新城疫血凝抑制试验结果判定

血凝抑制试验结果判定：鸡群HI滴度离散度较小时，而HI滴度较高，其保护水平也高【1】。

①HI滴度在4log2的鸡群，保护率约为50%。

②HI滴度在4log2以下的非免疫鸡群，保护率约为10%；免疫鸡群约为40%。

③HI滴度在6log2～10log2的鸡群，保护率达90%～100%。 ④若鸡群有10%左右鸡出现11log2或以上的HI滴度，说明鸡群已经发生新城疫强毒的感染。

母源抗体对ND免疫应答的影响：【2】

①雏鸡在3日龄时抗体滴度最高，以后逐渐下降，每天大约下降13%。因此，多数人主张在母源抗体消失之前的7日龄时做第一次免疫，在30～35日龄时做第二次接种。但是，在ND流行的地区这样做是不安全的，因为母源抗体不足以抵抗强毒饲喂感染，所以有人主张对带有母源抗体的1日龄雏鸡采灭活苗免疫（据称灭活苗受循环抗体的影响较小），或者灭活苗和活苗同时接种（据称活苗能促进对灭活疫苗的免疫反应）。不过，这是一种完全依赖疫苗的做法，在=大规模饲养的条件下不可取。

②有条件的鸡场根据对HI抗体免疫监测结果来确定初次免疫和再次免疫的时间，这是最科学的方法。对鸡群抽样采血作HI试验，如果HI效价高于25时，进行首次免疫，几乎不产生免疫应答，可以选在23时接种

新城疫免疫是防控鸡新城疫的重要措施。临床上用于新城疫免疫的疫苗主要有活疫苗与灭活疫苗。无论是活疫苗还是灭活疫苗，影响新城疫免疫效果的因素很多，实践中应对疫苗种类的选择、防疫程序的制订、接种途径、操作方法等给予充分的重视，才能尽量减少免疫失败或不良反应。

鸡新城疫疫苗首免日龄在7~9d，如果日龄太小，母源抗体高滴度时，免疫不仅不能刺激机体产生应有的免疫应答，抗体反而会被中和，结果免疫失败。日龄太迟，容易出现免疫空白期，抗体滴度低于临界保护值，造成新城疫的发生、流行。最好通过实验室检测新城疫母源抗体水平来确定首免日龄。

1、滴入免疫法

滴入免疫法是指滴鼻、点眼、经上呼吸道或眼结膜进行免疫的一种方法。500头份的疫苗用25ml稀释液稀释把鸡头颈提起，呈水平位置，用手堵住一侧鼻孔，然后将疫苗滴入眼、鼻各一滴，待疫苗吸入和在眼内扩散后才可将鸡轻轻放回，谨防漏滴、重滴或未吸入等细节失误。

2、饮水免疫法

为避免污染物或有机物对疫苗中新城疫病毒的影响，先清洗饮水系统，再将疫苗与鸡日饮水量30%左右的水量混合，并使含有疫苗的水迅速充满饮水器，以免鸡群饮水量不足或饮用疫苗的量不均。小龙女18845079758疫苗饮水时间最好在喂料时，因为鸡群采食时饮水率比平时高很多，此

试验研究

!"#$%#&$$%’()*+,-.-(/,0123435(-,56’)(3-)37

!"#$%!法快速鉴别新城疫强弱毒株的试验

俞宁，岳华

（西南民族大学生命科学与技术学院，四川成都S!44(!）

2)P5"SP中图分类号：

8文献标识码：

!44!=)+S(4P=445P=45文章编号：（544P）

地针对#$%强毒扩增出一条长5P(IT的核酸电泳条带；6ER6$引物对能特异性地针对#$%弱毒扩增出一条长5P(IT的核酸电泳条带。

摘要a通过对大量不同毒力#$%’基因核苷酸序列的分析X根据强弱毒株’4裂

解位点的序列差异设计合成了三对引物X建立了快速诊断新城疫并能鉴别其强弱毒株的反转录=聚合酶链式反应&7@=637,方法X整个试验过程可在PG内完成。试验表明X该方法具有快速特异和操作简便的特点X不仅适用于对鸡胚毒的检测X而且适用于对病鸡组织匀浆液的检测X是新城疫鉴别诊断和流行病学调查的颇具潜力的分子诊断方法。

关键词a新城疫病毒；融合蛋白基因；反转录=聚合酶链式反应

&’()’*+,)-./!"#$%!0(1.)’*2-)’-./,-)3’3(4-5,6(.’1.2

14-5,6(.’)’5

2006年3月初,我市一养鸽专业户饲养的鸽子发病.要求笔者诊治。根据该场鸽子的发病情况及其解剖的病理变化,初步诊断为鸽子感染新城疫的疾病：采取防治新城疫的相应措施处理后,收到明显的效果。现将有关诊治情况报告如下。

