微生物检测基本操作

培养基的制备

培养基概念：

是指以液体、半固体或固体形式，包含天然或合成成分，用于促进微生物的繁殖或保持其活力的物质组成。由于各类微生物对营养的要求不同，培养目的和检测需要不同，因而培养基的种类很多。我们可根据某种标准，将种类繁多的培养基划分为若干类型。 培养基的分类：

按功能分类：基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基、特殊培养基。

按物理性状分类：液体培养基、固体培养基、半固体培养基。 液体培养基：所配制的培养基是液态的，这种培养基被用来微生物的增菌和生长状态观察。

固体培养基和半固体培养基：在液体培养基中加入适量的凝固剂制成成固体培养基和半固体培养基。常用作凝固剂的物质有琼脂。固体培养基琼脂用量1.5-2%，半固体培养基琼脂用量在0.5～1%之间。固体培养基用作微生物的分离、鉴定、计数、保藏等。半固体培养基被用来观察微生物的动力和保藏菌种。 今天给大家展示一下各种培养基的制备。 培养基制备的基本过程：

调配成分、溶解、校正pH、分装、灭菌、质量检查和保存 所需物品：试剂、锥形瓶、天平、量筒、微波炉、高压蒸汽灭菌器、

玻璃试管、玻璃平板、接种工具。 （1） 调配成分：

在锥形瓶或大容量烧瓶中依次加入蒸馏水200ml， 1％蛋白

《微生物学检验》习题集

绪论部分

一、名词解释

微生物、病原微生物、原核细胞型微生物。 二、填空题

1.按照结构、化学组成不同将微生物分成 、 、 三型。

原核细胞型微生物包括 、 、 、 、 和 ； 属于非细胞性微生物。 2.发明显微镜的人是 。

3．微生物学的创始人是 和 。 三、选择题 A型题

1.非细胞型微生物是

A.支原体 B.放线菌 C.衣原体 D.细菌 E.以上都不是 2.原核细胞型微生物和真核细胞型微生物的不同主要是

A.单细胞 B.原始核，细胞器不完善 C.在人工培养基能上生长 D.有细胞壁 E.对抗生素敏感 B型题

A.Louis Pasteur B.Joseph

空气中微生物检测

一、 实验目的

本实验用灭菌后的培养皿在空气中采样后并培养一段时间，测定空气中的微生物，其实验意义在于：

(1)了解空气中微生物的分布状况。

(2)比较普通实验室和无菌室空气中存在的微生物的数量和种类。 (3)验证无菌操作法在微生物学实验中的重要性。 二、 实验原理

空气是人类保持正常活动的物质条件，并与人类键康有着极为密切的关系，随着社会进入信息时代，空气微生物采样检测也得到了飞速发展，已研制出快速、敏感、特异，自动化程度高的各类仪器，为保持高质量的空气环境，应使用正确先进的空气监测方法。

在我们周围的环境中存在着种类繁多、数量庞大的微生物。空气中也不例外。虽然空气不是微生物栖息的良好环境。但由于气流、灰尘和水沫的流动，人和动物的活动等原因，仍有相当数量的微生物存在。

空气中微生物的采集方法很多，主要有用空气微生物采样器采样监测和用自然沉降采样法进行采样。本文就各类采样方法的性能做了介绍，使能正确选用各类采样方法。空气微生物采样主要涉及采样器、采样介质、采样方法及检验程度 4 个方面。 空气微生物采样器主要有：撞击式采样器、过滤式空气采样器、离心式空气采样器、气旋式采样器、静电沉降采样器等等。

当空气中个体微小的微生

环境中微生物的检测

微生物体积小、重量轻，因此可以到处传播以致达到“无孔不入”的地步。微生物种类繁多，对外界环境的适应能力又很强，只要生活条件合适，它们就可以迅速繁殖起来。因此，它们是自然界分布最广的一群生物。无论是南极、北极、高山、海洋、陆地、淡水，还是土壤、空气、动植物体内外，几乎到处都有它们的踪迹。

空气、水是维持人类生命不可或缺的物质。它们直接进入人体或与人接触。如果带有病原微生物，将成为传染疾病的媒介。通过空气和水中微生物的检验，对环境质量进行控制。

1.1 土壤中的微生物

1.1.1 土壤是微生物生活的良好环境

在自然界，土壤是微生物生活的良好环境。因为土壤具有微生物生长繁殖所必需的各种环境条件。 1.1.1.1 营养

土壤中有大量动植物残体、植物根系的分泌物、人和动物的排泄物，这些有机物为微生物提供了良好的碳源、氮源和能源；土壤中丰富的矿质元素可以满足微生物对矿质营养的要求。 1.1.1.2 水分和渗透压

土壤中具有一定的持水性，可为微生物提供水分；土壤的渗透压对微生物是等渗或低渗环境，有利于微生物摄取营养。 1.1.1.3 空气

土壤团粒结构中的小孔隙充满空气，土壤中氧的含量比大气少，平均为土壤空气体积的7%-8%。通气良好的

.

