肝糖原的提取和鉴定实验报告

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肝糖原的提取和鉴定

标签:文库时间:2024-07-07
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肝糖原的提取和鉴定 一、实验目的

1、 学会和掌握肝糖原提取和鉴定的原理和方法。 2、 正确掌握使用离心机的方法步骤。 二、实验原理 三、实验步骤

(一)、肝糖原提取

1、用脱臼法处死白鼠,立即取出肝脏,迅速以滤纸吸取附着的血液。称取肝组织约2g,置研钵中,加入10%三氯乙酸2ml,用剪刀把肝组织剪碎,再加石英砂少许,研磨5min。 2、再加5%三氯乙酸4ml,继续研磨1min,至肝脏组织已充分磨成糜状为止,转入离心管,然后以2000r/min离心10min。

3、小心将离心管上清液转入另一个离心管中,加入同体积的95%乙醇,混匀后,此时糖原成絮状沉淀析出。

4、溶液以2000r/min离心10min。弃去上清液,并将离心管倒置于滤纸上1~2min。 5、在沉淀内加入蒸馏水2ml,用细玻璃棒搅拌沉淀至溶解,即成糖原溶液。 (二)、鉴定

1、取2支小试管A、B,一支A加糖原溶液10滴,另一支B加蒸馏水10滴,然后在两管中各加碘-碘化钾溶液1滴,混匀,比较两管溶液颜色有何不同。

2、再取2支小试管,将剩余的糖原溶液平分倒入两试管,试管甲加浓盐酸3滴,试管乙加蒸馏水3滴,将两管在沸水浴中加热10min以上。取出冷却,试管甲中逐滴加入20%NaOH溶

肝糖原的提取和鉴定

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肝糖原的提取和鉴定 一、实验目的

1、 学会和掌握肝糖原提取和鉴定的原理和方法。 2、 正确掌握使用离心机的方法步骤。 二、实验原理 三、实验步骤

(一)、肝糖原提取

1、用脱臼法处死白鼠,立即取出肝脏,迅速以滤纸吸取附着的血液。称取肝组织约2g,置研钵中,加入10%三氯乙酸2ml,用剪刀把肝组织剪碎,再加石英砂少许,研磨5min。 2、再加5%三氯乙酸4ml,继续研磨1min,至肝脏组织已充分磨成糜状为止,转入离心管,然后以2000r/min离心10min。

3、小心将离心管上清液转入另一个离心管中,加入同体积的95%乙醇,混匀后,此时糖原成絮状沉淀析出。

4、溶液以2000r/min离心10min。弃去上清液,并将离心管倒置于滤纸上1~2min。 5、在沉淀内加入蒸馏水2ml,用细玻璃棒搅拌沉淀至溶解,即成糖原溶液。 (二)、鉴定

1、取2支小试管A、B,一支A加糖原溶液10滴,另一支B加蒸馏水10滴,然后在两管中各加碘-碘化钾溶液1滴,混匀,比较两管溶液颜色有何不同。

2、再取2支小试管,将剩余的糖原溶液平分倒入两试管,试管甲加浓盐酸3滴,试管乙加蒸馏水3滴,将两管在沸水浴中加热10min以上。取出冷却,试管甲中逐滴加入20%NaOH溶

肝糖原的提取、鉴定与定量

标签:文库时间:2024-07-07
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肝糖原的提取、鉴定与定量

一、实验目的

1. 掌握组织样品的制备方法,了解其注意事项。

2. 了解肝糖原提取、糖原和葡萄糖鉴定与蒽酮比色测定糖原含量的原理和注意

事项,掌握其操作方法。

3. 熟练运用溶液混匀的各种方法(视具体情况,采用合适的混匀方法)。 4. 正确操作使用刻度吸管和可调微量取液器。 5. 正确掌握溶液转移的操作。 6. 正确操作使用分光光度计。

二、实验原理

(1)肝糖原的提取

糖原储存于细胞内,采用研磨匀浆等方法可使细胞破碎,低浓度的三氯醋酸能使蛋白质变性,破坏肝组织中的酶且沉淀蛋白质,而糖原仍稳定地保存于上清液中,从而使用糖原与蛋白质等其它成分分离开来。糖原不溶于乙醇而溶于热水,故先用95%乙醇将滤液中糖原沉淀,再溶于热水中。

(2)肝糖原的鉴定

糖原水溶液呈乳样光泽,遇碘呈红棕色。这是糖原中葡萄糖长链形成的螺旋中,依靠分子间引力吸附碘分子后呈现的颜色。糖原还可被酸水解为葡萄糖,而葡萄糖具有还原性,实验可利用呈色反应和葡萄糖的还原性,从而判定肝组织中糖原的存在

呈色反应具体如下:

CuSO4 + 2NaOH == Na2SO4 + Cu(OH)2↓

2Cu(OH)2 + C6H12O6 == 2CuOH + 氧化型葡萄糖

叶绿体色素的提取和理化性质的鉴定 实验报告

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实验报告

实验名称:叶绿体色素的提取、分离及其理化性质

日期:2011年11月2日 小组成员:——(2010******)

