酶联免疫斑点试验和斑点酶免疫吸附试验

目的比较不同MTB抗原的酶联免疫斑点检测技术(ELISPOT),探索其对活动性结核病的辅助诊断价值。方法对结核组132例和对照组90例观察对象应用PPD、克隆表达的早期分泌抗原靶6000(ESAT-6)和ESAT-6／培养滤液蛋白10000(CFP-10)融合蛋白(简称E／C)进行酶联免疫斑点检测(ELISPOT),检测外周血单个核细胞(PBMC)中经3种抗原刺激后斑点形成细胞(SFC)的数量;对照组同时进行P

结核病与胸部肿瘤 2 1 00参考文献1 H o d n s R . Cln c l h r a o i ei so l f z m i e A . liesM i ia a m c k n t f co a i n . p c rv e . ClnP a m a o i e, 1 8 e iw i h r c k n t 9 9, 1 6: 7 4~ 8 5. 2 V e k t s n K . Cln c l h r a o i ei o sd r to n t e n ae a i ia a m c k n tc c n i e ai n i h p te t e t o a in s w i e r s r a

全自动酶联免疫分析仪与手工酶联免疫法的检测结果比较

王胜虎1） 陈琪 1） 李媛 2）

1）昆明医科大学附属延安医院检验科，云南昆明 650051； 2）昆明医科大学海源学院基础部，云南昆明

650500

[摘要] 目的 通过比对全自动酶联免疫分析仪与手工酶联免疫法检测临床标本结果的相关性及符合率，探讨更科学可靠的检验方法。 方法 随机抽取90份临床与体检标本，经Tecan Freedom Evolyzer-2200全自动酶联免疫分析仪和手工加样操作的IMARK2酶标仪测定甲肝、乙肝5项、丙肝、戊肝2项、TP及HIV的结果，并对结果进行相关性及合率的分析 。结果 对所检测项目中的HBsAg、HBsAb、HBeAg、TP、HIV的相关性系数r>0.9 ，其数据显示相关性较好；而HAV-IgM、HBeAb、HBcAb、HCV、HEV-IgM、HEV-IgG、的相关性系数为 0.9>r >0.6 ；Tecan Freedom Evolyzer-2200全自动酶联免疫分析仪与手工酶联免疫法操作比对90个样本的11项检测结果总符合率达96.9％。 结论 全自动酶联免疫分析仪与手工酶联免疫法有较好的相关性。全自动酶联免疫分析仪的使用还大大的

非标记抗体酶法

由于酶标抗体存在一些缺点，例如①酶与抗体间的共价连结可损害部分抗体和酶的活性；②抗血清中的非特异性抗体被酶标记后，与组织成分结合，可致背景染色等。为此Sternberger等在酶标法的基础上，发展了非标记抗体酶法。包括酶桥法（Enzyme Bridge Method）和过氧化物酶抗过氧化物酶法（Peroxidase Antiperoxidase Method, PAP法）。现分述如下。 （一）酶桥法

1．基本原理 首先用酶免疫动物，制备效价高、特异性强的抗酶抗体，然后使用第二抗体作桥，将抗酶抗体连结在与组织抗原结合的第一抗体上，再将酶结合在抗酶抗体，经呈色显示抗原的分布。在此过程中，任何抗体均未被酶标记，酶是通过免疫学原理与抗酶抗体结合，避免了共价连结对抗体和酶活性的损害，提高方法的敏感性，且能节 省第一抗体的用量。

2．染色步骤 主要程序如图4-4

图4-4 酶桥法主要染色步骤

（1）切片准备及第一抗体孵育前处理同间接法，第一抗体（假设来自种属A）孵育24h（4℃）。第一抗体的稀释度可高些，使抗体的两个Fab段均与组织抗原结合，较牢固，漂洗时不易丢失。

（2）切片与第二抗体（也称桥抗体，抗种属a I

分子诊断

中国生物制品学杂志

以只

年月第

卷第

期

坛

哈司

。

以”

