细胞培养基质量标准及检验方法

欢迎阅读细胞培养基质量标准及检验方法

中国医药生物技术协会

二0一一年四月

编写说明

一、根据中国医药生物技术协会2010年9月20日组织召开的《动物细胞培养基生产管理

称取每升标示量的实验室样品，置于1000ml烧杯中，加水950ml，搅拌至溶解，补加水至1000ml,搅拌均匀。按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅤA进行。

2.3干燥减量的测定

按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅦL干燥失重测定法进行。

2.4渗透压的测定

欢迎阅读

称取每升标示量的实验室样品，置于1000ml烧杯中，加水950ml，搅拌至溶解，补加水至1000ml,搅拌均匀。按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅤH渗透压摩尔浓度测定法进行。

取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果，两次平行测定结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的5%。

2.5细菌内毒素的测定

按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅫE细菌内毒素检查法中的凝胶法进行。

2.6

2.7

2.7.1

72h，养

；

，混

150代。

4)细胞培养液：按产品使用说明书要求配制；

3)胰蛋白酶溶液：称取胰蛋白酶（1:250）2.5g，精确至0.01g，加1000ml平衡盐溶液，混匀、测pH值，用1mol/LNaOH或1mol/L

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中国医药生物技术协会

二0一一年四月

编写说明

一、根据中国医药生物技术协会2010年9月20日组织召开的《动物细胞培养基生产管理

称取每升标示量的实验室样品，置于1000ml烧杯中，加水950ml，搅拌至溶解，补加水至1000ml,搅拌均匀。按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅤA进行。

2.3干燥减量的测定

按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅦL干燥失重测定法进行。

2.4渗透压的测定

欢迎阅读

称取每升标示量的实验室样品，置于1000ml烧杯中，加水950ml，搅拌至溶解，补加水至1000ml,搅拌均匀。按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅤH渗透压摩尔浓度测定法进行。

取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果，两次平行测定结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的5%。

2.5细菌内毒素的测定

按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅫE细菌内毒素检查法中的凝胶法进行。

2.6

2.7

2.7.1

72h，养

；

，混

150代。

4)细胞培养液：按产品使用说明书要求配制；

3)胰蛋白酶溶液：称取胰蛋白酶（1:250）2.5g，精确至0.01g，加1000ml平衡盐溶液，混匀、测pH值，用1mol/LNaOH或1mol/L

植物细胞后含物及检验方法

细胞在生活过程中产生的各种无生命的物质,统称为细胞后含物。细胞后含物种类很多，有些是具有营养价值的贮藏物，是人类食物的主要来源，有些是细胞的废物，包括糖类、蛋白质、脂质、无机盐和其它有机物。这些物质有的存在于原生质中，有的存在于细胞壁上。

一、储藏的营养物质

（一）淀粉

细胞后含物中最普遍的贮藏形式是淀粉，而淀粉是葡萄糖分子聚合而成的高分子化合物，在细胞中以颗粒状存在，称为淀粉粒。

淀粉由质体合成，当淀粉在白色体内形成时，由一个中心开始，从内层向外层沉积，这一中心便成为淀粉粒的脐点。由于淀粉粒的沉积时，直链淀粉（葡萄糖分子成直线排列）和支链淀粉（葡萄糖分子成分支状排列）相互交替地分层沉积的缘故，直链淀粉较支链淀粉有较强的亲水性，显现出折光性的不同，因此在显微镜下可以看到围绕脐点有许多明暗相间的轮纹淀粉。

淀粉粒在形态上有三种类型：单粒淀粉粒，只有一个脐点，无数轮纹围绕这个脐点；复粒淀粉粒，具有两个以上的脐点，各个脐点都有自己的轮纹；半复粒淀粉粒，具有两个以上的脐点，每个脐点除了本身的轮纹环绕外还包围着共有的轮纹。

鉴定方法：淀粉具有遇碘变蓝的特性，这是由淀粉本身的结构特点决定的。淀粉是白色无定形的粉末，由10%～30%的直链淀粉和

AEP对LPS诱导的Raw264.7细胞炎症模型抗炎实验

一、试剂与仪器 （一）细胞系 RAW264.7。 （二）试剂 胎牛血清

DMEM HyClone，美国 10000 U/mL 青霉素/链霉素Gibco，美国

DMSO Sigma，美国 lipopolsaccharide Sigma，美国 甲基四唑蓝(MTT) Sigma，美国 对氨基苯磺酸 Sigma，美国 N-α-萘乙二胺 Sigma，美国 （三）仪器 超净台 酶标仪

