山楂中黄酮的提取及含量测定结果偏小

1仪器与药品

台式超声波清洗器；紫外-可见分光光度计；可见分光光度计；SHZ-D循环水式真空泵；万分之一电子分析天平；抽滤瓶等。 芦丁标准品（中国药品生物制定检定所）；95%乙醇；亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等试剂，所用试剂均为分析纯；山楂。 2 实验部分 2.1对照品及供试品溶液的制备 2.1.1 对照品溶液的制备

精确称取芦丁对照品0.005g，置于小烧杯中，用体积分数70%的乙醇溶解并定量转移至25mL容量瓶中定容，摇匀，即得浓度为0.200mg/mL的芦丁标准品溶液。 2.1.2 供试品溶液的制备

称取干燥至恒重的山楂5.0g，置于100ml带塞锥形瓶中，按实验设计条件进行超声提取，提取液减压抽滤，取其滤液。将滤液定量转移至50ml容量瓶中，加相同浓度的乙醇定容至刻度，摇匀即得。 2.2 山楂中总黄酮含量测定方法的建立 2.2.1 测定波长的选择 精密量取芦丁对照品溶液1.50ml，置于10ml容量瓶中，加入体积分数70%乙醇至5ml。加5%亚硝酸钠溶液0.30ml，摇匀，放置6min；再加入10%硝酸铝溶液0.30ml，摇匀，放置6min；加入1.0mol/L的

1 总黄酮含量测定

1． 1 紫外可见分光光度法严赞开［1］综述了紫外分光光度法测定植物中黄酮含量的方法． 重点介绍了单波长法、差示法、双波长法、三波长法、导数法等紫外分光光度法测定黄酮类化合物含量的原理及分析特性。

1． 1． 1 紫外可见分光光度法: 是以分子吸收光谱为基础的紫外－ 可见分光光度法，利用某些物质的分子在峰带I( 300 ～400 nm) 和峰带Ⅱ( 220 ～ 280 nm) 光谱区的吸光度来进行分析测定的方法。具有简便、适用性广、准确度、精密度和重现性较好等特点，在总黄酮含量分析中发挥着重要作用。 1． 1． 2 比色法: 是一些药典最常用的总黄酮含量检测方法，它主要以Al( NO3 ) 3 为显色剂，在碱性条件下，利用其与总黄酮形成红色螯合物为特征。常用于总黄酮类化合物含量测定的金属盐试剂有Al( NO3 ) 3、AlCl3 等。

1． 1． 3 差示分光光度法简称ΔA 法: 使用稍高于样品或稍低于样品的标准作参比，测量样品和参比间的相对吸光度。而此相对吸光度又与样品和参比间的浓度差成比例关系，借差示工作曲线而求出样品的含量。

1． 1． 4 双波长和导数分光光度法: 用于测定吸收光谱曲线重达的混合物的含量而不须用解联

实验报告

实验三 酵母RNA的提取及含量测定

一、实验目的与要求

1、了解并掌握稀碱法提取RNA的原理和方法。

2、熟悉和掌握紫外吸收法测定核酸含量原理和操作方法，

3、熟悉紫外分光光度计的基本原理和使用方法。

二、实验原理

由于RNA的来源和种类很多，因而提取制备方法也很各异。一般有苯酚法、去污剂法和盐酸胍法。其中苯酚法又是实验是最常用的。组织匀浆用苯酚处理并离心后，RNA即溶于上层被酚饱和的水相中，DNA和蛋白质则留在酚层中。向水层加入乙醇后，RNA即以白色絮状沉淀析出，此法能较好的除去DNA和蛋白质。上述方法提取的RNA具有生物活性。工业上常用稀碱法和浓盐法提取RNA，用这两种方法所提取的核酸均为变性的RNA，主要用作制备核苷酸的原料，其工艺比较简单。浓盐法使用10%左右氯化钠溶液，90℃提取3-4h，迅速冷却，提取液经离心后, 上清液用乙醇沉淀RNA。稀碱法使用稀碱使酵母细胞裂解，然后用酸中和，除去蛋白质和菌体后的上清液用乙醇沉淀RNA或调pH2.5利用等电点沉淀。

酵母含RNA达2.67-10.0%，而DNA含量仅为0.03-0.516%，为此，提取RNA多以酵母为原料。

核酸、核苷酸及其衍生物的分子结构中的嘌呤、嘧啶碱基具有共轭双健系统（-C=C一

医药导报2004年9月第23卷第9期

［参考文献］

［1］张铁军，姜顺善.刘寄奴的原植物考证及应用［J］.中草药，1992，23

（6）：325-327.

