微生物基本操作技术
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微生物基本操作规范
培养基的制备
培养基概念：
是指以液体、半固体或固体形式，包含天然或合成成分，用于促进微生物的繁殖或保持其活力的物质组成。由于各类微生物对营养的要求不同，培养目的和检测需要不同，因而培养基的种类很多。我们可根据某种标准，将种类繁多的培养基划分为若干类型。 培养基的分类：
按功能分类：基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基、特殊培养基。
按物理性状分类：液体培养基、固体培养基、半固体培养基。 液体培养基：所配制的培养基是液态的，这种培养基被用来微生物的增菌和生长状态观察。
固体培养基和半固体培养基：在液体培养基中加入适量的凝固剂制成成固体培养基和半固体培养基。常用作凝固剂的物质有琼脂。固体培养基琼脂用量1.5-2%，半固体培养基琼脂用量在0.5～1%之间。固体培养基用作微生物的分离、鉴定、计数、保藏等。半固体培养基被用来观察微生物的动力和保藏菌种。 今天给大家展示一下各种培养基的制备。 培养基制备的基本过程：
调配成分、溶解、校正pH、分装、灭菌、质量检查和保存 所需物品：试剂、锥形瓶、天平、量筒、微波炉、高压蒸汽灭菌器、
玻璃试管、玻璃平板、接种工具。 （1） 调配成分：
在锥形瓶或大容量烧瓶中依次加入蒸馏水200ml， 1％蛋白
微生物学检验基本技术！！ - 图文
1．葡萄糖代谢类型鉴别试验（O/F或Hugh－Leifson，HL）
下层：蛋白胨 1克 氯化钠 0．5克
葡萄糖 0.2克 水 100毫升 1.6%溴甲酚紫(Bromo cresol purple)乙醇溶液0.1-0.2mL
PH=7.6 注意: 调完pH值后再加葡萄糖.
(1)原理：细菌在分解葡萄糖的过程中，必须有分子氧参加，称为氧化型；能进行无氧降解的为发酵型；不分解葡萄糖的细菌为产碱型。发酵型细菌无论在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖，而氧化型细菌在无氧环境中则不能分解葡萄糖。本试验又称氧化发酵（O/F或Hugh－Leifson，HL）试验，可用于区别细菌的代谢类型。
(2)方法：挑取少许纯培养物（不要从选择性平板中挑取）接种2支HL培养管中，在其中一管加入高度至少为0.5cm的无菌液体石蜡以隔绝空气（作为密封管），另一管不加（作为开放管）。置30℃孵箱孵育48h以上。
(3)结果：两管培养基均不产酸（颜色不变）为产碱型；两管都产酸（变黄）为发酵型；加液体石蜡管不产酸，不加液体石蜡管产酸为氧化型。
(4)应用：主要用于肠杆菌科
微生物检验操作规程
微生物检验操作规程
1. 目的
建立微生物检验标准操作规程，保证检验操作规范化。 2. 范围
适用于本公司相关的微生物检验活动的全过程。 3. 职责
3.1 微生物检验员负责微生物检验的全过程； 3.2 QC主管负责监督检查本规程的有效实施。 4. 操作规程
4.1 微生物检验玻璃器皿吸管的洗涤