维普资讯

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例鸽子感染新城疫的诊治报告区灿辉 (东省开平市动物防疫检疫站，东开平广广 59 0 2 3 0)

中图分类号： 8 83 ￥5. 9

文献标识码： B

文章编号：0 7 2 3 2 0 )6 0 3— 1 1 0— 7 X( 0 6 0— 0 5 0

20 0 6年 3月初，市一养鸽专业户饲养的鸽子发病。我要求笔者诊治。根据该场鸽子的发病情况及其解剖的病理变化，步诊断为鸽子感染新城疫的疾病：取防治新城疫的初采相应措施处理后，到明显的效果。现将有关诊治情况报告收如下。

和场地，病死鸽淘汰作无害化处理；着对假设健康鸽群将接

进行紧急预防接种：①种鸽每只皮下注射鸽瘟油乳剂灭活疫苗 2 L, m同时肌注鸡新城疫 I系疫苗，

2006年9月,我校动物医院接诊一蛋鸡病例,经临床症状、剖检变化和实验室检验,综合诊断为蛋鸡新城疫与沙门氏菌病混合感染。现将发病情况报告如下：

维普资讯

禽业辱航

器新赫.

混合感染的防治张娜，祥法魏

f.东农业大学动物医学院。东泰安 2 11; .东省农业科学院家禽研究所，东济南 20 0 1山山 7 08 2山山 50 0)

20年 9 . 06月我校动物医院接诊一蛋鸡病例， 经临床症状、剖检变化和实验室检验，综合诊断为蛋鸡新城疫与沙门氏菌病混合感染。将发病情况现报告如下：1发病情况 20 0 6年 9月下旬，泰安地区一养殖户饲养罗曼蛋鸡 3 0 0 0只，4 1 6日龄，发病前， 产蛋率低且增蛋速度慢。发病后，食量采

无菌条件下，钓取分离的单菌落接种于微量生化反应管中，利用微量生化反应管 (白杭州天河购微生物试剂有限公司，号 200 0 )批 06 82对细菌进行生化鉴定，果如下：结细菌生化鉴定实验表

和产蛋量均降低，饮水量增加，明显但有呼吸道症状，便稀薄。至接诊时已死粪截亡 8只。曾用盐酸环丙沙星、霉素等抗土生素进行治疗 .疗效不佳，于发病的第四天来我院就诊。 2临床症状蛋鸡精神沉郁、羽毛逆立、两翅下垂，有明显的 呼吸道症状。鸡贫血，病少食或不

血凝血抑试验

一、1%红细胞

准备：新鲜鸡抗凝血、PBS缓冲液或生理盐水、离心管、低速离心机

步骤：

1、抗凝血第一次离心：1500rpm，5min。去除上层白细胞血浆等

2、加入PBS或生理盐水，颠倒混匀

3、第二次离心：1500rpm，5min。去除上层白细胞血浆等

4、第三次离心：2000rpm，10min。去除上层白细胞血浆等

5、 99ml生理盐水或PBS+1ml红细胞。

二、血凝

物品准备：

待检测的样品、1%鸡红细胞、96孔血凝板、移液器及吸头、恒温箱

试验步骤：

1、用PBS（生理盐水）铺板：采用50微升体系进行试验。调节移液器至

50微升，吸取PBS缓冲液加入96孔血凝板中，有几个样品就加几排孔。

2、倍比稀释：吸取50微升待检样品依次加入第1纵排孔中，吹打15下后

吸取50微升再加入第2纵排孔，再吹打15下，吸取25微升加入第3纵排孔中，依次类推，直至第11纵排孔，吹打混匀后吸50微升后连同吸头一起弃去，第12纵排为红细胞对照。

3、加红细胞：加1%红细胞，每孔50微升，然后置于37℃温箱或者室温

反应20-40分钟左右，读数即可。

4、读数时，以出现完全凝集的孔作为病毒的血凝滴度。

三、4单位抗原

1、物品准备：病毒抗原、PBS缓冲液、1%鸡红细胞、单道和多道移

结核菌素纯蛋白衍生物（PPD）：

适用范围：胸片检查异常的患者；涂阳肺结核病人密切接触者；涂

阴病人和需与其他疾病鉴别诊断的病人

皮内注射法

1．注射部位和注射方法： 选择在左侧前臂掌侧中上部1/3处，一般常用0.1ml含5个结核菌素单位的纯蛋白衍生物（PPD）皮内注射，使之形成直径6-10mm的皮丘；若患者结核变态反应强烈如患疱疹性结膜炎，结节性红斑或一过性多发性结核过敏性关节炎等，宜用1个结核菌素单位的PPD试验，以防局部的过度反应及可能的病灶反应。

