高效液相法维生素C的测定

实验六高效液相色谱法分离和测定α-ＶE

一、实验目的

1. 了解高效液相色谱仪的基本结构，掌握液相色谱仪的基本操作方法。 2. 掌握液相色谱分析的定性及外标定量方法。

二、原理

1. 高效液相色谱的特点

高压泵输送流动相，梯度洗脱，可在柱后直接检测流出液成分，通过改变溶剂极性或强度进而改变色谱柱效能，分离选择性和组分的容量因子，实现改善色谱系统分离度的目的。

2. 高效液相色谱仪

(1) 高压输液系统，是提供足够恒定的高压，使流动相以稳定的流量快速渗透通过固定相。

(2) 进样系统，一般采用旋转式六通阀在高压下进样。 (3) 分离系统，在液相色谱柱中完成。

(4) 检测系统，液相色谱常见检测器有：紫外光度检测器，示差折光检测器、荧光检测器电化学检测器。

3. 高效液相色谱的类型

根据固定相和分离机理的不同，高效液相色谱如下几种类型

(1) 液—固吸附色谱：基于各组分在固体吸附剂表面上具有不同吸附能力而进行分离。 (2) 液—液分配色谱：组分在两相间经过反复多次分配各组分间产生差速迁移，从而实现分离。

(3) 化学键合相色谱：通过共价键将有机固定液结合到硅胶载体表面得到各种性能的固定相。

(4) 离子交换色谱：离子交换树脂上可电离的离子与流

橙子中维生素C含量的测定

——直接碘量法 吉林大学化学学院

2013.6.7

前言

维生素C ，无色晶体，分子式C6H8O6，分子量为176.13，纯品为白色结晶或结晶性粉末，无臭、味酸，久置颜色渐变微黄，水溶液呈酸性，易溶于水中，能溶于乙醇中，而不溶于氯仿或乙醚中，熔点为190~192℃，熔融时同时分解。 维生素C又名抗坏血酸，是一种重要的水溶性维生素。它与人体的多种代谢有关，可降低毛细血管通透性、降低血脂、增强机体的抵抗能力，并有一定的解毒功能和抗组胺作用。人体不能合成及贮存维生素C，故必需从外界摄取。维生素C在自然界分布很广，主要存在于植物性食物的果实、浆果和蔬菜中。不同的水果、蔬菜中维生素C 的含量不同。测定果蔬中维生素的含量对评定其营养具有重要的意义。对于其含量测定，本实验采用直接碘量法，该方法简便、快速、较为准确。其化学式为C6H8O6，相对分子质量为176.1。由于分子中的烯二醇基

具有还原性，能被I2定量地氧化成二酮基。

由于抗坏血酸具有较强的还原性，在空气中极易被氧化而变成黄色，尤其是在碱性介质中更甚，测定时加入HAc使溶液呈弱酸性，减少维生素C的副反应。 直接碘量法：加入淀粉做指示剂，然后用标定好的已知浓度的I2与抗坏血酸反应

维生素C注射液的制备 ***

（广西中医学院赛恩斯新医药学院08药学，200831***，南宁，530200）

摘要：目的 掌握注射剂（小针）的生产工艺流程和操作要点；掌握延缓药物氧化分解的基本方法。方法 维生素C在潮湿状态或者溶液中下容易被氧化，而使药效降低，因此可以加入抗氧化剂;有些溶液中的金属离子在维生素C被氧化的过程中起到催化作用，因此可以加入配合剂将金属离子配合，防止金属离子起到催化作用；溶液的pH也会影响到维生素C的氧化，在pH为5.0 ~ 7.0时，维生素C最稳定，所以可以加入碳酸氢钠调节pH。为了尽量避免微生物污染，对灌封等关键的操作步骤，生产上多采用层流洁净空气技术，局部灌封处达100级。结果 维生素C注射液本为无色透明液体，但由于实验药品被严重氧化，制得的维生素C为橙黄色。本品为维生素类药，参与机体的新陈代谢，增加机体的抵抗力，用于防治坏血病，促进创伤及骨折愈合，预防冠心病。结论 维生素C经过经过抗氧化处理和无菌处理后能制得保质期较长的维生素C注射液。 本文就该维生素C注射液的制备及改进方法作出了系统的报告如下。 关键词 维生素C注射液;药物氧化分解;处方设计仪器与材料 1.1 仪器

