小鼠海马神经元细胞

小鼠大脑皮层和海马神经元的分离与培养

一、玻片的准备

A．玻片的清洗

1. 第一天，将玻片(12mm，633009，Carolina) 逐片置于装有浓硝酸 (HNO3) 或者洗液的平皿中，混匀，然后浸泡过夜。

2. 第二天，将玻片放在有单蒸水的陶瓷盘中，搁在摇床上晃动，速度为200rpm，将玻片上的硝酸残液清洗干净。每10min换水一次，要换20次以上。晚上置于双蒸水中浸泡过夜。

3. 第三天，换双蒸水，重洗两次，每次速度为200rpm ，时间为60min，去除玻片上的离子和其它杂质，最后再换用无水乙醇，清洗三次以上。洗完后置于小烧杯中，拿到细胞房超净台将玻片浸泡在无水乙醇中室温保存。

4. 解剖小鼠取细胞前两天将玻片从无水乙醇中取出，在酒精灯焰上烘干，稍微在空气中停一下，再放到灭菌的parafilm膜上。玻片高温易碎，速度要快。完成后在紫外下照射1h。

B. 玻片的包被（PDL包被）

用0.1M的硼酸钠溶液将PDL配成0.01mg/ml PDL的溶液(pH 8.4)。 1. 准备500ml 0.1M的硼酸钠（Na2B4O7·10H2O, B3545-500G，Sigma）溶液。

2. 在超净台中，往一整瓶Poly-D-Lysin

小鼠大脑皮层和海马神经元的分离与培养

一、玻片的准备

A．玻片的清洗

1. 第一天，将玻片(12mm，633009，Carolina) 逐片置于装有浓硝酸 (HNO3) 或者洗液的平皿中，混匀，然后浸泡过夜。

2. 第二天，将玻片放在有单蒸水的陶瓷盘中，搁在摇床上晃动，速度为200rpm，将玻片上的硝酸残液清洗干净。每10min换水一次，要换20次以上。晚上置于双蒸水中浸泡过夜。

3. 第三天，换双蒸水，重洗两次，每次速度为200rpm ，时间为60min，去除玻片上的离子和其它杂质，最后再换用无水乙醇，清洗三次以上。洗完后置于小烧杯中，拿到细胞房超净台将玻片浸泡在无水乙醇中室温保存。

4. 解剖小鼠取细胞前两天将玻片从无水乙醇中取出，在酒精灯焰上烘干，稍微在空气中停一下，再放到灭菌的parafilm膜上。玻片高温易碎，速度要快。完成后在紫外下照射1h。

B. 玻片的包被（PDL包被）

用0.1M的硼酸钠溶液将PDL配成0.01mg/ml PDL的溶液(pH 8.4)。 1. 准备500ml 0.1M的硼酸钠（Na2B4O7·10H2O, B3545-500G，Sigma）溶液。

2. 在超净台中，往一整瓶Poly-D-Lysin

神经元突触

1.突触的基本结构

在电镜下观察到，突触部位有两层膜，分别称为突触前膜和突触后膜，两膜之间为突触间隙。所以，一个突触由突触前膜、突触间隙和突触后膜三部分构成。前膜和后膜的厚度一般只7nm左右，间隙为20nm左右。在靠近前膜的轴浆内含有线粒体和突触小泡，小泡的直径为30～60nm，其中含有化学递质。如图2-50所示，突触前神经元末端膨大形成突触小体（synaptic knob），其轴浆内含有大量的线粒体和突触小泡（synaptic vesicle）还有负责轴浆运输的微管和微丝。突触小泡中所含递质类型和形态的不同，可以分为三类：小儿清亮的

小泡，内含乙酰胆碱或氨基酸类递质；小儿具有致密中心的小泡，内含儿茶酚胺类递质；大而具有致密中心的小泡，内含神经肽类物质。从图中也可以看出，在突触前膜内侧存在类似栅栏的结构，这是突触小泡排放神经递质的位置，又称为活性区（active zone）。突触间隙的宽度为30~40 nm，其中充满了细胞外液以及一些蛋白基质。突触后膜也有增厚的现象，这是由于一些受体蛋白聚集在膜下方，形成突触后致密区（postsynaptic density），另外后膜上还存在一些能够分解递质的酶类。

2.突触的传递过程

了解了突

SICENCE新闻发布 作者：肖峰 稿号：NRR_323_14

CX3CR1缺失成体小鼠海马新生神经元树突复杂性降低及成熟延迟

来自中国中南大学湘雅二医院肖锋博士所在团队一项有关CX3CR1缺失的转基因小鼠的研究中发现，CX3CR1缺失可导致海马新生神经元树突复杂性降低及新生神经元成熟延迟。

fractalkine/CX3CR1信号参与多种神经疾病中小胶质细胞的神经毒性，响应小胶质细胞，并可在炎症条件下抑制小胶质细胞活性。既往研究显示小胶质细胞通过fractalkine/CX3趋化因子受体1信号通路积极参与海马神经再生过程中的增殖和分化。但是小胶质细胞是否可以影响海马神经再生中新生神经元的成熟及树突生长目前还不清楚。

