动物细胞工程ppt课件
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动物细胞工程实验指导
实验时间 4月11日 4月18日 4月25日 实验内容 实验一 培养用液的配制、除菌与分装 实验二 细胞的传代培养 实验三 鱼类细胞原代培养(组织块法)(1-5组)401 实验四 染色体制备(6-10组)301 5月2日 实验三 鱼类细胞原代培养(组织块法)(6-10组)401 实验四 染色体制备(1-5组)301 5月9日 实验五 细胞的复苏与冻存
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实验一 培养用液的配制、除菌与分装
【实验目的】
1. 掌握常见培养用液的配制方法。 2. 掌握常用的灭菌方法。 3. 了解每种培养用液的作用。
【实验原理】
常用细胞培养用液包括磷酸盐平衡盐溶液(Phosphate Buffered Saline,PBS)、液体培养基、胰蛋白酶(Trypsin)和EDTA溶液。PBS用于清洗细胞、配制胰蛋白酶和 EDTA。培养基含有细胞生长需要的各种营养元素,使用时通常还需填加血清和抗生素。鱼类细胞培养的培养基常用种类是MEM 和L-15;用于动物的一般是DMEM和RPMI-1640。胰蛋白酶可将贴壁的细胞从培养瓶壁上消化下来,通常使用浓度为0.25%或0.125%。EDTA 用于清洗细胞表面,螯合Ca2+等二价离子,使细胞易于为胰蛋白酶消化。
细胞
动物细胞工程课堂笔记
动物细胞工程课堂笔记
动物细胞工程常用的技术
? 动物细胞培养:是其他动物细胞工程技术的基础。 ? 动物细胞融合 ? 动物细胞核移植
? 生产单克隆抗体等
? 一.动物细胞培养
(一)概念
(二)、原理:
? 如何进行细胞培养?
(三)相关概念
1.细胞贴壁:培养贴附性细胞时,细胞要能贴附于底物上才能生长繁殖.
2.细胞接触抑制:细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止,数量不再增加。
3.原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。一般培养的第1代细胞与传10代以内
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的细胞称为原代细胞培养。
4.传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。
5.细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到40~50代,这种传代细胞为细胞株。 6.细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。
7.细胞株和细胞系的区别: 细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,容易传代培养。
动物细胞工程复习题
动物细胞工程复习题
绪论
1、动物细胞工程技术应用的两面性。 2、动物细胞工程包含哪些主要研究内容?
实验室设置及无菌操作技术
1、你认为动物细胞培养无菌操作的要点有哪些? 2、动物细胞培养液的主要成分有哪些?
3、常用的培养动物细胞的培养基的种类?目前实验室中中常用的培养基是什么?
4、什么是天然培养基、合成培养基和无血清培养基? 5、目前常用的合成培养基有哪些?有哪些优点?
6、什么是无血清培养基?无血清培养基成分有哪些?无血清培养在实验研究中有什么特殊意义?
7、BSS有哪些功能?常用的BSS有哪些? 动物细胞组织培养 名词解释: 原代培养
传代培养 接触抑制 密度抑制 细胞克隆 细胞系 细胞株
动物细胞固定化培养 微载体培养技术 大孔载体培养技术 有限细胞系和无限细胞系 问答题:
1、体外培养细胞有哪些类型及各自特点?
2、细胞系的生长过程包括哪些主要阶段?每一生长阶段各有什么特征? 3、每代细胞的生长曲线包括哪几个主要时期?各期细胞有什么特点? 4、动物细胞原代培养的方法?举例说明培养的基本过程。 5、贴壁细胞传代时采用何种方法,其技术关键是什么? 6、为保证好的冻存复苏效果,需要考虑那些问
动物细胞工程 知识点
动物细胞工程 12月20日
动物细胞工程常用技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等,其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 一、动物细胞培养
1、定义:就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 2、原理:细胞增殖 3、过程 注意:
①10代以内细胞保持正常的二倍体核型,无突变发生,常用于实践或冷冻保存。 ②超过50代,极少数细胞突破自然寿命极限,突变成癌细胞,具有无限增殖能力;若超过50代,细胞不再增殖,全部死亡,则说明细胞没有发生癌变。
③分瓶之前,称原代培养;出现接触抑制用胰蛋白酶处理,再分瓶培养为传代培养。 思考回答:
⑴、为什么选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养?
