细胞克隆形成实验加药

细胞克隆形成实验

当单个细胞在体外增殖6代以上，其后代所组成的细胞群体，成为集落或克隆。每个克隆含有50以上的细胞，大小在0.3-1.0mm之间。集落形成率表示细胞的独立生存能力。各种理化因素可能导致细胞的克隆形成能力发生改变。通过一定的实验方法可以对细胞的克隆形成能力进行检测。

细胞接种存活率只表示接种细胞后贴壁的细胞数，但贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆。而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。由于细胞生物学性状不同，细胞克隆形成率差别也很大：

一般初代培养细胞克隆形成率弱，传代细胞系强；二倍体细胞克隆形成率弱，转化细胞系强；正常细胞克隆形成率弱，肿瘤细胞强。

实验方法：

平板集落形成实验、软琼脂集落形成实验

(a) 平板集落形成实验：本法适用于贴壁生长的细胞和正常培养的细胞

(b) 软琼脂集落形成实验：本法适用于非锚着依赖性生长的细胞，如骨髓造血干细胞、肿瘤细胞株、转化细胞系。

平板克隆形成实验基本步骤：

1、取对数生长期的各组细胞，分别用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞，并把细胞悬浮在10%胎牛血清的DMEM培养液中备用。

2、将细胞悬液作梯度倍数稀

细胞克隆形成实验

当单个细胞在体外增殖6代以上，其后代所组成的细胞群体，成为集落或克隆。每个克隆含有50以上的细胞，大小在0.3-1.0mm之间。集落形成率表示细胞的独立生存能力。各种理化因素可能导致细胞的克隆形成能力发生改变。通过一定的实验方法可以对细胞的克隆形成能力进行检测。

细胞接种存活率只表示接种细胞后贴壁的细胞数，但贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆。而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。由于细胞生物学性状不同，细胞克隆形成率差别也很大：

一般初代培养细胞克隆形成率弱，传代细胞系强；二倍体细胞克隆形成率弱，转化细胞系强；正常细胞克隆形成率弱，肿瘤细胞强。

实验方法：

平板集落形成实验、软琼脂集落形成实验

(a) 平板集落形成实验：本法适用于贴壁生长的细胞和正常培养的细胞

(b) 软琼脂集落形成实验：本法适用于非锚着依赖性生长的细胞，如骨髓造血干细胞、肿瘤细胞株、转化细胞系。

平板克隆形成实验基本步骤：

1、取对数生长期的各组细胞，分别用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞，并把细胞悬浮在10%胎牛血清的DMEM培养液中备用。

2、将细胞悬液作梯度倍数稀

加药装置操作规程

1、开机前检查：

1）检查所有管道、阀门处于正常工作状态。

2）检查各加药设备的剂量泵、搅拌器处于正常工作状态。 3）检查电气设备处于正常工作状体。 2、各种药剂的配比和投加方式：

1）絮凝剂—用于二沉池和网格反应池的加药。 药剂名称：聚合氯化铝（PAC）。

配药方式：按重量浓度的10%-15%配置，即1份药9份水或1份药6份水。将药剂干粉倒入干粉加药箱，启动螺旋加药装置，同时开启进水阀门，待药剂溶解箱内水位淹没搅拌器叶轮后，启动搅拌器搅拌至均匀即可使用。

投加量：按水质指标试验后确定投加量，一般情况下按上述比例配制的药品投加量应在20-50mg/L范围内。

投加方式：用专门配置的加药装置，计量泵投加。 2）助凝剂——用于网格反应池的加药。 药剂名称：聚丙烯酰胺（PAM）。

配药方式：按重量浓度的1%-2%配置，即1份药99份水或2份药98份水。将药剂干粉倒入干粉加药箱，启动螺旋加药装置，同时开启进水阀门，待药剂溶解箱内水位淹没搅拌器叶轮后，启动搅拌器搅拌，至少搅拌1.5-2小时使其熟化后方可使用。

1

投加量：按水质指标试验后确定投加量，一般情况下按上述比例配制的药品投加量应在5-10mg/L范围内。

投加方式：用专门配置

压滤车间

1、涡轮蜗杆调整手柄未装 2、滤液水溜槽未装 3、机尾砖未砌

4、压滤机接料槽接口未焊 5、入料泵管道螺栓未紧 6、闸阀动力电缆未接 7、压风至阀管道未接 8、压风管道门板未装

9、隔膜压力表液压油及表未装 10、搅拌桶玻璃钢暂且未达到要求 11、搅拌桶减速机需注油

12、压滤机平台的网格板及栏杆未装 13、压滤机液压站未注油 30m浓缩车间 1、入料管螺栓未装完 2、650mm的管道未焊接完成 3、缓冲箱的出料管未焊死 4、液压站油管道未接 5、中间部位提升轨道未防腐 6、电机风叶罩未装 7、扭矩传感器未接