;.. 一、空气中微生物的检测

一、实验目的

1了解空气中微生物的分布状况，学习空气采样方法

2掌握空气中微生物的检测方法

二实验原理

空气是人类赖以生存的必须环境，也是微生物借以扩散的媒介。空气中存在着细菌、真菌、病毒、放线菌等多种微生物粒子，这些微生物粒子是空气污染物的重要组成部分。空气微生物主要来自于地面及实施、人和动物的蹑手呼吸道、皮肤和毛发等，它附着在空气气溶胶细小颗粒物表面，可较长时间停留在空气中。某些微生物还可以随着空气中细小颗粒穿过人体肺癌存留在肺的深处，给身体健康带来严重危害，也可以随着空气中细小颗粒物被输送到较远地区，给人体带来许多传染性的疾病和上呼吸道疾病。因此，空气微生物含量多少可以反映所在区域的空气质量，是空气环境污染的一个重要参数评价空气的清洁程度，需要测定空气中的微生物数量和空气污染微生物。测定的细菌指标有细菌总数和绿色链球菌，在必要时则测病原微生物。

空气并非微生物的繁殖场所，空气中缺乏水分和营养，紫外线的照射对微生物也有致死作用。微生物产生的孢子本身也可以飘浮到空气中，形成“气溶胶”，借风力传播。

空气中的微生物中，真菌的孢子数量最多，细菌较少。而且藻类、酵母菌、病毒都会存在于空气中。

目前，还无统一的关于空气的卫生学指标

病原微生物应急检测

柯昌文广东省疾病预防控制中心

一、病原微生物引起的传染病

我国传染病法规定的法定报告传染病分类：甲、乙、丙3类，从数量上共有39种，主要由病毒、细菌和寄生虫引起。

（一）甲类传染病主要鼠疫和霍乱。

（二）乙类传染病

（1）病毒引起的：传染性非典型肺炎、人感染高致病性禽流感、新型甲型H1N1流感、麻疹、病毒性肝炎、艾滋病、脊髓灰质炎、流行性出血热、狂犬病、流行性乙型脑炎。

（2）细菌引起的：伤寒和副伤寒、淋病、梅毒、百日咳、白喉、流行性脑脊髓膜炎、猩红热、钩端螺旋体病、布鲁氏菌病、炭疽、肺结核、新生儿破伤风。

（3）寄生虫和细菌：疟疾、血吸虫病、细菌性和阿米巴性痢疾。

（三）丙类传染病

（1）病毒引起的主要有：流行性感冒、流行性腮腺炎、急性出血性结膜炎、手足口病、风疹及除霍乱、痢疾、伤寒和副伤寒以外的感染性腹泻病。

（2）细菌和寄生虫引起的：麻风病、流行性和地方性斑疹伤寒、黑热病、丝虫病、包虫病。 （四）病原微生物引起的综合征 1、急性腹泻综合征

（1）细菌性腹泻：霍乱弧菌、志贺氏菌、大肠杆菌（肠毒素性和肠出血性）、沙门菌、空肠弯曲菌、小肠结肠耶尔森菌、艰难梭菌等。

（2）病毒性腹泻：轮状病毒、诺如病毒、腺病毒、埃博拉和其

姓 名 专业班级

论文名称 校内导师 实习单位 校外导师

毕业作品 XXX

12食品营养与检测2班

学校校区食堂午餐、餐具中微生物检测顶岗实习报告 XX

深职院食品安全评价研究中心

XXX

毕业作品任务书

专业（班）：12食检2班 姓名： XXX

1、课题名称、主要内容和基本要求

课题名称：本校区食堂午餐、餐具中微生物检测顶岗实习报告 主要内容：（1）了解深职院食品安全研究评价中心的基本情况； （2）确定顶岗实习工作内容，完成论文选题，并根据任务要求、查阅相关文献资料、国家标准分析方法等； （3）熟悉食堂午餐、餐具的微生物测定方法和检测指标； （4）熟悉食堂午餐、餐具的微生物测定的工作流程； （5）根据食堂午餐、餐具的微生物测定的数据，完成结果讨论； （6）完成顶岗实习总结报告和毕业论文写作。 基本要求：（1）查阅文献资料、国家标准分析方法； （2）每周向学院指导老师汇报一次进展情况； （3）撰写不少于5000字数的技术总结报告（毕业论文）、2000字数的顶岗实习总结； （4）论文PPT制作及答辩。 2、进度安排