——(2010******)

专业:生物科学 生物科学与生物技术

班级:******

******

摘要

本实验对叶绿体中的色素进行了提取、分离和理化性质的鉴定。实验采用纸

2+

层析法进行分离,并从叶绿体色素的荧光现象、皂化作用、Mg的取代以及色素光谱对其理化性质进行了鉴定。 一、 实验目的

1. 以植物叶片组织为材料,提取叶绿体色素; 2. 以纸层析法分离其成分;

3. 鉴定叶绿体色素的理化性质。

二、 实验原理

1. 提取: 叶绿体中含有叶绿素(叶绿素a与b)和类胡萝卜素(胡萝卜素和叶黄素),这两类色素均不溶于水,而溶于有机溶剂,故常用乙醇、丙酮等有机溶剂提取。

2. 分离: 当溶剂沿支持物不断向前推进时,由于叶绿体中不同色素分子结构不同,在两相(流动相与固定相)间具有不同的分配系数,因此它们移动速率不同。对叶绿体色素进行层析可将不同色素分离。

3. 理化性质的观察: 叶绿素是一种二羧酸酯,在碱作用下,发生皂化反应;在弱酸作用下,叶绿素中镁可被氢原子取代而成为褐色的去镁叶绿素,后者遇铜则成为绿色的铜代叶绿

肌糖原的酵解作用实验报告

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肌糖元的酵解作用

学号:200900140157 班级:09生科3班 姓名:俞华军 时间:2011/03/27

一.实验目的

1.学习鉴定糖酵解作用的原理和方法。

2.了解酵解作用在糖代谢过程中的地位及生理意义。 3.了解有关组织代谢实验应注意的一些问题。

二.实验原理

在动物、植物、微生物等许多生物机体内,糖的无氧分解几乎都按完全相同的过程进行。本实验以动物肌肉组织中肌糖元的酵解过程为例。肌糖元的酵解作用,即肌糖元在缺氧的条件下,经过一系列的酶促反应,最后转变成乳酸的过程。肌肉组织中的肌糖元首先磷酸化,经过己糖磷酸酯、丙糖磷酸酯、甘油磷酸酯、丙酮酸等一系列中间产物,最后生成乳酸。该过程可综合成下列反应式: (1/n)(C6H10O5)n+H2O 2CH3CHOHCOOH

肌糖元的酵解作用是糖类供给能量的一种方式。当机体突然需要大量的能量,而又供氧不足(如剧烈运动时),则糖元的酵解作用可暂时满足能量消耗的需要。在有氧条件下,组织内糖元的酵解作用受到抑制,而有氧氧化则为糖代谢的主要途径。

糖元酵解作用的实验,一般使用肌肉糜或肌肉提取液。在用肌肉糜时,必须在无氧条件下进行;而用肌肉提取液,则可在有氧条件下进行。因为催化酵

肌糖原的酵解作用实验报告

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肌糖元的酵解作用

学号:200900140157 班级:09生科3班 姓名:俞华军 时间:2011/03/27

一.实验目的

1.学习鉴定糖酵解作用的原理和方法。

2.了解酵解作用在糖代谢过程中的地位及生理意义。 3.了解有关组织代谢实验应注意的一些问题。

二.实验原理

在动物、植物、微生物等许多生物机体内,糖的无氧分解几乎都按完全相同的过程进行。本实验以动物肌肉组织中肌糖元的酵解过程为例。肌糖元的酵解作用,即肌糖元在缺氧的条件下,经过一系列的酶促反应,最后转变成乳酸的过程。肌肉组织中的肌糖元首先磷酸化,经过己糖磷酸酯、丙糖磷酸酯、甘油磷酸酯、丙酮酸等一系列中间产物,最后生成乳酸。该过程可综合成下列反应式: (1/n)(C6H10O5)n+H2O 2CH3CHOHCOOH

肌糖元的酵解作用是糖类供给能量的一种方式。当机体突然需要大量的能量,而又供氧不足(如剧烈运动时),则糖元的酵解作用可暂时满足能量消耗的需要。在有氧条件下,组织内糖元的酵解作用受到抑制,而有氧氧化则为糖代谢的主要途径。

糖元酵解作用的实验,一般使用肌肉糜或肌肉提取液。在用肌肉糜时,必须在无氧条件下进行;而用肌肉提取液,则可在有氧条件下进行。因为催化酵

质粒DNA的提取、定量、酶切与PCR鉴定实验报告

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质粒DNA的提取、定量、酶切与PCR鉴定

一、实验目的

1.学习并掌握用碱裂解法提取质粒DNA的方法; 2.学习并掌握了解质粒酶切鉴定的方法;

3.学习并掌握紫外吸收检测DNA浓度和纯度的原理和方法; 4.学习并掌握PCR基因扩增的实验原理和操作方法; 5.学习并掌握水平式琼脂糖凝胶电泳的原理和使用方法。

二、实验原理

1.PCR(多聚酶链式反应)

在DNA聚合酶催化下,可以DNA为模板,以特定引物为延伸起点,以dNTP为原料,通过变性、退火、延伸等步骤, 在体外(缓冲液中)复制DNA,使目的DNA按2n方式呈指数形式扩增。