8、30m之间过桥没平台栏杆 9、入料管口焊接未防腐 10、6001止水圈漏水 11、6001无地沟盖板

12、6001泵的冷却水管道未接，设备接地线未接 13、6001泵上的摘丝太长，阀未接电源 14、6002门板漏水

15、6002泵的冷却水管道未接 16、6002按钮箱未接线

17、6001、6002六个阀上的螺栓重穿 加药车间

1、控制箱的开关未装

2、絮凝剂搅拌桶、电机未接线 3、垃圾需清理

4、无机加药桶闸阀摘丝太长

中央空调冷却水处理方案及装置

中央空调冷却系统一般是敞开式的，冷却水在冷却塔热交换时，大气中的有害酸体、生活污泥等，很容易进入到冷却系统。随着冷却水的循环，一部分进入主机的冷凝器，在空调冷却系统中蒸发浓缩的情况下，硬度往往超过400PPm，这些高浓度的碳酸钙、碳酸镁等化学垢和生活粘泥就会在温度较高的冷凝器部位沉积，致使主机制冷量严重下降。

以下就中央空调冷却水的结垢原因、结垢对系统的影响及处理方法等方面作详细阐述。

1、中央空调冷却水结垢的原因及其危害

、满负荷制冷时冷却水的消耗

、冷却水水质的影响

、我国各地天然水质情况

地区(黔、桂

外),黑、松流域

辽河流域西北地区含盐量(mg/L)＜100100-300200-500＞500

总硬度(mg/L)＜5050-150150-300＞300 pH值以上

化学组成Ca(HCO3)2

NaHCO3Ca(HCO3)2(长

江) ,东北也有

NaHCO3

Ca(HCO3)2,NaHCO3,

硫酸盐,氯化物类

(众)

硫酸盐,

氯化物类

、冷却水使用过程的变化及影响

矿物质上升能耗大

浓缩电导率上升结垢出力小 PH变化

微生物粘泥腐蚀寿命短

致病菌

吸收杂质人致病、腐蚀情况（1）——管板

腐蚀情况（2）——钢管内

、冷却水中的微生物

、冷却水结垢的危

反渗透加药系统的计算 一、有机高分子絮凝剂投加计算

1、取海德能药剂1kg，加入药箱中，往药箱中加入除盐水99L并搅拌，使药剂完全溶解，配置药剂的浓度为1%，即约每100L药液中含药剂1kg(每1L中含10g)。

2、一般投加浓度在0.2～10ppm之间。 3、加药量计算：根据投加浓度计算絮凝剂用量

絮凝剂用量=进水流量×投加浓度，例如10m3/h×3ppm(g/m3)=30g/h 4、计量泵的投加量：

30g/h÷1%=3000g/h=3kg/h(约3L/h)

5、计量泵的调节：例如泵的最大投加量为6L/h，当计量泵效率为50%时投加量为3L/h

二、杀菌剂

1、取海德能药剂0.5kg，加入药箱中，往药箱中加入除盐水999.5L并搅拌，使药剂完全溶解，配置药剂的浓度为500ppm，即约每1000L药液中含药剂0.5kg(每1L中含500mg)。

2、一般投加浓度2～10ppm之间。 三、阻垢剂

1、取海德能阻垢剂标准液10kg（其浓度为100%），加入药箱中，往药箱中加入除盐水90L并搅拌，使药剂完全溶解，配置药剂的浓度为10%，即约每100L药液中含药剂10kg(每1L中含100g)。

一般投加浓度在2

常用分子克隆实验方法I

一、植物总DNA的小量提取

方法1：提取吸附法。无须巯基乙醇、氯仿等有毒物质，产物无须Rnase处理。

(1) 充分研磨。称取约0.2克植物组织，加入液氮充分研磨3-5min，稍后加约1ml溶液

A，继续研磨至略粘稠的组织匀浆，用大口1ml吸头将所有溶液移至1.5ml离心管中，55℃水浴30min；

(2) 高速离心去杂质。10,000rpm离心5min，取约600ul上清至新1.5ml离心管； (3) 核酸吸附。往上清液中加入1倍的异丙醇，轻轻混匀，再加入总体积1/4已混匀的

溶液B，静置3min;