烧杯，两瓶，电

维生素C注射液的制备 ***

（广西中医学院赛恩斯新医药学院08药学，200831***，南宁，530200）

摘要：目的 掌握注射剂（小针）的生产工艺流程和操作要点；掌握延缓药物氧化分解的基本方法。方法 维生素C在潮湿状态或者溶液中下容易被氧化，而使药效降低，因此可以加入抗氧化剂;有些溶液中的金属离子在维生素C被氧化的过程中起到催化作用，因此可以加入配合剂将金属离子配合，防止金属离子起到催化作用；溶液的pH也会影响到维生素C的氧化，在pH为5.0 ~ 7.0时，维生素C最稳定，所以可以加入碳酸氢钠调节pH。为了尽量避免微生物污染，对灌封等关键的操作步骤，生产上多采用层流洁净空气技术，局部灌封处达100级。结果 维生素C注射液本为无色透明液体，但由于实验药品被严重氧化，制得的维生素C为橙黄色。本品为维生素类药，参与机体的新陈代谢，增加机体的抵抗力，用于防治坏血病，促进创伤及骨折愈合，预防冠心病。结论 维生素C经过经过抗氧化处理和无菌处理后能制得保质期较长的维生素C注射液。 本文就该维生素C注射液的制备及改进方法作出了系统的报告如下。 关键词 维生素C注射液;药物氧化分解;处方设计仪器与材料 1.1 仪器

烧杯，两瓶，电

橙子中维生素C含量的测定

——直接碘量法 吉林大学化学学院

2013.6.7

前言

维生素C ，无色晶体，分子式C6H8O6，分子量为176.13，纯品为白色结晶或结晶性粉末，无臭、味酸，久置颜色渐变微黄，水溶液呈酸性，易溶于水中，能溶于乙醇中，而不溶于氯仿或乙醚中，熔点为190~192℃，熔融时同时分解。 维生素C又名抗坏血酸，是一种重要的水溶性维生素。它与人体的多种代谢有关，可降低毛细血管通透性、降低血脂、增强机体的抵抗能力，并有一定的解毒功能和抗组胺作用。人体不能合成及贮存维生素C，故必需从外界摄取。维生素C在自然界分布很广，主要存在于植物性食物的果实、浆果和蔬菜中。不同的水果、蔬菜中维生素C 的含量不同。测定果蔬中维生素的含量对评定其营养具有重要的意义。对于其含量测定，本实验采用直接碘量法，该方法简便、快速、较为准确。其化学式为C6H8O6，相对分子质量为176.1。由于分子中的烯二醇基

具有还原性，能被I2定量地氧化成二酮基。

由于抗坏血酸具有较强的还原性，在空气中极易被氧化而变成黄色，尤其是在碱性介质中更甚，测定时加入HAc使溶液呈弱酸性，减少维生素C的副反应。 直接碘量法：加入淀粉做指示剂，然后用标定好的已知浓度的I2与抗坏血酸反应

实验十：果蔬中维生素C的测定（2，6—二氯靛酚滴定法）

教学目的要求 基本知识点

1、了解从果蔬中提取VC的方法。

2、掌握2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的原理、基本过程和操

作关键。

3、熟练采样、样品处理、称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。 4、掌数据处理和结果计算技术。 重点 2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的基本过程和操作关键。 难点

2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的原理 课时教学方案： 复习与提问：

1、2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的原理。

2、2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的基本过程和操作关键。 3、检查学生实验准备情况。 【引入新课】

VC在人体内的主要功能是：参加体内的氧化还原过程，促进人体的生长发育，增强人体对疾病的抵抗能力，促进细胞间质中胶原的形成，维持牙齿、骨骼、血管和肌肉的正常功能，增强肝脏的解毒能力。当人体中缺少VC时，就会出现牙龈出血、牙齿松动、骨骼脆弱、粘膜及皮下易出血、伤口不易愈合等症状。近年来，科学家们还发现，VC能阻止亚硝酸盐和仲胺在胃内结合成致癌物质—亚脱胺，从而减低癌的发病率。

据测定，成年男子每天约需VC 65 mg，成年女子每天约需VC 60 mg。 VC广泛存在

抗坏血酸（维生素C）的测定方法（1）

在测定维生素C的国标方法中，荧光法为测定食物中维生素C含量的第一标准方法，2、4－二硝基苯肼法作为第二法。 一、荧光法 1．原理

样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。

脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。本方法的最小检出限为0.022 g/ml。 2．适用范围