答:其细胞的分化程度低,增殖能力强,有丝分裂旺盛,容易培养。 ⑵、动物细胞培养需要脱分化吗?为什么?
答:不需要。因为高度分化的动物细胞发育潜能变窄,失去了发育成完整个体的能力,所以没有类似植物组织培养的脱分化过程,要想使培养的动物细胞定向分化,通常采用定向诱导动物干细胞,使其分化成所需要的组织或器官。
⑶、进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞
江苏省南京市高中生物 第二章 细胞工程 2.3.3 动物细胞工程的应
第二章 细胞工程
第二节 动物细胞工程的应用(3)
【课标要求】
1.简述动物的细胞培养与体细胞克隆 2.举例说出细胞融合与单克隆抗体 【教学目标】
1.简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 2.举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。 【教学过程】
知识点三、细胞融合和单克隆抗体 (一)动物细胞融合
1、概念:动物细胞融合也称细胞杂交,是指在一定的条件下将 。融合后形成的具有原来 遗传信息的单核细胞,称为 。科学研究表明,不同类型的动物细胞之间能进行融合形成杂种细胞,如鼠—鸡、鼠—猴杂种细胞等 【思考】动物细胞融合的原理?
2、动物细胞融合的方法:主要有 (如 )、 (如 )和 (如 )。目前,应用 进行细胞融合的效率较高,且对细胞伤害小,易操作、控制和观察,因此在实验室被广泛使用。在细胞融合后,还需对融合细胞进行筛选和检测。 3、细胞融合技术的优点:_______________
安立国第二版动物细胞工程思考题参考答案
哺乳动物的克隆方法:胚胎干细胞核移植、胚胎细胞核移植、胎儿成纤维细胞核移植、体细胞核
移植。
第一章 绪论课后习题答案
1. 动物细胞工程主要有哪些内容?这些技术有何用途?
答:1. 组织和细胞培养技术2. 细胞融合与单克隆抗体技术3. 细胞核移植技术4. 胚胎工程技术 5. 干细胞技术6. 转基因技术7. 染色体工程
细胞工程的应用有:A. 单克隆抗体的应用:疾病诊断与治疗、微量大分子物资的检测、贵重生物活性物的分离与提纯、特殊疾病治疗、与药物交联治疗疾病;B. 转基因技术的应用:建立疾病的动物模型、品种改良和抗病育种、“乳腺生物发应器”、基因代替治疗、异种器官移植、基因功能研究;C. 细胞与组织替代治疗;D. 治疗人类不孕症;E. 优良品种繁育;F. 生产转基因家畜;G. 保护濒危动物。
2. 追踪动物细胞工程研究与应用的最新进展,并预测其发展趋势。
第二章 细胞培养
1、体外培养细胞有哪些类型?其生长特点有什么区别?
答:体外培养的细胞根据其生长方式,主要分为贴壁生长型细胞和悬浮生长型细胞。离体细胞 必须贴附于底物上才能生长的细胞称为贴壁生长型细胞。有机体的绝大部分细胞必须贴附在某 一固相表面才能生存和生长。动物细胞培养中,大多数细胞
江苏省南京市高中生物第二章细胞工程2.3.1动物细胞工程的应用导
第二章 细胞工程
第二节 动物细胞工程的应用(1)
【课标要求】
1.简述动物的细胞培养与体细胞克隆 2.举例说出细胞融合与单克隆抗体 【教学目标】
1.简述动物细胞培养的过程、条件。(知识目标) 2.举例说出动物细胞培养的应用。(知识目标) 3.比较植物组织培养与动物细胞培养。(能力目标) 【教学过程】
总述:动物细胞工程常用的技术手段有:____________________、_______________________、 _____________________、_________________________等。其中_____________________是其他动物工程技术的基础。如:如何解决大面积烧伤病人自体健康肤源有限的问题?解决途径:_________________________________。 知识点一、动物细胞与组织培养 【什么是动物细胞与组织培养?】
(一)概念:动物细胞与组织培养(animal cell culture)就是
高考生物一轮复习第十四单元细胞工程、胚胎工程(第44课时)动物细胞工程模拟训练
