丙二醛的测定

实验六、植物组织丙二醛含量测定

植物叶片在衰老过程中发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等。这些指标在一定程度上反映衰老过程的变化。近来大量研究表明，植物在逆境胁迫或衰老过程中，细胞内活性氧代谢的平衡被破坏而有利于活性氧的积累。活性氧积累的危害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。活性氧包括含氧自由基。自由基是具有未配对价电子的原子或原子团。生物体内产生的活性氧主要有超氧自由基(O-2)、羟自由基(OH·)、过氧自由基(ROO·)、烷氧自由基(RO·)、过氧化氢（H2O2）、单线态氧（O21）等。植物对活性氧产生有酶促和非酶促两类防御系统，超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶POD和抗坏血酸过氧化物酶(ASA—POD)等是酶促防御系统的重要保护酶，抗坏血酸(ASA)和还原型谷胱甘肽(GSH)等是非酶促防御系统中的重要抗氧化剂。

丙二醛(MDA)是细胞膜脂过氧化作用的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。因此，丙二醛产生数量的多少能够代表膜脂过氧化的程度，也可间接反映植物组织的抗氧化能力的强弱。所以在植物衰老生理和抗性生

实验六、植物组织丙二醛含量测定

植物叶片在衰老过程中发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等。这些指标在一定程度上反映衰老过程的变化。近来大量研究表明，植物在逆境胁迫或衰老过程中，细胞内活性氧代谢的平衡被破坏而有利于活性氧的积累。活性氧积累的危害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。活性氧包括含氧自由基。自由基是具有未配对价电子的原子或原子团。生物体内产生的活性氧主要有超氧自由基(O-2)、羟自由基(OH·)、过氧自由基(ROO·)、烷氧自由基(RO·)、过氧化氢（H2O2）、单线态氧（O21）等。植物对活性氧产生有酶促和非酶促两类防御系统，超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶POD和抗坏血酸过氧化物酶(ASA—POD)等是酶促防御系统的重要保护酶，抗坏血酸(ASA)和还原型谷胱甘肽(GSH)等是非酶促防御系统中的重要抗氧化剂。

丙二醛(MDA)是细胞膜脂过氧化作用的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。因此，丙二醛产生数量的多少能够代表膜脂过氧化的程度，也可间接反映植物组织的抗氧化能力的强弱。所以在植物衰老生理和抗性生

丙二醛MDA、总抗氧化能力、超氧化物歧化酶（SOD）的

测定

丙二醛MDA测定

测试所需仪器设备：

可见光分光光度计，可调到95℃左右的恒温水浴箱（或者铝锅内放几个去掉盖子的易拉罐，将罐壁及底部穿数十个孔，以便水的进入，用来代替水浴箱）。离心机。

100Ｔ试剂盒组成与配制：

试剂一：液体20mL*1瓶，室温保存．（天冷时会凝固，每次测试前

适当水浴加温以加速溶解，直至透明方可应用）。

试剂二：液体12mL*1瓶，用时每瓶加340mL双蒸水混匀，4℃冷藏。 试剂三：粉剂*1支，4℃冷藏。

1. 按规范操作方法来配制MDA3号试剂：将1支100Ｔ的MDA3号粉剂倒入烧杯内加90℃～100℃的热蒸馏水64mL,充分溶解（溶解过程中可适当加热）。冷却后加冰醋酸60mL混匀。 2. 再将上述配好的MDA3号试剂用50％冰醋酸按2：1进行稀释，用多少配多少。

例如您需要用微量法测MDA需要试剂三为15mL，则可以取上述按规范操作法配好的试剂三10mL加冰醋酸5mL，混匀即可。配好的试剂避光4℃冰箱冷藏（冰醋酸自备）

注：因蒸馏水热胀冷缩，加热过程要蒸发，本应加60mL现多加4mL，冷却后在60mL。

50％冰醋酸的配制是50mL双蒸水加50mL冰醋酸

植物组织中丙二醛的测定

一、实验目的和要求

1.了解植物叶片衰老过程中丙二醛（MDA）含量变化；

2.掌握测定丙二醛（MDA）含量的常用方法。

二、实验内容和原理

植物器官在逆境条件下或衰老时，自由基代谢失调，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛（MDA）是其产物之一，通常作为脂质过氧化指标，用于表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件反应的强弱。

