色谱条件的建立 3.色谱条件的建立3.1 色谱柱的选择 A.色谱柱的归类 A.色谱柱的归类 B.C18色谱柱的性能影响因素 B.C18色谱柱的性能影响因素 C.固定相种类的选择 C.固定相种类的选择 3.2 流动相的选择 A.流动相中的酸 A.流动相中的酸 B.流动相PH值与样品保留时间的关系 流动相PH B.流动相PH值与样品保留时间的关系 C.流动相中的缓冲盐 C.流动相中的缓冲盐 D.流动相中的离子对试剂 D.流动相中的离子对试剂 E.流动相中的其他组分 E.流动相中的其他组分

一、HPLC方法建立过程中的常见问题 HPLC方法建立过程中的常见问题对HPLC方法的所要达到的目标不明确 (如可能检测到多少个杂质,检测到什么水平) 对杂质的相关工作太粗 (杂质的ID,响应因子,杂质是否会在体系中进一步降解等) 方法建立时选择的样品不合适 (如选择了精制后的样品) 没有注意样品的处理方法 (如超声/在溶剂中的降解过程/进入色谱柱后发生水解等) 没有考虑色谱柱能否长期满

Agilent Technologies HPLC 日常维护和故障诊断

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Agilent Technologies HPLC 日常维护 & 故障诊断

安捷伦科技有限公司 生命科学与化学分析仪器部

1100/1200 HPLC 日常维护 & 故障诊断

Agilent 1100/1200系列 HPLC 工作原理 日常维护 故障诊断 技术支持&服务流程安捷伦科技有限公司 生命科学与化学分析仪器部

1100/1200 HPLC 日常维护 & 故障诊断1.在线脱气机 (G1322A/G1379A)2.四元/二元/单元泵 (G1311A/G1312A/G1310A)

3.手动/自动进样器 (G1313A)4.二极管阵列检测器 (G1315B) 5.可变波长紫外检测(G1314A)

1100/1200 HPLC 日常维护 & 故障诊断

Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊断

Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊断工作原理

Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊 断 何时需要使用Agilent 1100/1200在线脱气机

Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊 断

标准脱气机(G1322A).标准脱气机每个通道体