pcr实验室检查要点指南

PCR实验室作业指导书

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2012年 日

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序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 主 题 内 容 PCR实验室的设置及管理 PCR实验室工作制度 实验室内务管理及清洁制度 PCR实验室人员的配置及管理 实验人员的培训程序 PCR实验室清洁程序 样品编号的标准操作程序 PCR基因扩增实验室的要求 PCR废弃物的处理程序 试剂准备区工作制度、标准操作、程序文件 标本制备区工作制度、标准操作、程序文件 扩增区工作制度、标准操作、程序文件 产物分析区工作制度、标准操作、程序文件 PCR标本的保存操作程序 PCR标本的采集、运送、接收程序 PCR生物安全防护措施 PCR实验室化学试剂配 PCR实验室记录管理制度 PCR应急处理程序 PCR试剂的质检标准操作程序 PCR消耗品进购质检贮存程序 PCR室内质量控制操作程序 PCR室间质量控制操作程序 PCR温度校准标准操作程序 代 号 页 号

内蒙古第四医院 检验科 前 言

前言 编号：CG-JY-QY 日期：2009年7月1日 版本：2009-1 共1页 我院是一所综合性三级医院。近年来，随着临床医学的不断进步，检验医学也得到了迅猛的发展。检验科为了更好的满足临床诊断的需求，根据卫生部临检中心制定的《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》（卫医发[2002]10号）、《临床基因扩增检验实验室工作规范》（卫检字2002第8号）文件，设立了临床基因扩增检验实验室，并于2009年6月着手编写实验室质量管理程序文件。经过试运行，反复讨论和修改第一版已定稿。从即日起开始实施。

编写人 王宇飞 批准人 张惠彬 生效日期 2009-7-1 1

内蒙古第四医院 检验科

1.质量方针

质量方针、目标 编号：CG-JY-FZ 日期：2009年7月1日 版本：2009-1 共1页 本实验室的质量方针是：准确、及时、可靠。

2.质量目标

全面贯彻质量方针，建立科学、合理的实验室质量管理体系，严格按照程序规定做好检验工作，不段提高自身素质和技术水平，为临床和患者提供准确、可靠的诊断依

关于临床PCR实验室的建设陕西区 技术支持 潘长浩

手机：15991279010 邮箱：15991279010@

本版权归中山大学达安基因股份有限公司所有

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临床基因扩增检验实验室的设计要求依据中华人民共和国卫生部卫医发[2002 ]10 号 《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》 卫生部办公厅关于印发[2010 ]194 号 《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》

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内容提要一、硬件要求： ①分区 ②设备二、软件要求：

①SOP文件 ②实验室工作开展

三、实验室的认证

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临床PCR实验室的分区试剂储存和准备

标本制备区扩增区 产物分析区本版权归中山大学达安基因股份有限公司所有

临床PCR实验室设计的一般原则 各区独立 注意方向 因地制宜 方便工作

“十六字口诀”

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理想的PCR实验室分区设计模式

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PCR实验室各区的设备配置表分区器材选配

PCR① 试剂区

PCR② 制备区

PCR③ 扩增区√★

PCR④ 分析区

PCR仪器 生物安

科目：健康评估

题型：单选题 章节：第七章 常用实验室检查 第一节 常用血液检查 难度系数 1 1．健康成年男性红细胞数是 A．3.5～4.0×1012

/L B．4.0～4.5×1012

/L C．4.5～5.0×1012

/L D．4.0～5.5×1012

/L E．3.5～5.0×1012/L 2．健康成年女性红细胞数是 A．3.5～5.0×1012/L B．4.0～4.5×1012/L C．4.5～5.0×1012/L D．4.0～5.5×1012

/L E．3.5～4.0×1012

/L 3．血液中白细胞分属百分率最高的是 A．淋巴细胞 B．单核细胞 C．嗜碱性粒细胞 D．中性粒细胞 E．嗜酸性粒细胞 4．血液中白细胞分属百分率最低的是 A．嗜酸性粒细胞 B．嗜碱性粒细胞 C．中性粒细胞 D．淋巴细胞 E．单核细胞 5．红细胞及血红蛋白增多最显著的是 A．新生儿 B．高原生活 C．剧烈的体力活动 D．严重的心肺疾患 E．真性红细胞增多症 6．可导致红细胞相对增多的情况是 A．高原生活 B．严重的肺气肿 C．新生儿