此次，肖锋等发现CX3CR1缺失（CX3CR1 GFP/GFP）转基因小鼠海马小胶质细胞中doublecortin阳性细胞数量减少，海马新生神经元树突的长度缩短，交叉点数量减少。CX3CR1 GFP/GFP小鼠在海人酸诱导的癫痫发作后其海马齿状回中c-fos表达较少。说明小胶质细胞中fractalkine/CX3趋化因子受体

运动神经元病(MND)是一种成年起病的神经元变性性疾病,按病变部位不同分为三个临床亚型：肌萎缩侧索硬化、原发性侧索硬化、进行性脊肌萎缩症。肌萎缩侧索硬化是其中最常见的一型。运动神经元病发病率低,约2/10万左右, 90%的ALS是散发型,10%是常染色体显性遗传型[1、2]。为神经科少见病,早期表现不典型,有时伴有脑梗塞、颈椎病容易误诊,

肌萎缩侧索硬化21例分析

韦英秀

柳州市第三人民医院神经内科545007

摘要：目的 探讨肌萎缩侧索硬化（ALS）的临床特点及合并脑梗塞、颈椎病时复杂临床表现，以助与早期诊断ALS。方法 回顾性分析21例肌萎缩侧索硬化患者临床资料。结果 肌萎缩侧索硬化合并脑梗塞、颈椎病早期诊断困难，头颅、颈椎MRI及肌电图检查有助于早期诊断。结论 目前肌萎缩侧索硬化仍无特异性诊断方法，诊断仍然依靠临床表现、肌电图、以及头颅、颈椎MRI检查鉴别诊断。

关键词 运动神经元病、肌萎缩侧索硬化、脑梗塞、颈椎病

运动神经元病(MND)是一种成年起病的神经元变性性疾病，按病变部位不同分为三个临床亚型：肌萎缩侧索硬化、原发性侧索硬化、进行性脊肌萎缩症。肌萎缩侧索硬化是其中最常见的一型。运动神经元病发病率低，约2/10万左右， 90%的ALS

镜像神经元与自闭症

《环球科学》：镜像神经元,大脑中的魔镜 概述

◆当人类和猴子在执行某个动作或观看其他个体执行同样的动作时，大脑中的一部分神经元就会有所反应。

◆由“镜像神经元”产生的直接的内在体验，让我们能够理解他人的行为、意图或情感

◆镜像神经元也许是模仿他人动作以及学习能力的基础，从而使得镜像机制成为人与人之间进行多层面交流与联系的桥梁 约翰看见玛丽的手向一朵花伸去。约翰知道玛丽要做什么——她要摘花，可是她为什么要这样做？玛丽朝着约翰莞尔一笑，他猜她要把这朵花送给自己。这个简单的场景转瞬即逝，约翰却能立即领会玛丽的意图。为什么他能毫不费力地理解玛丽的行为和意图？ 10年前，大多数神经学家和心理学家都认为，我们对他人行为，特别是他人意图的理解，是通过一个快速的推理过程完成的。这个推理过程类似于逻辑推理。也就是说，约翰大脑中有一些复杂的认知结构，它们能详尽分析感官采集的信息，并把这些信息与先前储存的经历相比较，约翰就知道了玛丽在做什么，以及她为什么要这样做。 尽管在某些情况下(特别是当某人的行为难以理解的时候)，这种复杂的推导过程或许确实存在，但当我们看到简单的行为时，往往马上就能作出判断，这是不是意味着还

星形胶质细胞和神经元之间 谷氨酸! 谷氨酰胺的

&J% 生理科学进展$%%&年第&)卷第)期

星形胶质细胞和神经元之间谷氨酸!谷氨酰胺的代谢偶联"

$

杨晓运"#李#智"#秦绿叶$#于常海"，

（"中国科学院上海生物工程研究中心，上海$%%$&&；$北京大学神经科学研究所，北京"%%%’&）

摘要#谷氨酸!谷氨酰胺循环是星形胶质细胞和神经元代谢偶联最重要的途径之一。在中枢神经系统中葡萄糖经糖酵解和三羧酸循环，合成三羧酸循环的中间产物。神经元因缺乏丙酮酸羧化酶，不能由葡萄糖直接合成谷氨酸，而必须依赖于星形胶质细胞的三羧酸循环来产生作为谷氨酸前体的三羧酸循环中间代谢产物。星形胶质细胞的谷氨酸载体从突触间隙摄取谷氨酸，在星形胶质细胞中转变成谷氨酰胺并释放到细胞外，然后重新被神经元摄取，转变成谷氨酸进入新一轮的循环。本文介绍了该循环，以及星形胶质细胞谷氨酸载体的功能、特性及调控。关键词#星形胶质细胞；谷氨酸!谷氨酰胺循环；谷氨酸代谢；谷氨酸载体学科分类号#()$"