4.1.1 一般的玻璃器皿（例如培养皿、试管、三角瓶等），可用毛刷及洗涤剂洗去灰尘、油垢，然后用自来水、蒸馏水充分冲洗，直至玻璃器皿内壁均匀分布一层薄的水膜，即器壁既不挂水珠也无条纹，即洗涤达到标准。
4.1.2 玻璃器皿内有污迹不能洗净时，可浸泡于洗液中，待器皿中有机物氧化分解后，取出用自来水、蒸馏水冲洗干净，备用。
4.1.3 新购的玻璃器皿先用2％盐酸浸泡，再用用自来水、蒸馏水充分冲洗。 4.2 器皿的包扎
4.2.1 试管：塞上胶塞，然后用牛皮纸或报纸把试管头包扎起来。做发酵试验时，将试管头塞上专用的耐高温PVC试管帽。
4.2.2 三角瓶、抽滤瓶：将三角瓶（抽滤瓶）口塞上胶塞，然后用牛皮纸把塞头部包起来。 4.2.3 吸管：将耐高温的移液枪头装盒，用用牛皮纸或报纸包裹。 4.2.4 平皿：10个为一组，用牛皮纸包裹。 4.3消毒和灭菌：
微生物检验操作规程
微生物检验操作规程
1. 目的
建立微生物检验标准操作规程，保证检验操作规范化。 2. 范围
适用于本公司相关的微生物检验活动的全过程。 3. 职责
3.1 微生物检验员负责微生物检验的全过程； 3.2 QC主管负责监督检查本规程的有效实施。 4. 操作规程
4.1 微生物检验玻璃器皿吸管的洗涤
4.1.1 一般的玻璃器皿（例如培养皿、试管、三角瓶等），可用毛刷及洗涤剂洗去灰尘、油垢，然后用自来水、蒸馏水充分冲洗，直至玻璃器皿内壁均匀分布一层薄的水膜，即器壁既不挂水珠也无条纹，即洗涤达到标准。
4.1.2 玻璃器皿内有污迹不能洗净时，可浸泡于洗液中，待器皿中有机物氧化分解后，取出用自来水、蒸馏水冲洗干净，备用。
4.1.3 新购的玻璃器皿先用2％盐酸浸泡，再用用自来水、蒸馏水充分冲洗。 4.2 器皿的包扎
4.2.1 试管：塞上胶塞，然后用牛皮纸或报纸把试管头包扎起来。做发酵试验时，将试管头塞上专用的耐高温PVC试管帽。
4.2.2 三角瓶、抽滤瓶：将三角瓶（抽滤瓶）口塞上胶塞，然后用牛皮纸把塞头部包起来。 4.2.3 吸管：将耐高温的移液枪头装盒，用用牛皮纸或报纸包裹。 4.2.4 平皿：10个为一组，用牛皮纸包裹。 4.3消毒和灭菌：
微生物检验操作规程
微生物检验操作规程
1. 目的
建立微生物检验标准操作规程，保证检验操作规范化。 2. 范围
适用于本公司相关的微生物检验活动的全过程。 3. 职责
3.1 微生物检验员负责微生物检验的全过程； 3.2 QC主管负责监督检查本规程的有效实施。 4. 操作规程
4.1 微生物检验玻璃器皿吸管的洗涤
4.1.1 一般的玻璃器皿（例如培养皿、试管、三角瓶等），可用毛刷及洗涤剂洗去灰尘、油垢，然后用自来水、蒸馏水充分冲洗，直至玻璃器皿内壁均匀分布一层薄的水膜，即器壁既不挂水珠也无条纹，即洗涤达到标准。
4.1.2 玻璃器皿内有污迹不能洗净时，可浸泡于洗液中，待器皿中有机物氧化分解后，取出用自来水、蒸馏水冲洗干净，备用。
4.1.3 新购的玻璃器皿先用2％盐酸浸泡，再用用自来水、蒸馏水充分冲洗。 4.2 器皿的包扎
4.2.1 试管：塞上胶塞，然后用牛皮纸或报纸把试管头包扎起来。做发酵试验时，将试管头塞上专用的耐高温PVC试管帽。