周次 1-2 3 4-6 7-12 13-14 15-16 16 工作内容 了解单位基本情况、

微生物检验技术

讲授:周慧恒

目录一、第一讲 二、第二讲 三、第三讲 四、第四讲 五、第五讲 六、第六讲 七、第七讲 八、第八讲 九、第九讲 十、第十讲

实训一、实训一 二、实训二 三、实训三 四、实训四 五、实训五 六、实训六 七、实训七 八、实训八

第一讲：微生物及微生物检验概述1、什么是微生物酿酒、天花，列文虎克、巴斯德、 科赫

远古人类发现，吃剩的米粥数日后变成 了醇香可口的饮料—人类最早发明的酒

天花是感染痘病毒引起的， 无药可治，每4名天花病人 当中便有一人死亡，而剩余 的3人却要留下丑陋的痘痕。 明代以后，人痘接种法盛 行起来。到目前为止，天花 是在在世界范围被人类消灭 或控制的第一个传染病。

天花病毒

安东· 列文虎克 荷兰格拉夫 霍霍夫利特 微生物的鼻祖

无孔不入的微生物，何时何地不在与人 们打交道。甚至在我们体内到处安营扎寨 ，自由出入。可是，人们不肉眼看见它们 ，因而几千年来，人类竟不知道世界上还 有微生物这东西存在。 直到1673年列文虎 克用自制显微镜发现了“小动物”的微生 物世界！他一生当中磨制500多个镜片，制 造400多种显微镜，其中只有9种至今仍有 人使用。虽然他活着的时候就看到人们承 认了他的发现，但要等到100多

微生物检验操作规程

1. 目的

建立微生物检验标准操作规程，保证检验操作规范化。 2. 范围

适用于本公司相关的微生物检验活动的全过程。 3. 职责

3.1 微生物检验员负责微生物检验的全过程； 3.2 QC主管负责监督检查本规程的有效实施。 4. 操作规程

4.1 微生物检验玻璃器皿吸管的洗涤

4.1.1 一般的玻璃器皿（例如培养皿、试管、三角瓶等），可用毛刷及洗涤剂洗去灰尘、油垢，然后用自来水、蒸馏水充分冲洗，直至玻璃器皿内壁均匀分布一层薄的水膜，即器壁既不挂水珠也无条纹，即洗涤达到标准。

4.1.2 玻璃器皿内有污迹不能洗净时，可浸泡于洗液中，待器皿中有机物氧化分解后，取出用自来水、蒸馏水冲洗干净，备用。

4.1.3 新购的玻璃器皿先用2％盐酸浸泡，再用用自来水、蒸馏水充分冲洗。 4.2 器皿的包扎

4.2.1 试管：塞上胶塞，然后用牛皮纸或报纸把试管头包扎起来。做发酵试验时，将试管头塞上专用的耐高温PVC试管帽。

4.2.2 三角瓶、抽滤瓶：将三角瓶（抽滤瓶）口塞上胶塞，然后用牛皮纸把塞头部包起来。 4.2.3 吸管：将耐高温的移液枪头装盒，用用牛皮纸或报纸包裹。 4.2.4 平皿：10个为一组，用牛皮纸包裹。 4.3消毒和灭菌：

微生物检验操作规程

1. 目的

建立微生物检验标准操作规程，保证检验操作规范化。 2. 范围

适用于本公司相关的微生物检验活动的全过程。 3. 职责

3.1 微生物检验员负责微生物检验的全过程； 3.2 QC主管负责监督检查本规程的有效实施。 4. 操作规程

4.1 微生物检验玻璃器皿吸管的洗涤

4.1.1 一般的玻璃器皿（例如培养皿、试管、三角瓶等），可用毛刷及洗涤剂洗去灰尘、油垢，然后用自来水、蒸馏水充分冲洗，直至玻璃器皿内壁均匀分布一层薄的水膜，即器壁既不挂水珠也无条纹，即洗涤达到标准。

4.1.2 玻璃器皿内有污迹不能洗净时，可浸泡于洗液中，待器皿中有机物氧化分解后，取出用自来水、蒸馏水冲洗干净，备用。

4.1.3 新购的玻璃器皿先用2％盐酸浸泡，再用用自来水、蒸馏水充分冲洗。 4.2 器皿的包扎

4.2.1 试管：塞上胶塞，然后用牛皮纸或报纸把试管头包扎起来。做发酵试验时，将试管头塞上专用的耐高温PVC试管帽。

4.2.2 三角瓶、抽滤瓶：将三角瓶（抽滤瓶）口塞上胶塞，然后用牛皮纸把塞头部包起来。 4.2.3 吸管：将耐高温的移液枪头装盒，用用牛皮纸或报纸包裹。 4.2.4 平皿：10个为一组，用牛皮纸包裹。 4.3消毒和灭菌：