##大脑中神经细胞最大的特点就是互相联系以及沿着特定的途径进行信息传递。更好地了解

龙源期刊网 http://www.qikan.com.cn

电针对阿尔茨海默病模型大鼠海马胆碱能神经元的影响

作者：张海燕 刘忠锦 廉洁 陈志伟 来源：《中国医药导报》2013年第13期

[摘要] 目的 观察电针对阿尔茨海默病（Alzheimer's disease，AD）大鼠海马乙酰胆碱酯酶（AchE）和乙酰胆碱转移酶（CHAT）的影响。 方法 通过Morris水迷宫筛选48只健康Wistar大鼠随机分为4组。除正常组外，其余3组大鼠均注射β-淀粉样肽（1-40）（Aβ1-40） 所致AD模型。模型组不治疗。加兰他敏组采用氢溴酸加兰他敏灌胃。电针组造模后选取百会、双肾俞、双足三里、大椎等穴位针刺治疗。治疗4周后各组大鼠处死取海马，用免疫组化法和考马斯亮兰法测定AchE、CHAT的表达和含量。 结果 模型组AchE每个视野阳性细胞表达明显增强并且含量[（348.2593±13.0672）IU/g]升高，与正常组、加兰他敏组和电针组比较差异有统计学意义（P < 0.05）；但模型组CHAT阳性表达减弱且含量低[（81.8543±4.6528）IU/g]，治疗后加兰他敏组[（205.7539±5.9732）IU/g]和电针组增强[（202.5637±5.3695）IU/g），与模型组比较差异有统计学意义（P < 0.05）。 结论 电针通过调节胆碱能神经元的表达，以促进受损神经的恢复和再生。

[关键词] 电针；阿尔茨海默病大鼠；乙酰胆碱酯酶；乙酰胆碱转移酶

[中图分类号] R741 [文献标识码] A [文章编号] 1673-721

中国组织工程研究 第21卷 第21期 2017–07–28出版

Chinese Journal of Tissue Engineering Research July 28, 2017 Vol.21, No.21

www.CRTER.org

胎鼠不同脑组织中神经干细胞和神经元所占比例及差异 ，

·研究原著·

张凤兰1，杨璐军2，肖志成13(1昆明医科大学分子临床医学研究院，云南省昆明市 650500；2深圳市宝安区人民医院，广东省深圳市 518101；3澳大利亚莫纳什大学免疫与干细胞研究中心，澳大利亚墨尔本 VIC3010)

引用本文：张凤兰，杨璐军，肖志成. 胎鼠不同脑组织中神经干细胞和神经元所占比例及差异[J].中国组织工程研究，2017，21(21): 3364-3369.

DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.21.014 ORCID: 0000-0002-0096-9212(张凤兰)

文章快速阅读：

比较E14胎鼠全脑、大脑皮质和前脑组织中神经干细胞和神经元所占比例及差异 细胞免疫荧光鉴定： (1)消化为单细胞，贴壁培养3.0-4.0 h； (2)细胞免疫荧光

大脑皮层中的多肽及其相应神经元

生物化学与生物物理进展

年

第

!

卷

第

#

期

!

大脑皮层中的多肤及其相应神经元凤吴奇久李俊%中国科学院生物物理研究所,

‘

北京

&

提

要

大脑皮层的多肤在神经信息传导中起重要作用

文章对皮层各种神经元类型简、

要地作了描述

重点介绍了皮层中存在的主要多肤类的生理功能

氛基酸序列及其

相应神经元类型和分布

关键词

神经元

,

多肤

,

神经递质,

,

大脑皮层

,

氛基酸

由于生理生化和组织学的飞速发展经递质的研究中 ,

在神 .

元的基本类型圆锥形,

( ,除发现了乙酞胆碱% )+下一

锥体神经元的形态变化不大两个平行走向的基树突,

,

细胞体均呈

/ 120

,

3/& 、

、

氨基丁酸,

%,

一

(

4 12(

0

5

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1 .

具有一个垂直于大脑表面的顶树突和

(

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,

93:3&

促肾上腺皮质激素%0 2

8

7 2 0 0 7

轴突从胞体基部发出,

+ 1 0+7 0; 1)

/0 74

3<=>&

等经典的神经递+0

通向白质层

锥体细胞主要分布在皮层的 、

ΕΔ

质外

,

0 ,还发现了缩胆囊肤%/ ,、

? 12 12Β

,

非锥体细胞的大小,,

形状和方向性差别很+%5 1 6 + 8

&

Α (Β 0血管活性肠肤%,

( + 1Α