MDA在高温、酸性条件下与硫代巴比妥酸(TBA)反应，形成三甲基复合物，该复合物的最大吸收峰在532nm处，最小吸收峰在600nm处，消光系数为155 (mM)-1 cm-1。

三、实验材料和主要仪器

材料：新老叶蛋白提取液

仪器：移液枪，水浴箱，离心机，离心管，分光光度计

试剂：磷酸缓冲液，TBA，TCA

四、实验方法和步骤

1.制取提取液（一周前进行）

称叶龄差异明显的叶片各0.50g 左右，加入5ml 磷酸缓冲液（50mmol，pH值为7.8），于冰浴中研磨提取，匀浆液以8000g 离心力作用下（4℃）离心10min，其上清液即为提取液。

2.加试剂以及处理：

实验管：分别向1mL新老叶提取液中加TBA与TCA混合液4.0mL（92oC水浴保温30min）

空白管：1mL Pi-buffer +TBA与TCA混合液 4.0ml

植物组织中丙二醛含量的测定

一、原理

植物器官衰老或在逆境下遭受伤害，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛(malondialdehydeMDA)是膜脂过氧化作用的产物之一，其含量可以反映植物遭受逆境伤害的程度。

丙二醛在酸性和高温条件，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应,形成在532nm波长处有最大光吸收的有色三甲基复合物，该复合物的吸光系数为155????????/(??·????)，并且在600nm处有最小光吸收。可按公式：

??532－??600=155000×??×??①

算出MDA浓度??(????????/??)，进一步算出单位质量组织中 MDA 含量(????????/??)。式中A532和A600分别表示532nm和600nm处的吸光度值。??为比色杯厚度(???? )。

需要指出的是，植物组织中糖类物质对MDA-TBA反应有干扰作用。为消除这种干扰，经试验，可用下列公式消除由蔗糖引起的误差。

??(????????/??)=6.45(??532－??600)?0.56??450 ②

式中： A450、A532和A600分别表示450nm、532nm 和600nm波长下的吸光度值。用公式②算出植物样品提取液中MDA的浓度后

实验设计（一）

题目：植物组织内丙二醛（MDA）含量的测定——比色法 组数：第七组 组长：杨曼 学校：南通大学 年级：13级 专业：生物工程131

实验目的

1，根据待测植物的抗逆生理，掌握对待测植物做逆境处

理的方法

2，比较同种胁迫逆境处理对待测植物不同部位生长的影响

3，比较不同胁迫逆境处理对待测植物生长的影响 4，了解植物组织内MDA积累水平对植物生理状态的影响

5，掌握比色法测定植物组织内MDA含量的方法和步骤

实验原理

1，植物抗逆是植物对抗不良环境，比如抗旱、抗盐碱、抗涝、抗风、抗冻、抗病虫害等的能力.

在自然界条件下，由于不同的地理位置和气候条件以及人类活动等多方面原因，造成了各种不良环境，超出了植物正常生长、发育所能忍受的范围，致使植物受到伤害甚至死

亡。这些对植物产生伤害的环境称为逆境（stress）或胁迫。而植物对不良环境的适应性和抵抗力为抗逆性（stress resistance）或抗性.

逆境的种类多种多样，包括物理的、化学的、生物因素等，可分为生物逆境和非生物逆境两大类。对植物产生重要影响的非生物逆境主要有水分（干旱和淹涝）、温度（高、低温）、盐碱、

RP-HPLC法测定路路通胶囊中原儿茶醛的含量

发表时间：2012-07-12T16:05:53.947Z 来源：《中外健康文摘》2012年第10期供稿作者：赵慧[导读] 本法专属性强，准确度高，重现性好，可作为该产品质量控制方法。

赵慧（长沙市第四人民医院湖南长沙 418000）【摘要】目的建立路路通胶囊中原儿茶醛的含量测定方法。方法用HPLC法测定路路通胶囊中原儿茶醛的含量。结果色谱柱为Dikma Diamonsil C18柱（250mm×4.6mm，5m），以甲醇－1%醋酸（12:88）为流动相，流速为1.0mL?min-1，柱温：35℃，检测波长：279nm。Diamonsil C18柱进样量在0.01349～0.1349μg范围内与峰面积呈良好线性关系（r＝1.0000），平均加样回收率为99.02%（RSD=0.83%，n=9）。结论本法专属性强，准确度高，重现性好，可作为该产品质量控制方法。【关键词】高效液相色谱法路路通胶囊原儿茶醛路路通胶囊是由水蛭、三七、枳实、皂角刺、桃仁、莪术、柴胡、赤芍、当归、红花、路路通、丹参、鸡血藤、香附、王不留行等十五味中药组方而制成的复方制剂，具有祛风活络，利水通经的作用。关节痹痛，麻