［2］洪永福，李医明，许怀勇，等.南刘寄奴挥发油成分研究［J］.第二医

科大学学报，（4）：1997，18399.

675

［3］李子鸿，蒋春飞，刘东文，等.广东刘寄奴挥发油化学成分的GC-MS

分析［J］（8）：.中药材，2001，24575.

［4］国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草［M］.第10册.上

海：上海科学技术出版社，1999.566-1905.

黄秋葵中总黄酮的含量测定

方晴霞，金戈

（浙江省人民医院药剂科，杭州

［摘便可靠。

［关键词］黄秋葵；黄酮；紫外分光光度法［中图分类号］R282.71；R927.2

［文献标识码］A

［文章编号］1004-0781（2004）09-0675-02

用95%乙醇稀释至6mL，分别4.0，5.0，6.0mL于10mL量瓶中，加5%亚硝酸钠试液0.6mL，摇匀，静置6min；再加5%硝酸铝摇匀，静置6min；再加4%氢氧化钠3.0mL，用95%乙0.4mL，

醇稀释置刻度，摇匀，放置12min，以试剂作空白，在493nm处测定吸光度。以芦丁对照品溶液浓度为横坐标

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不同产地桑葚中总黄酮含量的测定

作者：周庆颂 孙若飞 宴丽芳 等 来源：《湖北农业科学》2014年第22期

摘要：为控制桑葚制剂质量的稳定性，采用分光光度法对不同产地桑葚药材中总黄酮含量进行分析比较。以芦丁为对照品，亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠为显色剂，测定波长为501 nm，芦丁浓度在0.008 18～0.049 06 mg/mL范围内吸收值与浓度具有良好的线性关系（r=0.999 7），平均加样回收率分别为103.30%、104.03%和105.83%，RSD值为2.65%、2.86%和2.27%（n=9）。该分析方法简单快速、准确可靠，可用于桑葚中总黄酮成分含量的测定。分别测定了8个不同产地药材中的总黄酮含量，含量范围为0.653～2.074 mg/g。结果表明，不同产地桑葚中总黄酮含量差异较大，说明环境综合机制对桑葚中总黄酮含量有明显影响。 关键词：桑葚；芦丁；总黄酮；产地

中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）22-5526-02

桑葚是荨麻目桑科植物桑树（Morus al

HPLC法测定银杏含量

第30卷　第2期2009年4月

首都师范大学学报(自然科学版)JournalofCapitalNormalUniversity

(NaturalScienceEdition)　No.2Apr.,2009

HPLC法测定银杏叶提取物中总黄酮醇苷的含量

余启荣　晏利芝　谭湘湘

1

2

2

(11北京创立科创医药技术开发有限公司,北京　100029;21首都师范大学分析测试中心,北京　100048)

摘要

　　目的::用HPLC酮醇苷进行含量测定研究.色谱柱采用DiamonsilC18(200),-0(52∶48)为流动相,检测波长为360nm;流速为110mL/:0(r=019998,n=5),山柰素在01117～01585(8,),010408～01204μg线性关系良好(r=019999,n

=5);槲皮素、(n=5)分别为99196%、99124%、100146%.结论:本方法操作简便,重

现性好,专属性强,.

关键词:银杏叶提取物,总黄酮苷,高效液相色谱法.