4.2.2 三角瓶、抽滤瓶：将三角瓶（抽滤瓶）口塞上胶塞，然后用牛皮纸把塞头部包起来。 4.2.3 吸管：将耐高温的移液枪头装盒，用用牛皮纸或报纸包裹。 4.2.4 平皿：10个为一组，用牛皮纸包裹。 4.3消毒和灭菌：
微生物采油技术
微生物采油技术
一．概述
稠油微生物多轮次吞吐技术主要是针对目前稠油高轮次吞吐后期、特别是不适宜蒸汽驱的区块和油井以及高轮次吞吐、注汽效果差、高含水、低产能的油井，研究利用微生物采油技术，为稠油开采寻找一种降低开采成本、提高油井产量、提高生产率的采油工艺方法。
二．原理
微生物采油是通过引入或刺激在油藏中能够存活的微生物来提高原油采收率的技术。它是依赖包括微生物生长、运移、新陈代谢等复杂过程在内的一个生物学和物理化学的综合作用，是靠多种的机理将原油采出的，因此它具有一个多重的作用效果，其采油原理已经在采油过程中得到证实。但同时，它又具有较强的选择性和针对性，要解决不同区块原油的开采问题，就要针对不同的区块的地质特性、油品特性，有针对性地选择菌种，并进行包括菌种的油藏生态特性在内的生物学评价。该工艺以其费用低、工序简单、操作方便而成为一种新的提高采收率的方法。
通过菌种的筛选，筛选出了三株菌种。在此基础上对此进行反反复复的驯化、富集、复壮，使其达到生长、代谢稳定、活性高在一定程度上解决了以往菌种不稳定的弱点，在稠油微生物菌种的筛选和研究方面取得了突破，并非常适合在所选油藏条件下生存。
同时，通过室内对菌种特性的研究，
微生物检验操作规程
微生物检验操作规程
1. 目的
建立微生物检验标准操作规程，保证检验操作规范化。 2. 范围
适用于本公司相关的微生物检验活动的全过程。 3. 职责
3.1 微生物检验员负责微生物检验的全过程； 3.2 QC主管负责监督检查本规程的有效实施。 4. 操作规程
4.1 微生物检验玻璃器皿吸管的洗涤
4.1.1 一般的玻璃器皿（例如培养皿、试管、三角瓶等），可用毛刷及洗涤剂洗去灰尘、油垢，然后用自来水、蒸馏水充分冲洗，直至玻璃器皿内壁均匀分布一层薄的水膜，即器壁既不挂水珠也无条纹，即洗涤达到标准。
4.1.2 玻璃器皿内有污迹不能洗净时，可浸泡于洗液中，待器皿中有机物氧化分解后，取出用自来水、蒸馏水冲洗干净，备用。
4.1.3 新购的玻璃器皿先用2％盐酸浸泡，再用用自来水、蒸馏水充分冲洗。 4.2 器皿的包扎
4.2.1 试管：塞上胶塞，然后用牛皮纸或报纸把试管头包扎起来。做发酵试验时，将试管头塞上专用的耐高温PVC试管帽。
4.2.2 三角瓶、抽滤瓶：将三角瓶（抽滤瓶）口塞上胶塞，然后用牛皮纸把塞头部包起来。 4.2.3 吸管：将耐高温的移液枪头装盒，用用牛皮纸或报纸包裹。 4.2.4 平皿：10个为一组，用牛皮纸包裹。 4.3消毒和灭菌：
微生物
微生物学假期综合教学实习
实习时间： 2013年 6 月 25 日 开始
实习班级： 应技1101-1102 人
生命科学技术学院微生物教研室
微生物教学实习基本实验流程
第 配制牛肉膏固体培养基、3倍和单倍乳糖发酵液， 一准备无菌水及各种器皿、器材 天
）
灭菌
采集样品
（
第按要求做10倍梯度稀释
二
天
）配制伊红美测样品的细菌总数： 乳糖培养基初发酵试验：
样品的稀释液涂布按实验要求将稀释液接入兰固体和E.C液 牛肉膏平板 3倍、单倍乳糖发酵培养液 体培养基