关于临床PCR实验室的建设陕西区 技术支持 潘长浩

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临床基因扩增检验实验室的设计要求依据中华人民共和国卫生部卫医发[2002 ]10 号 《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》 卫生部办公厅关于印发[2010 ]194 号 《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》

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内容提要一、硬件要求： ①分区 ②设备二、软件要求：

①SOP文件 ②实验室工作开展

三、实验室的认证

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临床PCR实验室的分区试剂储存和准备

标本制备区扩增区 产物分析区本版权归中山大学达安基因股份有限公司所有

临床PCR实验室设计的一般原则 各区独立 注意方向 因地制宜 方便工作

“十六字口诀”

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理想的PCR实验室分区设计模式

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PCR实验室各区的设备配置表分区器材选配

PCR① 试剂区

PCR② 制备区

PCR③ 扩增区√★

PCR④ 分析区

PCR仪器 生物安

一、PCR实验室基本配置

1．主体结构：

主体为彩钢板、铝合金型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝，从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。结构牢固，线条简明，美观大方，密封性好。

2．标准的三区分隔和气压调节：

将PCR过程分成试剂准备、标本制备和PCR扩增检测三个独立的实验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个独立实验区设置有缓冲区，同时各区通过气压调节，使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。

可打开缓冲区Ⅰ，缓冲区Ⅱ和PCR 扩增区的排风扇往外排气，在实验区的外墙上和各扇门上都安装有风量可调的回风口，空气通过回风口向室内换气。

3．机械连锁不锈钢传递窗：

试剂和标本通过机械连锁不锈钢（不建议使用电子连锁方式）传递窗传递，保证试剂和标本在传递过程中不受污染（人物分流）。

4．消毒：

在三个实验区和三个缓冲区顶部以及传送窗内部安装有紫外灯，供消毒用。

在试剂准备区和标本制备区还设置移动紫外线灯，对实验桌进行局部消毒。

5．照明

灯具要选用净化灯具，能达到便于清洗、不积尘的特点。

标准的PCR实验室建设的过程中应注意：

①严格按照规范科学设计的安装流程。

②规范的安装流程和全面的服务流程。

③安装前需要确定以下安装条件，

一、血液检查：

（一）红细胞计数和血红蛋白测定

红细胞：男（ 4.0~5.5 ）×10 12 /L血红蛋白：男120~160g/L

女（ 3.5~5.0 ）×10 12/L女110~150g/L

新生儿（ 6.0~7.0 ）×10 12 /L新生儿170~200/L

临床意义：

1.红细胞及血红蛋白减少：婴幼儿、 15 岁以前的儿童、部分老年人、妊娠中晚期；各种原因所致的贫血。

2.红细胞及血红蛋白增多：剧烈呕吐、大面积烧伤后；高原、剧

烈运动；阻塞性肺气肿、发绀型先天心脏病及红细胞增多症等。（二）白细胞计数及白细胞分类计数

白细胞：成人（ 4~10 ）×10 9/L ；新生儿（ 15~20 ）×10 9/L；6 个月~2 岁（ 11~12 ）×10 9/L。

白细胞分类计数：类型 /百分数 /绝对值

1. 中性粒细胞（ N ）：①杆状核（ st ）：0~5 0.04~0.05

②分叶核（ sg ）：50~70 2~7

2. 嗜酸性粒细胞（ E）： 0.5~5 0.05~0.5

3. 嗜碱性粒细胞（ B）： 0~1 0~0.1

4. 淋巴细胞（ L）：20~40 0.8~4

5.单核细胞（ M）：3~80.12~0.8

临床意义：

①白细胞计数增多与减少主要受中性粒

一、PCR实验室基本配置

1．主体结构：

主体为彩钢板、铝合金型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝，从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。结构牢固，线条简明，美观大方，密封性好。