中图分类号:O65717

　　银杏叶提取物(EGB)为银杏科植物银杏(GinkgobilobaL1)的干燥叶经加工制成的提取物,银杏叶提取物中主要活性成分为黄酮类和萜类内酯.现代药理表明其

葛根粉中总黄酮的提取和测定

一、实验目的：

⒈ 熟悉超声波提取葛根粉中总黄酮的操作；

⒉ 比较紫外吸收与可见分光光度法测定总黄酮方法的相关性。

二、实验原理：

试样经超声波用无水甲醇提取其中的总黄酮，

①紫外吸收法：经扫描其紫外吸收光谱后，在紫外最大吸收波长下测定吸光度，根据标准曲线法定量；

②可见分光光度法：利用黄酮分子中的酚羟基在弱碱性条件下与铝离子发生铬合反应生成有色物质，在一定浓度范围内，其吸光度与总黄酮浓度成线性关系，标准曲线法定量。

三、主要仪器和试剂：

1

⒈ 紫外-可见分光光度计； ⒉ 超声波发生器； ⒊ 电子天平；

⒋ 芦丁标准溶液：精确称取10mg于120℃烘干至恒重的芦丁标样，以无水甲醇溶液超声溶解并定容至50ml摇匀即得浓度为0.2mg/ml芦丁标准液。

⒌ 硝酸铝溶液（100g/L）：称取10g硝酸铝加水溶解并稀释到100mL。 ⒍ 乙酸钾溶液（98.1g/L）：称取9.81g乙酸钾，加水溶解并稀释至100mL。

四、实验步骤： ⒈ 样品中总黄酮提取：

准确称取2.0g（精确到0.1mg）葛根粉于150mL锥形瓶中，加入无水甲醇40mL，在60℃超声提取1h，抽滤，收集滤液于100mL容量瓶中，滤渣重新置于原锥

辣木黄酮和多糖提取方法 及其含量影响因素的初步研究

摘要

为了稳定和提高辣木产品的有效成分含量，本研究比较了辣木有效成分黄酮和多糖的提取和测定方法，找到了辣木黄酮和多糖提取方法和条件的最佳优化组合。并应用乙醇回流法和苯酚-硫酸法探讨了叶龄、器官、产地、采收期、管理水平、朝向等与有效成分含量的关系。研究结果如下：

辣木总黄酮的最佳提取条件为：用70%的乙醇作为提取溶剂，乙醇用量为20倍，提取温度为80℃，提取3次，每次90min。在此提取条件下，辣木叶总黄酮量为6.59％。

辣木多糖的最佳提取条件为：以15倍的溶剂用量，在90℃水浴条件下，提取3次，每次120min，在此提取条件下，辣木叶多糖量为25.51％。

辣木叶片总黄酮和多糖含量均以45d的壮龄叶含量最高，总黄酮含量可达6.11％，多糖含量可达21.97％；幼龄叶和老龄叶中的总黄酮和多糖含量都比较少。

辣木不同器官的总黄酮含量为花柄中最多，根中最少，其变化范围为0.53%-4.47%；不同器官的多糖含量为根中最多.叶柄中最少.其变化范围为8.16%～33.61％。

不同采收期的辣木有效成分含量均在11月采收时含量最

高，其中总黄酮含量为叶5.69％、叶柄3.13％

二氢槲皮素在自然界含量丰富,易获得,且药理活性丰富,可应用于多个行业,市场需求与价值较高。本文从提取分离和含量测定两个方面对二氢槲皮素的研究进展进行了详细的概述,为今后对二氢槲皮素的研究提供参考依据。

第 2卷第 2 1期 21 02年 6月

吉林农业科技学院学报 V 1 1N . o 2,o2 . Junl finA ruta Si c n eho g n esy Jn,02 orao Ji gclr c neadTcnl yU i rt l i ul e o v i ue2 1

二氢槲皮素的提取及含量测定的研究进展柳摘

森，张卫鹏，付警辉，柴

婧，郑毅男刘文丛 ,

(吉林农业大学中药材学院，长春 1 18 3 1) 0

要：氢槲皮素在自然界含量丰富，二易获得，药理活性丰富，且可应用于多个行业，市场需求与价值较高。本文从

提取分离和含量测定两个方面对二氢槲皮素的研究进展进行了详细的概述，为今后对二氢槲皮素的研究提供参考依据。 关键词：- -氢槲皮素；提取分离；量测定；究进展含研中图分类号：Q6 T 4a文献标识码： A

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日

理

4义凌

硕士学位论文

半夏蛋白的提取分离、含量测定及对Hela细胞的 作

用研究

作者姓名

冯瑞娟

学科(专业）生物化学与分子生物学 指导老师 所在学院 提交日期

檢涛副教授 生命科学学院 年

中国杭州