CO2恒温细胞培养箱 显微镜 离心机

（四）供试品配置

LPS 溶液配置：称取 LPS 粉末 5 mg，溶于 1 mL DMSO 中，得 5 mg/mL 母液。用时将母液用培养基稀释至 2 μg/mL（DMSO＜0.1%）。

MTT 溶液配置：称取 MTT 50 mg，溶于 10 mL PBS

你还在为没有做过细胞培养实验而烦恼吗？你还在为做细胞实验而痛苦吗？看了这个《细胞培养的有关名词及其概念》相信一定会释疑我的烦恼

细胞培养的有关名词及其概念

1．原代培养（primary culture）

直接从有机体中取出的细胞、组织或器官开始进行体外培养直到第一次传代为止。这种培养称之为原代培养。

2．传代培养（subculture）

细胞从一个培养皿以1：2或1：2以上的比率转移或移植到另一个器皿的培养，这种培养称之为传代培养。

3． 悬浮培养（suspension culture）

细胞培养的一种类型。培养时通过一特殊的装置，使细胞瓶按一定的速度不断地转动，使细胞始终处于悬浮状态中进行增殖。

4．克隆（clone）

克隆指的是从一个细胞靠有丝分裂获得的一个细胞群体（population）。

5．细胞系（cell line）

在第二届细胞和组织培养专题讨论会上提出细胞系的概念为“原代培养物经首次传代成功后即成为细胞系，由原先存在于原代培养物中的细胞世系（lineages of cells）所组成。如果不能继续传代或传代数有限，可称有限细胞系（finite cell line），如果可以连续传代，则可称为连续细胞系（continous cell line）。以

普通混凝土用砂石质量及检验方法标准

普通混凝土用砂、 普通混凝土用砂、石质量 及检验方法标准 JGJ52-2006

普通混凝土用砂石质量及检验方法标准

普通混凝土用砂、 普通混凝土用砂、石质量及检验方法标准

前言 总则 砂的质量要求 石的质量要求 验收、运输和堆放 取样和缩分

普通混凝土用砂石质量及检验方法标准

定义

砂

人工砂

岩石经除土破损、机械破碎、筛分 而成的，公称直径小于5.00mm 的岩石颗粒。

天然砂

由自然条件作用而形成，公称直径 小于5.00mm的岩石颗粒。

混合砂

由天然砂和人工砂按一 定比例组合而成的砂

河砂

海砂

山砂

普通混凝土用砂石质量及检验方法标准

定义

石

碎石

由天然岩石或卵石经破碎、筛分 而得的，公称粒径大于5.00mm 的岩石颗粒。

卵石

由自然条件形成的，公称直径大于 5.00mm的岩石颗粒。

普通混凝土用砂石质量及检验方法标准

（JGJ52-2006）标准介绍 ）

普通混凝土中的砂石用量约占混凝土总重量的四 分之三，因此砂石的质量对混凝土来说相当重要， 它不仅影响混凝土的强度，也大大影响混凝土的 耐久性和结构性能。 1979年建设部颁布了我国第一部砂石标准 （JGJ52-79，JGJ53-79），以后水电、交通、 港口等部门陆续在有关标准规范中针对各行

普通混凝土用砂石质量及检验方法标准

普通混凝土用砂、 普通混凝土用砂、石质量 及检验方法标准 JGJ52-2006

普通混凝土用砂石质量及检验方法标准

普通混凝土用砂、 普通混凝土用砂、石质量及检验方法标准

前言 总则 砂的质量要求 石的质量要求 验收、运输和堆放 取样和缩分

普通混凝土用砂石质量及检验方法标准

定义

砂

人工砂

岩石经除土破损、机械破碎、筛分 而成的，公称直径小于5.00mm 的岩石颗粒。

天然砂

由自然条件作用而形成，公称直径 小于5.00mm的岩石颗粒。

混合砂

由天然砂和人工砂按一 定比例组合而成的砂

河砂

海砂

山砂

普通混凝土用砂石质量及检验方法标准

定义

石

碎石

由天然岩石或卵石经破碎、筛分 而得的，公称粒径大于5.00mm 的岩石颗粒。

卵石

由自然条件形成的，公称直径大于 5.00mm的岩石颗粒。

普通混凝土用砂石质量及检验方法标准

（JGJ52-2006）标准介绍 ）

普通混凝土中的砂石用量约占混凝土总重量的四 分之三，因此砂石的质量对混凝土来说相当重要， 它不仅影响混凝土的强度，也大大影响混凝土的 耐久性和结构性能。 1979年建设部颁布了我国第一部砂石标准 （JGJ52-79，JGJ53-79），以后水电、交通、 港口等部门陆续在有关标准规范中针对各行