,

抗体快速诊断试剂与酶联免疫诊断试剂灵敏度比较李秀华宋爱京摘

王佑春比较。

要」目的丑

抗体快速诊断试剂与抗体酶联免疫诊断试剂检测不同样品灵敏度的差异

。

方法,

用扭抗体诊断试剂和

抗体酶联免疫诊断试剂分别检测扭抗体酶联免疫试剂国家参考品结果检测印抗体酶联免疫试剂国家参考品中。,

、

丑

不同亚型

样品以及,

高危人群样品

份阳性样品只检出,

份阳性

份最低检出限样品只检出阳性符合率为,

份阳性

与酶联免疫试剂相比对,,

亚型样品的检测其灵敏度低。

一

倍对,,

重

组样品其灵敏度低印倍对,

重组样品其灵敏度低,

一

倍

在

】

高危人群样品中与酶联免疫诊断试剂

,

阴性符合率为

。

结论

快速诊断试剂的灵敏度明显低于酶联免疫诊断试剂因此其

应用范围不能等同于酶联免疫诊断试剂

。

关【键词】人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂基因型亚型

余家企业生产主要采用双抗原夹心法免疫诊断试剂,

目前我国已有,,

抗体酶联。

田

北京万泰,,

抗体酶联免疫诊断试剂批号珠海丽珠,

,

该类试剂,

田以以效期为田

抗体酶联以洲旧。

灵敏度高已广泛应用于血液的筛查,,

。

最近已有快抗抗。

免疫诊断试剂批号检测方法用重组血清以释。

效期为

速诊断试剂投放市场该类试剂主要采用胶体金或胶体硒对抗原进行标记采用层析原理检

分类号 单位代码 11395 密 级 学 号 1106210105

学生毕业论文

改性松子壳吸附水中碱性品

题 目 作 者 院 (系) 专 业 指导老师 答辩日期

红的工艺研究

薛调琴 化学与化工学院 化学工程与工艺

刘侠

2015年 5 月 23日

榆 林 学 院

毕业论文诚信责任书

本人郑重声明：所呈交的毕业论文，是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的成果。毕业论文中凡引用他人已经发表或未发表的成果、数据、观点等，均已明确注明出处。尽我所知，除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经公开发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。

本人毕业论文与资料若有不实，愿意承担一切相关的法律责任。

论文作者签名:

西南科技大学

静态吸附实验

姓名：XXXX

学号：XXXXXXXXXXX 专业：XXXXXXXXXXX 班级：XXXXXXXXXXX

2012年12月26日

静态吸附实验

一、实验目的

1、 了解吸附剂的吸附性能和吸附原理； 2、 掌握吸附等温线和吸附动力学方程。 3、 熟悉分光光度计的使用以及原理。

二、 实验原理

活性炭的吸附能力以吸附量qe表示，如果在一定压力和温度条件下，用m克活性炭吸附溶液中的溶质，被吸附的溶质为x毫克，则单位重量的活性炭吸附溶质的数量qe即为吸附容量（吸附量）。

qe?xV(C0?Ce)? mm式中：qe ：活性炭吸附量，即单位重量的活性炭所吸附的物质重量，mg/g； x：被吸附物质重量，mg； m：活性炭投加量，g； V：水样体积，L；

C0、Ce ：分别为吸附前原水及吸附平衡时污水中的物质浓度，mg/L。 由吸附容量qe和平衡浓度Ce的关系所绘出的曲线为吸附等温线，表示吸附等温线的公式为吸附等温式。最常用的吸附等温式是朗格缪尔（Langmuir）模型和弗兰德利希（Freundich）模型。Langmuir方程是假设吸附剂的表面是单一、开放的，故属于单分子层吸附模型。Freundlich方程假设吸附剂表面的活性吸

人胎球蛋白A检测试剂盒（酶联免疫法）

（德国DRG EIA4522）

预期用途

此试剂盒可用于血清，血浆，细胞上清，组织提取物和尿液中人胎球蛋白A也称之为α-2-HS糖蛋白的定量的检测；血清或血浆中胎球蛋白A的检测可作为某些癌症及基因遗传缺陷的血清蛋白诊断的辅助工具；此试剂盒仅供实验室专业人士使用 简介

胎球蛋白A也称之为α-2-HS糖蛋白，是由两个氨基末端抑制域和一个较小的羧基末端域组成的59 kDa 分子量的糖蛋白；由肝脏合成，分泌至血流，成年哺乳动物体内的浓度范围在0.5-1.0g/L；婴儿期的血清胎球蛋白A含量高，参与蛋白酶抑制活性，与钙代谢和骨生成调节相关；累积于骨和牙齿内，作为生物学上非胶原骨蛋白的主要部分，研究表明，胎球蛋白A是循环中主要的钙化抑制剂；干涉钙盐沉淀；近期研究显示低水平胎球蛋白A的慢性肾脏衰竭患者与心血管病的高死亡率显著相关；另一方面，糖尿病老年人血清胎球蛋白A含量比正常人高，这是独立于胰岛素抑制剂的其他标记物；另外，高胎球蛋白A水平还可作为心血管疾病的的危险标记物