37OC培养 37OC培养 灭菌
数平板上菌落看乳酸发酵 倒伊红美兰平板 （数，计算样品的细结果，查MPN表 第菌总数 三 检验乳酸发酵管中产酸产气的样品天 ）
伊红美兰平板划线 接E.C管
37OC培养 44.5OC培养
（挑有金属光泽、看结果，鉴定是 第
无光泽的菌落 否有粪大肠杆菌 四
天接单倍乳糖发酵管 革兰氏染色 ）
37OC培养
看复发酵结果 （ 第 综合本实验的六项结果（细菌总数、乳糖管初发酵（MPN）、伊红美兰平板鉴定、 五E.C平板鉴定、革兰氏染色、乳糖复发酵），写出实验报告 天清洗器材，并做好室内清洁。 ） （
微生物学综合教学实习
学习目
微生物
第四章 病毒
1 病毒具有哪些特点？病毒壳体有哪几种对称类型？
答：①体积微小 ②无完整的细胞结构，主要成分是核酸跟蛋白质 ③严格活细胞内寄生 ④对干扰素敏感，对抗生素不敏感 ⑤繁殖方式是复制，且具有感染性；有螺旋对称型、二十面体对称型、复合对称型。
2 什么是病毒的一步生长曲线？包括几个期？各有何特点？
答：主要以烈性噬菌体为例，一步生长曲线是定量描述烈性噬菌体生长规律的曲线，反映了每种噬菌体的三个重要的特征参数：潜伏期、裂解期的长短及裂解量。包括潜伏期、裂解期和平稳期，潜伏期细胞正处于复制噬菌体核酸和合成蛋白质衣壳的阶段，裂解期宿主菌迅速裂解、溶液中噬菌体颗粒急速增加的阶段，平稳期宿主细胞已经全部裂解，溶液中噬菌体效价达到最高峰的时期。
3 以噬菌体为例，说明病毒的增殖过程。
答：①吸附和侵入：噬菌体感染细菌时，其尾部为吸附器官，能识别宿主菌表面的特殊受体，然后分泌酶类溶解细胞壁，使细胞壁出现小孔，讲头部的核酸注入宿主菌内，蛋白质外壳留在宿主菌细胞外；②生物合成：进入宿主菌内的噬菌体核酸，首先转录翻译产生早期蛋白，进行晚期转录并复制子代核酸，再转录产生噬菌体的结构蛋白，子代核酸和蛋白质按一定程序装配成完整的子代噬菌体颗粒；③当宿主菌细胞
微生物
第四章 病毒
1 病毒具有哪些特点？病毒壳体有哪几种对称类型？
答：①体积微小 ②无完整的细胞结构，主要成分是核酸跟蛋白质 ③严格活细胞内寄生 ④对干扰素敏感，对抗生素不敏感 ⑤繁殖方式是复制，且具有感染性；有螺旋对称型、二十面体对称型、复合对称型。
2 什么是病毒的一步生长曲线？包括几个期？各有何特点？
答：主要以烈性噬菌体为例，一步生长曲线是定量描述烈性噬菌体生长规律的曲线，反映了每种噬菌体的三个重要的特征参数：潜伏期、裂解期的长短及裂解量。包括潜伏期、裂解期和平稳期，潜伏期细胞正处于复制噬菌体核酸和合成蛋白质衣壳的阶段，裂解期宿主菌迅速裂解、溶液中噬菌体颗粒急速增加的阶段，平稳期宿主细胞已经全部裂解，溶液中噬菌体效价达到最高峰的时期。
3 以噬菌体为例，说明病毒的增殖过程。
答：①吸附和侵入：噬菌体感染细菌时，其尾部为吸附器官，能识别宿主菌表面的特殊受体，然后分泌酶类溶解细胞壁，使细胞壁出现小孔，讲头部的核酸注入宿主菌内，蛋白质外壳留在宿主菌细胞外；②生物合成：进入宿主菌内的噬菌体核酸，首先转录翻译产生早期蛋白，进行晚期转录并复制子代核酸，再转录产生噬菌体的结构蛋白，子代核酸和蛋白质按一定程序装配成完整的子代噬菌体颗粒；③当宿主菌细胞