(4) 低速离心沉淀。5000rpm离心1min，轻轻倒掉上清，并用吸水纸轻吸离心管口，

再用移液枪吸走大部分残余液体；

(5) 75%乙醇清洗。加入1ml75%乙醇，5000rpm离心30s，轻轻倒掉上清，用吸水纸稍

吸离心管口。重复该步骤一次，再5000rpm离心30s，然后用移液枪吸走管底的残液，晾干5min；

(6) 核酸洗脱。加入约55ul TE（PH8.0）至管底，轻轻重悬硅土，静置3min，10,000rpm

离心1min，用小枪头轻轻吸取出50ul管底溶液，冷藏。

方法2：CTAB法，此为在经典方法基础上，经过摸

整个基因克隆实验规程

完整

Document serial number【KK89K-LLS98YT-SS8CB-SSUT-SST108】

一、组织总RNA 的提取

相关试剂：T rizol；氯仿；苯酚；异丙醇；75%乙醇；RNase-free水

相关仪器：制冰机；液氮&研钵/生物样品研磨仪；高速离心机；移液器（1ml、200μl、

100μl/50μl）；涡旋振荡仪；恒温金属浴。

相关耗材：解剖工具，冰盒，离心管，离心管架，吸头（1ml，200μl/300μl），一次性手套，实验手套。

实验步骤

1.取暂养草鱼，冰上放置一段时间，然后解剖，剪取肠道50~100mg，放入研钵中，加入液氮迅

速研磨，然后加入1ml 预冷TRIzol试剂，充分研磨至无颗粒物存在。

2.转移到离心管中，室温放置5min，使细胞充分裂解；

3.按1ml Trizol加入200μl氯仿，盖上盖子，迅速充分摇匀15s，然后室温放置3min；

4.4℃，,12000g 离心15min；

此时混合物分为三层，下层红色的苯酚氯仿层，中间层和上层无色水相；RNA存在于无色水相中；

5.小心吸取上清液，千万不要吸取中间界面，否则有DNA污染；转移至一个新的离心管，加入等

体积的异丙醇，轻轻混匀；

6.室温放置10

PAM加药装置结构及操作说明

潍坊山水环保机械制造有限公司

一、产品介绍

PAM加药装置是一个智能化、全自动、连续式一体化的絮凝剂溶配及投药装置，配制溶液浓度一般为0.1％-0.5％。

PAM加药装置由供水系统、干粉投加系统、溶解熟化系统、控制系统、液体投加系统构成。

本装置是粉状高分子凝絮剂的全自动连续配置及投加系统。干粉絮凝剂从螺旋推进器内进入预混器与清水进行预混，被湿润的物料进入配制槽进行稀释，按要求浓度进行配制。

配制溶液从配制槽经熟化槽再进入储存槽，当储存槽液位处于高位时，配制过程自动停止，当溶液下降到中液位时，重新自动启动配料过程。配制槽和熟化槽均设置多桨叶搅拌器，充分保证絮凝剂的稀释和熟化。

本装置采用全自动控制系统，具有自动化程度高、性能稳定、工作可靠、简单明了。

PAM加药装置由以下几部分组成：

1、供水系统

2、干粉投加系统 3、干粉预混系统

4、一体化三槽式组合箱体 5、搅拌系统 6、自动控制系统

二、PAM加药装置准备工作

电站冷却循环水系统投药

技

术

方

案

书

公司简介

经营宗旨：荟萃国内外水处理技术精华，为客户在水处理领域创造新价值。

经营理念：顺应社会发展潮流，在水处理领域开拓创新，谋求公司同仁的幸福和发展进而为社会进步贡献力量。

公司精神：诚实、简朴、乐业、精进

经营范围：1、循环冷却水系统清洗、防腐蚀、防结垢、杀菌灭藻

2、锅炉清洗，锅炉阻垢防腐化学品、离子交换树脂、水质化验

3、反渗透膜清洗、纯水设备阻垢化学品及耗材

技术水平:与南京化工学院和同济大学等国内水处理技术的重点科研单位进行交流合作引进先进技术，并邀请南京化工学院的沈鸿礼教授（全国工水处理标准起草人之一，多次获得国家级的技术进步奖），同济大学的李风亭教授（工业水处理协会副会长）为技术顾问。建立了较完备的实验室，配置了全套的反渗透清洗检测设备、实验锅炉、万分一的电子分析天平、可见光分光度计、紫外分光光度计、马福炉等完备水质化验及技术研发仪器和设备。近年来在杀菌灭藻自动化、酸性循环冷却水处理、高含油废水处理、锅炉硅垢清洗、反渗透纯水系统的在线及离线清洗、高压锅炉的十八胺停炉保护剂等方面取得重要的技术进展已达到国内领先的水平。

代理经销:为更好的服务于客户，公司代理了美国纳尔科公司的纯水处理系列产品、美国PULSAFE