第44课时 动物细胞工程
一、选择题
1.(2015江苏扬州期末,24,3分)下列关于植物组织培养和动物细胞培养的比较,错误的是(多选)( ) A.都依据细胞的全能性原理 B.培养基中都需要添加琼脂 C.培养基中都需要添加有机碳源 D.都需要用CO2培养箱培养
2.(2015江苏南通中学模拟,18,2分)下列是动物细胞工程的有关描述,错误的是( ) A.动物细胞培养的培养液成分含有动物血清
B.常用动物胚胎细胞作为动物细胞培养的原料,原因是胚胎细胞全能性较高 C.不能用胃蛋白酶代替胰蛋白酶分散培养的细胞
D.细胞系是能够传到50代以后的细胞,其遗传物质发生了改变
3.(2016江苏阜宁中学调研二,16,2分)某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性,准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列叙述中正确的是( ) A.制备肝细胞悬液时,可用胃蛋白酶处理肝组织块 B.恒温培养箱中的CO2浓度维持在5%左右,以促进细胞呼吸 C.为了保证细胞培养所需的无毒环境,需大量添加各种抗生素 D.本实验应设置对照实验,以检测药物对甲、乙的毒性大小
4.(2015江苏盐城中学模拟,17,2分)把成年三倍体鲫鱼的肾脏细胞核移植到
细胞工程细胞工程基础 - 图文
第二章细胞工程基础
本章是本课程的理论基础和技术基础,重点回顾了一些重要的与细胞工程有关的理论背景知识,以及涉及的相关设施与技术,目的是为后续细胞工程各章的学习奠定基础。 内容提要:第一部分细胞工程的理论基础
第二部分细胞工程的技术基础
第一部分细胞工程的理论基础 一、细胞的基本结构及功能 四、组织与器官 二、细胞分化及细胞凋亡 五、生殖与发育 三、细胞周期及细胞分裂
一、细胞的基本结构及功能
细胞(cell)是生物体基本的结构和功能单位。已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成,但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现。
1、由膜包围的原生质团,通过质膜与周围环境进行物质和信息交流;
2、构成有机体的基本单位,具有自我复制的能力,是有机体生长发育的基础; 3、代谢与功能的基本单位,具有完整的代谢和调节体系,不同的细胞执行不同的功能; 4、遗传的基本单位,具有发育的全能性。
(一)细胞的基本共性
1、所有的细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质构成的生物膜,即细胞膜。 2、所有的细胞都含有两种核酸:即DNA与RNA作为遗传信息复制与转录的载体。 3、作为蛋白质合成的机器─核糖体,毫无例外地存在于一切细胞内。 4、所有细胞的增殖都以一分为二的方式
动物细胞培养总结!!!!
动物细胞培养总结 一.实验准备
1.实验器械、器皿的清洗和消毒 (1)清洗和包装
离心管(1.5ml,2ml,15ml)若干,冻存管若干放进铝饭盒,用牛皮纸包裹,系紧棉绳,用笔在饭盒上和牛皮纸上标记盒内所装物品名称、数量、日期和所属人名称。
蓝枪头两盒,黄枪头白枪头各一盒用牛皮纸包裹,用棉绳扎紧。 取适量蒸馏水于4L玻璃瓶,瓶盖拧松半圈。
过滤器,250ml玻璃瓶,500ml玻璃瓶用自来水毛刷洗涤剂刷洗,蒸馏水润洗,烘干。
过滤器两部分分别包裹,先将瓶口部位用锡纸包裹后,再罩以牛皮纸,再用棉布密包起来,用棉绳扎紧。
玻璃瓶拧下瓶盖,瓶身浸酸。浸酸时应注意安全,须穿戴耐酸手套和白大褂,注意保护好面部和身体裸露部分,提前备好一盆水在旁以便浸酸结束后清洗耐酸手套,防止走动时酸液滴到地板上不好清洗。瓶口慢慢沉入液面下,注意缓慢降低瓶身,使液体慢慢浸入瓶内,以免产生气泡溅出酸液,发生危险。浸酸时器皿要充满酸液,勿留气泡,浸泡过夜。取出瓶身时,须穿戴耐酸手套和白大褂,注意保护好面部和身体裸露部分,提前备好一盆水在旁,取出后将瓶身放入盆内水中在转移至水池边清洗,以免酸液滴落地板不好清洗。换水洗几次,待水澄清后开始冲洗,每瓶都用自来水灌满,倒掉,重复15次,