PCR一次循环的具体反应步骤为:

A.变性:加热反应系统至95℃,使模板DNA在高温下完全变性,双链解链 。 B.退火:逐渐降低溶液温度,使合成引物在低温(35-70℃,一般低于模板Tm值的5℃左右),与模板DNA互补退火形成部分双链。

C.延伸:溶液反应温度升至中温72℃,在 Taq酶作用下,以dNTP为原料,引物为复制起点,模板DNA的一条单链在解链和退火之后延伸为一条双链。

2.质粒DNA的提取与制备 (1).碱裂解法:

染色体DNA与质粒DNA的变性与复性存在差异: A.高碱性条件下,染色体DN

质粒DNA的提取、定量、酶切与PCR鉴定实验报告

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质粒DNA的提取、定量、酶切与PCR鉴定

一、实验目的

1.学习并掌握用碱裂解法提取质粒DNA的方法; 2.学习并掌握了解质粒酶切鉴定的方法;

3.学习并掌握紫外吸收检测DNA浓度和纯度的原理和方法; 4.学习并掌握PCR基因扩增的实验原理和操作方法; 5.学习并掌握水平式琼脂糖凝胶电泳的原理和使用方法。

二、实验原理

1.PCR(多聚酶链式反应)

在DNA聚合酶催化下,可以DNA为模板,以特定引物为延伸起点,以dNTP为原料,通过变性、退火、延伸等步骤, 在体外(缓冲液中)复制DNA,使目的DNA按2n方式呈指数形式扩增。

PCR一次循环的具体反应步骤为:

A.变性:加热反应系统至95℃,使模板DNA在高温下完全变性,双链解链 。 B.退火:逐渐降低溶液温度,使合成引物在低温(35-70℃,一般低于模板Tm值的5℃左右),与模板DNA互补退火形成部分双链。

C.延伸:溶液反应温度升至中温72℃,在 Taq酶作用下,以dNTP为原料,引物为复制起点,模板DNA的一条单链在解链和退火之后延伸为一条双链。

2.质粒DNA的提取与制备 (1).碱裂解法:

染色体DNA与质粒DNA的变性与复性存在差异: A.高碱性条件下,染色体DN

酵母RNA的提取实验报告

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酵母RNA的提取紫外吸收法测RNA浓度实验报告

一、实验目的

1、掌握稀碱法提取酵母RNA的原理和方法。

2、掌握紫外线(UV)吸收法测定核酸浓度的原理。 3、熟悉紫外分光光度计的使用方法。 二、实验原理

核酸是生命的最基本物质之一,广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内。对核酸的研究是更深入研究生命体的基本前提之一。研究核酸需要纯度很高的核酸,所以核酸的提取方法也就在生物学研究中相当重要。本次实验提取酵母的核糖核酸(RNA)。RNA离体后稳定性很差,含量低,所以在提取的时候就要注意防止核酸的降解和变性,防止过酸、过碱、避免剧烈搅拌,尤其重要的是防止RNA酶的作用。本实验是医药卫生领域与大工业生产的基础方法。

核酸(RNA)都是由核苷酸组成的多聚核苷酸化合物,而核苷酸是由糖、碱基和磷酸以等分子比例构成的,故测定组成核苷酸的任意一种组分即可以测定生物体内核酸的含量或者是提取出来的核酸的含量。 提取RNA的方法很多,在工业生产上常用的是稀碱法和浓盐法。前者是利用碱使细菌细胞壁溶解,是RNA释放出来,后者是在加热的条件下,利用高浓度的盐改变细胞膜的通透性,使RNA释放出来。使用浓盐法提取RNA的时候应该注意掌握温度,直接至90~100℃浸提,

实验报告-水体信息提取

标签:文库时间:2024-07-07
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《遥感原理与应用》实验报告

学院:

授课教师: 班级: 姓名:

学号:

一、 实验目的

1、提取TM图像中的水体信息,对图像(TM-AA)中的水体进行提取,采用公式(b2-b5、(b2-b5)/(b2+b5))分别进行提取,进行分割比较。

2、对提取的水体图像进行形态学处理,并对处理后的图像进行效果比较。

二、实验原理

通过ENVI软件,对图像(TM-AA)中的水体采用公式(b2-b5、(b2-b5)/(b2+b5))分别进行提取,进行分割比较。

三、实验准备

软件准备:ENVI 实验数据:图像:AA

四、实验步骤

1、查看图像直方图。

2)、查看光谱剖面信息。 3)、查看指定线路上的光谱值变化。

(4)、查看不同像素位置光谱值变化。

A、显示图像和直方图 B、确定直方图分级点的像素

C 、设置拉伸的范围

5)、查看(5,4,2)合成图像中水体光谱的差异。 6)比较不同地物的像素差异。

7)提取当前位置的像素值。

8)、提取水体。

9)、密度分割。 A、公式(b2-b5)

10)、对提取的水体图像进行形态学处理。

五、 实验结果

一)、密度分割结果比较。

二)、形态学处理的图像进行