（注意：在注射前应询问患者以前曾否做过该试验，如做过应问清时间、部位，以免引起促进反应。） 2．注射量和皮丘的关系

准确地向皮内注射0.1毫升液体，形成的丘疹直径在6-10mm左右，这个大小程度在儿童较成人小（平均7mm左右），成人女子也略小于男子（9mm与8mm之比）。 3．注射的深度

同样注射在皮内，观察其各种深度变化所出现反应的差别，结核菌素反应直径不因深度出现差异。然而深的注射与浅的注射相比，深的注射反应的分散度大。如果过深达皮下程度，结核菌素迅速被吸收出现的反应就小。因此应当十分注意必须做浅层皮内注射 4．结果观察

于试验后48—72小时观察和记录结

一、结果判断：

PPD试验结果判断与临床意义

试验后72小时观察结果，以局部皮下硬结大小为准。

1.阴性：用（―）表示，无硬结或局部皮肤轻度发红或硬结平均直径小于5mm； 2.阳性：用（＋）的多少表示： （＋）：硬结平均直径5～9mm； （＋＋）：硬结平均直径10～19mm。 3.强阳性：用（＋）的多少表示： （＋＋＋）：硬结平均直径＞20mm；

（＋＋＋＋）：局部出现水泡坏死或淋巴管炎。 二、临床意义：

1.结核病流行病学调查，了解结核感染率和年感染率。 2.用于判定BCG接种是否成功（结素阳转）。

3.PPD强阳性伴有肺部病灶时，则有利于结核病的诊断。但肺部无病灶时，说明机体处于结核菌敏感状态。

4.PPD试验一般阳性则诊断意义不大，仅表示体内具有一定的抗体，毋需治疗。

5.PPD试验对婴幼儿诊断价值高于成人，因其自然感染率尚低。但对于没有接种过卡介苗3岁以下的儿童来说，一旦阳性可视为结核菌感染状态，需要预防投药。

6.PPD首次皮试如阴性，一周后再次皮试仍为阴性一般作为无结核感染。如来年再PPD试验阳转应作为新感染者可据条件给予化学预防。

7.PPD试验阴性一般视为无结核菌感染，需加大浓度重复试验，如仍获得阴性结果则可排除结核菌感染。

一、结果判断：

PPD试验结果判断与临床意义

试验后72小时观察结果，以局部皮下硬结大小为准。

1.阴性：用（―）表示，无硬结或局部皮肤轻度发红或硬结平均直径小于5mm； 2.阳性：用（＋）的多少表示： （＋）：硬结平均直径5～9mm； （＋＋）：硬结平均直径10～19mm。 3.强阳性：用（＋）的多少表示： （＋＋＋）：硬结平均直径＞20mm；

（＋＋＋＋）：局部出现水泡坏死或淋巴管炎。 二、临床意义：

1.结核病流行病学调查，了解结核感染率和年感染率。 2.用于判定BCG接种是否成功（结素阳转）。

3.PPD强阳性伴有肺部病灶时，则有利于结核病的诊断。但肺部无病灶时，说明机体处于结核菌敏感状态。

4.PPD试验一般阳性则诊断意义不大，仅表示体内具有一定的抗体，毋需治疗。

5.PPD试验对婴幼儿诊断价值高于成人，因其自然感染率尚低。但对于没有接种过卡介苗3岁以下的儿童来说，一旦阳性可视为结核菌感染状态，需要预防投药。

6.PPD首次皮试如阴性，一周后再次皮试仍为阴性一般作为无结核感染。如来年再PPD试验阳转应作为新感染者可据条件给予化学预防。

7.PPD试验阴性一般视为无结核菌感染，需加大浓度重复试验，如仍获得阴性结果则可排除结核菌感染。

拉伸性能试验测量结果不确定度评定

1.过程概述： 1.1方法及评定依据

JJF1059-1999测量不确定度评定与表示 JJG139-1999拉力、压力和万能试验机机定规程 JJF1103-2003万能试验机计算机数据采集系统评定

1.2 环境条件

试验温度为23℃，湿度50%。 1.3 检测程序

塑料制品的室温拉伸试验抗拉强度检测时，首先根据试样横截面的种类不同测量厚度、宽度，计算截面积S0；然后用电子万能材料试验机以规定速率施加拉力，直至试样断裂。在同一试验条件下，试验共进行6次。

2 拉伸性能试验测量结果不确定度的评定

以三个试样平均结果的抗拉强度和塑性指标的不确定度 使用6个试样，得到测量结果见下表1。 实验室标准偏差按贝塞尔公式计算

s式中：

j??(Xi?1ni?X)

n?121nX??Xi

ni?1

表1 重复性试验测量结果

试样尺寸(mm) 编号 A（厚度） 1 2 3 4 5 6 平均值 标准差Sj 相对标准偏差

2.1抗拉强度不确定度评定 数学模型

Rm=Fm/So

2222(rep)?urel(Fm)?urel(S0)