化工

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紫外吸光光度法同时测定乙醛酸和乙二醛王玉萍，彭盘英，周耀明(京师范大学化学与环境科学学院，南南京 20 9) 10 7

摘

要：用醛基与羟胺在酸性条件下的加成反应产物乙醛酸肟和乙二醛二肟的不同紫外吸收利

峰，用双波长法同时测定溶液中的乙醛酸和乙二醛。结果表明，乙醛酸在 0 0~0 1 6g L范 . 3 . 5 围内符合比耳定律，回归方程为 Y一0 1 94 0 0 37 r . 9 (z )乙二醛在 0 1其 . 0 x一。 0,一0 9 99,一5, .~

0 5g 范围内符合比耳定律， . L其回归方程为 Y . 2 l一0 0 35 r . 0 (一5。乙一0 2 31x . 2,一1 0 00, ) z醛酸和乙二醛质量比大于 1乙醛酸的回收率为 9 . 6 1 1 5/,, 6 2/ 0 .乙二醛的回收率为 1 1 6~ 9~ 9 6 0.%1 6 8。方法操作简便、济、密度较好。 0.%经精

关键词：外吸光光度法；加成反应；乙醛酸；乙二醛；乙醛酸肟；乙二肟紫中图分类号： 5 06 7文献标识码：A文章编号：10—0 0 2 0 ) 30 9— 4 0 14 2 ( 0 5 0— 1 90

UV— P S ECTROPH OTO

生产实习报告

（化学分析）

班 级 应用化学132班 姓 名 林可

学 号 201306015206

指导老师 申屠超/蒋益花

浙江树人大学生物与环境工程学院

2015年7月9日

成品白酒的分析

一. 实验目的

1.掌握白酒中总酸、总酯、总醛的测定原理和方法。 2.练习酸碱标准溶液的配制和浓度的滴定。

3.熟练掌握碱式滴定管的操作，掌握中和法的滴定，熟悉酚酞指示剂的使用和终点方法。 二．实验原理

（总酸）白酒中的总酸包括甲酸、乙酸、丁酸等脂肪和乳酸等。酸类是构成脂类的成分之一，它不仅是酒的呈味物质，而且酸对产品的质量关系甚大，酸量过大会使酒发酸、发涩，用化学分析法测得的白酒为白酒中的总酸，常以乙酸计，以酚酞为指示剂，采用标定的氢氧化钠进行直接中和滴定，其反应式为 RCOOH + NaOH ── RCOONa + H2O 总酸的计算公式为：

总酸= [C NaOH·V NaOH·MCH3

RP-HPLC法测定路路通胶囊中原儿茶醛的含量

发表时间：2012-07-12T16:05:53.947Z 来源：《中外健康文摘》2012年第10期供稿作者：赵慧[导读] 本法专属性强，准确度高，重现性好，可作为该产品质量控制方法。

赵慧（长沙市第四人民医院湖南长沙 418000）【摘要】目的建立路路通胶囊中原儿茶醛的含量测定方法。方法用HPLC法测定路路通胶囊中原儿茶醛的含量。结果色谱柱为Dikma Diamonsil C18柱（250mm×4.6mm，5m），以甲醇－1%醋酸（12:88）为流动相，流速为1.0mL?min-1，柱温：35℃，检测波长：279nm。Diamonsil C18柱进样量在0.01349～0.1349μg范围内与峰面积呈良好线性关系（r＝1.0000），平均加样回收率为99.02%（RSD=0.83%，n=9）。结论本法专属性强，准确度高，重现性好，可作为该产品质量控制方法。【关键词】高效液相色谱法路路通胶囊原儿茶醛路路通胶囊是由水蛭、三七、枳实、皂角刺、桃仁、莪术、柴胡、赤芍、当归、红花、路路通、丹参、鸡血藤、香附、王不留行等十五味中药组方而制成的复方制剂，具有祛风活络，利水通经的作用。关节痹痛，麻