普通混凝土用砂石质量及检验方法标准

普通混凝土用砂、 普通混凝土用砂、石质量 及检验方法标准 JGJ52-2006

石家庄 2008.12

普通混凝土用砂石质量及检验方法标准

普通混凝土用砂、 普通混凝土用砂、石质量及检验方法标准前言 总则 砂质量要求 验收、运输和堆放 取样和缩分 砂检验方法 砂的检验报告

普通混凝土用砂石质量及检验方法标准

(JGJ52-2006)标准介绍 )普通混凝土中的砂的用量约占混凝土总重量的四 分之三，因此砂石的质量对混凝土来说相当重要， 它不仅影响混凝土的强度，也大大影响混凝土的 耐久性和结构性能。 1979年建设部颁布了我国第一部砂石标准 (JGJ52-79,JGJ53-79),以后水电、交通、 港口等部门陆续在有关标准规范中针对各行业特 点制定了相应的标准。

普通混凝土用砂石质量及检验方法标准

(JGJ52-2006)标准介绍 )1992年在原标准的基础上进行修订形成了 (JGJ52-92,JGJ53-92)标准。 2006年总结了92标准实施以来的实践经验，进 行了大量的调查研究科学试验，广泛地吸取了国 内外科研成果，并积极借鉴国际标准及国外先进 标准，将(JGJ52-79,JGJ53-79)合二为一， 形成新标准JGJ5

表5.26.18 电缆头制作、接线和线路绝缘测试质量标准和检验方法

类别 序号 1 主 控 项 目 4 电线、电缆接线 3 铠装电力电缆头的接地线 应采用铜绞线或镀锡铜编织线，截面积不应小于现行标准的规定 必须准确，并联运行电线或电缆的型号、规格、长度、相位应一致 2 检查项目 高压电力电缆直流耐压试验 低压电线和电缆绝缘电阻值测试 质量标准 单位 检验方法及器具 必须符合现行标准的规定，交接试验合格 查阅试验记录 检查测试记录低压电线和电缆，线间和线对地间的绝缘电阻值必须大于0.5M? 或用适配仪表进行抽测 观察检查 观察检查 一 般 项 目 1 （1）截面积在10mm2及以下的单股铜芯线和单股铝芯线直接与设备、器具的端子连接。 （2）截面积在2.5mm2及以下的多股铜芯线拧紧搪锡或接续端子后与设备、器具的端子连接。 芯线与电器设备的连接 （3）截面积大于2.5mm2的多股铜芯线，除设备自带 插接式端子外，接续端子后与设备或器具的端子连接；多股铜芯线与插接式端子连接前，端部拧紧搪锡。 （4）多股铝芯线接续端子后与设备、器具的端子连接。 （5）每个设备和器具的端子接线不多于2 根电线 电线、电缆的芯线连接金具（连接管和端子） 电线、

实验室sop

Car-T细胞培养标准操作流程

1 目的：保证Car-T细胞制备和培养符合要求。

2 范围：适用于符合实验的要求患者外周血制备和培养

3 责任人：实验员人、临床相关人员。

4 内容

4.1耗材：50ml离心管，10ml移液管，5ml移液管，75cm2培养瓶，150 cm2培养瓶，EP管，1.8ml冻存管

4.2试剂：X-VIVO 15TM，PBS缓冲液，75%医用酒精，人淋巴细胞分离液，CD3/CD28免疫磁珠，IL-2，注射用人血白蛋白。

4.3环境：

4.3.1外周血分离，培养应在恒温恒湿的万级层流室内进行，开放操作必须在百级生物安全柜内进行。

4.3.2实验人员应提前对净化室和生物安全柜进行杀菌消毒，紫外线照射时间 不少于30min，消毒消毒后，净化空调开启时间不少于30min，生物安全柜运行稳定后方可操作。

4.4操作：

4.4.1采集接收外周血

4.4.1.1患者符合治疗方案，各项检测符合要求，采集患者外周血60-80ml。

4.4.1.2接收外周血并填写《外周血采集交接记录》，核对外周血患者相关信息，及相应检测报告，报告由医院提供，至少包括：HBsAg，HCVAb，HIVAb，Anti-TP，ALT。

4.4.2操作前准备

4.4.2.1净化室，生