GB12392-90 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定 3．仪器

3．1．实验室常用设备。

3．2．荧光分光光度计或具有350nm及430nm波长的荧光计。 3．3．打碎机。 4．试剂

本实验用水均为蒸馏水，试剂不加说明均为分析纯试剂。

（1）偏磷酸－乙酸液：称取15g偏磷酸，加入40ml冰乙酸及250ml水，搅拌，放置过夜使之逐渐溶解，加水至500ml。4℃冰箱可保存7～10天。

（2）0.15 mol/L硫酸：取10ml硫酸，小心加入水中，

化学化工学院

抗坏血酸药品中维生素C含量的测定

一、实验目的

1.掌握碘标准溶液的配制注意事项；

2.通过维生素C的测定了解直接碘量法和间接碘量法的过程； 3.掌握碘量法测定抗坏血酸药品中维生素C含量的原理和方法。 二、实验用品 1.仪器

全自动分析天平；台秤；碘量瓶；玻璃棒；洗瓶；试剂瓶；烧杯；酸式滴定管；量筒；胶头滴管；容量瓶；移液管；洗耳球。 2.试剂

0.017mol?L-1K2Cr2O7标准溶液；KI(s)、KINa2S2O3?5H2O分析纯，I2分析纯；

-1-1（溶液100g?L，使用前配制；淀粉指示剂5g?L；Na2CO；HCl溶液6mol?L；败3s）坏血酸片。

三、实验原理

抗坏血酸又名维生素C，分子式C6H8O6。由于分子中的烯二醇基具有还原性，能被I2定量地氧化成二酮基，其反应式为：

-1

碱性条件下可使反应向右进行完全，但因维生素C还原性很强，在碱性溶液中尤其易被空气氧化，在酸性介质中较为稳定，故反应应在稀酸（如稀乙酸、稀硫酸或偏磷酸）溶液中进行，并在样品溶于稀酸后，立即用碘标准溶液进行滴定。根据滴定消耗的I2标准溶液的体积，便可计算出抗坏血酸药品中维生素C的含量。

CI2VI

HPLC法测定果蔬中维生素C

摘要通过高效液相色谱法和国标法2种方法测定了果蔬中的维生素C，通过精密度、准确度、回收率等方法对比结果表明：液相色谱法是一种高效、快速、准确、高灵敏度的分离分析方法。

AbstractIn this paper，high performance liquid chromatography and national standard method were used to determine VC in fruits and vegetables. Through the precision， accuracy，recovery methods，etc.，such as comparative results showed that liquid chromatography was an efficient，fast，accurate and high sensitivity separation analysis method.

Key wordsHPLC method；fruits and vegetables；vitamin C；determination

维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，它能

1、 每天吃一片维生素C和维生素E，可达到祛斑的作用。

2、用干净的茄子皮敷脸，一段时间后，小斑点就不那么明显。

3、每天喝一杯西红柿汁或常用西红柿，对防止祛斑有较好的作用。因为西红柿中含有丰富的谷胱甘肽，谷胱甘肽可抑制黑色素，从而使沉着的色素减退或消失。 4、洗脸时，在水中加1-2汤匙的食醋，有减轻色素沉着的作用。

5、将鲜萝卜打碎挤汁，取10-30毫升，每日晚上洗完脸后涂抹，待干后，洗净。此外，每日喝一杯胡萝卜汁，可美白肌肤。

2、

自制淡斑面膜

据说这种面膜是印度一位王妃发明的，可净化、滋润肌肤，使肌肤变得白皙透明、柔软细致。 所需材料：蜂蜜15毫升，鸡蛋一个，脱脂牛奶50毫升，柠檬汁一茶匙，面粉少许。 自制方法：制作方法很简单，就是先在面粉中加入鸡蛋，搅拌均匀，后加入牛奶、蜂蜜以及柠檬汁再次搅拌即可。

使用方法：均匀涂于脸上，15分钟后先以温水冲洗干净，再用冷水洗脸。温水、冷水可反复交替数次，这样更有助于收缩毛孔。

面膜功效：能有效祛除皮肤上的黄斑，使皮肤润泽光滑。

注意事项：本款自制面膜适合油性皮肤使用，由于制作方法容易方便，每次最好少做一点，即用即做。

3、 自制中药淡斑面膜

配方：当归、桃仁、丹参、白芷、白附子、白及各等量，玫