2．标准的三区分隔和气压调节：

将PCR过程分成试剂准备、标本制备和PCR扩增检测三个独立的实验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个独立实验区设置有缓冲区，同时各区通过气压调节，使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。

可打开缓冲区Ⅰ，缓冲区Ⅱ和PCR 扩增区的排风扇往外排气，在实验区的外墙上和各扇门上都安装有风量可调的回风口，空气通过回风口向室内换气。

3．机械连锁不锈钢传递窗：

试剂和标本通过机械连锁不锈钢（不建议使用电子连锁方式）传递窗传递，保证试剂和标本在传递过程中不受污染（人物分流）。

4．消毒：

在三个实验区和三个缓冲区顶部以及传送窗内部安装有紫外灯，供消毒用。

在试剂准备区和标本制备区还设置移动紫外线灯，对实验桌进行局部消毒。

5．照明

灯具要选用净化灯具，能达到便于清洗、不积尘的特点。

标准的PCR实验室建设的过程中应注意：

①严格按照规范科学设计的安装流程。

②规范的安装流程和全面的服务流程。

③安装前需要确定以下安装条件，

肾脏病常用的实验室检查

实验室检查的临床意义面对一张实验室检查结果，需要回答 的问题 结果是否正常 有何临床意义 为什么选择这个检查 哪些因素影响检查结果敏感性和特异性

实验室检查的临床意义 诊断意义 –病因诊断 –定性诊断 –定位诊断 –功能诊断 指导治疗 评估预后

肾单位结构及功能肾小体 肾球囊 肾小球 滤过功能

肾单位 曲部 近端小管 直部 肾小管细段 远端小管 直部 髓襻 远 端 肾 单 位

重吸收：2/3 水 电介质 小分子蛋白 葡萄糖 氨基酸 排泌：蛋白、尿酶逆流倍增：尿液浓缩 重吸收：少量水、钠 调节体液和酸碱平衡

曲部集合管

肾脏的生理功能生成尿液 水、代谢产物、废物 保持机体内环境稳定 调节细胞外液量 调节细胞外液渗透浓度 调节酸碱平衡肾小球滤过 肾小管重吸收、排泌

内分泌功能 分泌激素 :肾素 肾素-血管紧张素-醛固酮系统 前列腺素族 红细胞生成素 降解部分内分泌激素 作为肾外激素的靶器官

肾脏的解剖和生理功能 肾小球–滤过血浆，生成原尿

肾小管–重吸收：氨基酸、蛋白、碳酸氢根、钠、 钾、水、葡萄糖等 –排泌：氢、钾、氨、药物、毒物等 –浓缩稀释功能

肾血管–充分的血流量，保证肾脏的正常功能

肾脏疾病的实验室检查 尿

中小学实验室规范化管理和应用检查评估细则

目项内 容账 管理目

分值标

准

评说分

得分明

注说备

明

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、学有仪校器装备经费账和数量细明；账、2验室实有仪实器物细明； 账项每 2 ,分每一缺项或工不到作扣位 1分 。3、每 进行仪器核年对做，账到签、物、符。相1 每、学期验室实有工作划(实验计教计学划、备装计划)2;建立、 完整的实验案，使用档全统市一制印的各实验种器记载仪(册)单并分科 分年级存完保；3、整建实立教研成验档案果实(验论文、自制教 、具“五小发”(制作明参加及)奖获况情。4、)仪设备器使用说明书 分科分、保存类完。 整市直乡镇及心中校学中有初2 以名，小学有 上1名 以上人专管理其 它学校， 有1名 上专人以或兼职人员管理 具有一定。专业素的，参质加过习学培能胜训任本工作。 1职有、校领导分学实管验学工作，教有听课并记录2;学、校教学作 计划中有对工实教验的学要；3、实验人员劳保福求利工作，及职量解 称决好 1。有、学实期教学计验划；、有2验实备课内。容 1按教、材定规的实验数 100开齐%种各演实示；验、2要实验求功达成 到 90%上。

以 、 四验 实室管 理

案档资、料管 理

不4合要符一项扣 1求分 。人员

量 数素质领导 师教演