实验原理

此试剂盒可用于血清样本中人胎球蛋白A的定量检测；采用双位点夹心法，羊抗人胎球蛋白A多抗结合人胎球蛋白A的不同位点

将含人胎球蛋白A的试

《墙上的斑点》教案

2012-10-29

一、导入新课：

1941年，一位有着高贵典雅气质的妇女，在她的上衣口袋里装满鹅卵石，然后慢慢地沉入乌斯河的深处，沉入生命黑暗而神秘的本源。她活着，为世人创作了一部部不朽的著作，即使死，也要让一条原本寻常的河流从此名扬天下。今天，我们来一起学习她的一篇代表性作品——《墙上的斑点》（板书），去感受一下这篇小说与传统小说的差异性，探究这篇小说所要表现的主旨是什么。

二、关于作者：

弗吉尼亚〃伍尔芙（1882—1941），英国女作家、批判家，意识流小说的代表人物之一。她出生在伦敦的一个文学世家，父亲是一位著名的批评家、传记家和出版家。父亲的熏陶直接影响着她进行文学创作。她从未上过学，却博览群书，知识渊博。伍尔夫自幼身体虚弱，并有精神病史。1905年以后，她的精神病经常发作，并逐渐加重，但她一边与病魔抗争一边顽强创作。最后，由于病情恶化，反复发作，她不胜折磨，于1941年3月在住家不远处投河自尽。伍尔夫创作的主要成就是小说，1919年至30年代初，是她的意识流小说创作的兴盛期，先后发表了《墙上的斑点》（1919年，是她的第一篇典型“意识流作品”）、《雅

枯草芽孢杆菌产α-淀粉酶发酵试验

化学与生命科学学院

摘要：以枯草芽孢杆菌（BacilusSubtilisBF—7658）为实验菌株，通过种子扩大培养，选出生长力旺盛的菌株进行液体摇瓶发酵。通过测定不同发酵时间生产的酶活，来初步估计发酵最佳时期和终点。

关键词：枯草芽孢杆菌，α-淀粉酶，液体摇瓶发酵，酶活

淀粉酶是能够分解淀粉糖苷键的一类酶的总称，包括α-淀粉酶、β-淀粉

酶、糖化酶和异淀粉酶。芽孢杆菌主要用来产生α-淀粉酶和异淀粉酶，其中α-淀粉酶又称淀粉1，4-糊精酶，能够切开淀粉链内部的α-1，4-糖苷键，将淀粉水解为麦芽糖、含有6 个葡萄糖单位的寡糖和带有支链的寡糖；而异淀粉酶又称淀粉α-1，6-葡萄糖苷酶、分枝酶，此酶作用于支链淀粉分子分枝点处的α-1，6-糖苷键，将支链淀粉的整个侧链切下变成直链淀粉。通过发酵实验，我们可以以酶活为依据，初步估计发酵的最佳时期和发酵终点。

实验材料和方法

一、实验材料：

（一）实验菌株：以枯草芽孢杆菌（BacilusSubtilisBF—7658） （二）培养基： 1、种子培养液

葡萄糖 1%

Tryptone(胰蛋白胨)：1%, Yeast Extract(酵母提取物)：0.5%, NaCl(

UDG酶，即Uracil - DNA Glycocasylase，尿嘧啶-DNA糖基化酶。 UDG酶简介

碱基对，是形成DNA、RNA单体以及编码遗传信息的化学结构。如果有某一对碱基对的排列错误而导致基因编码异常，就很有可能引发癌症等疾病。可是，很多动物的DNA分子链中有数以亿计的碱基对，想从中找到错误的一条就无异于大海捞针。但美国的研究人员发现，有一种细胞酶可自动检验碱基对排列的对错。这就是UDG酶。美国约翰斯·霍普金斯大学医学院的研究人员报告说，他们通过实验发现，动物细胞中的一种UDG酶可以抓取DNA分子链中的基对并用特定形状的“口袋”来进行检查，如果碱基对排列形状正确则将其放回原处，如果形状有误则将其清除，DNA分子链中留下的空白会由其他修复机制来修补。 uracil-N-glycosylase

尿嘧啶-N- 糖基化酶(UNG)酶

原理：UNG酶的作用原理是选择性水解断裂含有dU的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键，形成的有缺失碱基的DNA链，在碱性介质以及高温下会进一步水解断裂，从而被消除.UNG酶的最佳活性温度为50℃，95℃灭活。

作用：为保证PCR结果的准确性，要预防非特异性PCR扩增和污染。常用的措施是使用UNG