普鲁卡因的小鼠ld50的测定

普鲁卡因中毒概述（普鲁卡因中毒是什么病？）：

普鲁卡因中毒是由于麻醉或静脉滴注用普鲁卡因过量所致。 普鲁卡因中毒症状体征（普鲁卡因中毒症状是什么？）：

体检注意意识、瞳孔、脉搏、呼吸、血压等变化，随时注意有无循环衰竭症状。 普鲁卡因中毒诊断检查（确诊普鲁卡因中毒需要做什么检查？）： 麻醉或静脉滴注用药过量史,结合临床表现。

普鲁卡因中毒治疗方案（普鲁卡因中毒如何治疗？）： 1.立即停止用药。

2.给予氧及5％二氧化碳混合吸入或人工呼吸。

3.氯化琥珀胆碱10～15mg缓慢静注，可控制抽搐。禁用中枢兴奋剂。

4.有严重惊厥者首先给氧人工呼吸纠正缺氧，同时选用硫喷妥钠0.5g加生理盐水25ml缓慢静注，亦可用地西泮(安定)10～20mg或阿米妥钠0.3～0.5g缓慢静注或肌注。 5.大量维生素C静滴，以加速其分解。

6.有正铁血红蛋白血症，可选用1％美蓝(亚甲蓝)25～50ml，以葡萄糖溶液稀释后缓慢静注。 7.普鲁卡因过敏性休克者：给氧，予肾上腺素或糖皮质激素。 普鲁卡因中毒预防及预后（如何预防普鲁卡因中毒？）： 使用普鲁卡因药物时注意其剂量。

普鲁卡因中毒注意事项（普鲁卡因中毒应该注意什么？）：

给予氯化琥珀控制抽搐，禁用中枢兴奋

普鲁卡因中毒概述（普鲁卡因中毒是什么病？）：

普鲁卡因中毒是由于麻醉或静脉滴注用普鲁卡因过量所致。 普鲁卡因中毒症状体征（普鲁卡因中毒症状是什么？）：

体检注意意识、瞳孔、脉搏、呼吸、血压等变化，随时注意有无循环衰竭症状。 普鲁卡因中毒诊断检查（确诊普鲁卡因中毒需要做什么检查？）： 麻醉或静脉滴注用药过量史,结合临床表现。

普鲁卡因中毒治疗方案（普鲁卡因中毒如何治疗？）： 1.立即停止用药。

2.给予氧及5％二氧化碳混合吸入或人工呼吸。

3.氯化琥珀胆碱10～15mg缓慢静注，可控制抽搐。禁用中枢兴奋剂。

4.有严重惊厥者首先给氧人工呼吸纠正缺氧，同时选用硫喷妥钠0.5g加生理盐水25ml缓慢静注，亦可用地西泮(安定)10～20mg或阿米妥钠0.3～0.5g缓慢静注或肌注。 5.大量维生素C静滴，以加速其分解。

6.有正铁血红蛋白血症，可选用1％美蓝(亚甲蓝)25～50ml，以葡萄糖溶液稀释后缓慢静注。 7.普鲁卡因过敏性休克者：给氧，予肾上腺素或糖皮质激素。 普鲁卡因中毒预防及预后（如何预防普鲁卡因中毒？）： 使用普鲁卡因药物时注意其剂量。

普鲁卡因中毒注意事项（普鲁卡因中毒应该注意什么？）：

给予氯化琥珀控制抽搐，禁用中枢兴奋

普鲁卡因半数致死量(LD50)的测定和计算

普鲁卡因半数致死量(LD50)的测定和计算

目的 通过实验了解测定药物LD50的方法、步骤和计算过程。

材料 小鼠（体重17~25克，雌雄均可，应注明性别）；鼠笼，天平，1ml注射器；2%盐酸普鲁卡因溶液，苦味酸溶液。

方法和步骤

1．探索剂量范围：取小鼠8~10只，以2只为一组，分成4~5组，选择剂量间距较大的一系列剂量，分别给各组腹腔注射盐酸普鲁卡因溶液，观察出现的症状并记录死亡数，找出引起0%及100%死亡率剂量的所在范围（致死量约在105~150mg/kg范围内）。本步骤可由实验室预先进行。

2．正式试验：在预试验所获得的0%和100%致死量的范围内，选用几个剂量（一般用5个剂量，按等比级数增减，相邻剂量之间比例为1:0.7或1:0.8），各剂量组动物数为10只，分别用苦味酸标记。动物的体重和性别要分层随机分配，完成动物分组和剂量计算后按组腹腔注射给药。最好先从中剂量组开始，以便能从最初几组动物接受药物后的反应来判断两端的剂量是否合适，否则可随时进行调整，尽可能使动物的死亡率在50%上下，死亡率为0%或100%时，不能用于计算。

实验以全班为一个单位，可以一个组观察一个剂量组(10只小鼠)，或每组各作

201—

蒿 3 年 1 1月

C h中 i n a国 C化工 h e m i c a贸 l T易 r a d e药物分析半数致死量 ( L D 5 0 )计算程序开发王维风赵延峰2 2 2 0 0 0 ) (正大天睛药业集团股份有限公司。江苏连云港

信息拭本

摘

要：基于 E a i r, S e - J a v a语言编制了L D 5 0(半数致死量)的 B l i s s法计算程序，并实现了可视化操作，给出算例进行了 L D5 0计算，并自动描半数致死量 J S P

绘回归曲线及校正曲线图，结果表明：采用该程序进行 L D 5 0的B l i s s法计算是可行的，且操作简便，能在多种操作系统下运行，可实现网络化等优点。关键词：E c i l p s e - J￣ v a语言

在药理学、微生物学、毒理学等领域中，半数致死量 ( L D5 0 )的测定方法早已广泛使用。到目前为止，L D 5 0的测定方法有几种：

4 .将各点加权 ( n w ),用 x。作直线性测验，如各点不显著偏离直线，即可计算回归直线方程。将各对数剂量带入直线方程求得希望概 率单位。如果期望概率单位 ( Y1 )与前次的不够接近，则对 Y 1再次校正。

( 1 )目测概率单位

实验 病毒感染力的滴定（TCID50的测定）

滴度：在半定量或定量测定中，将标本作一系列稀释后进行试验，呈阳性反应的最高稀释度即为滴度。根据滴度的高低，可以判断标本反应性的强弱。 滴度（抗体的多少）越高，受传染的机会就越小。

一、实验目的

了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。

二、测定病毒感染力的方法

半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测 半数鸡胚感染量EID50(egg 50% infective dose)：用鸡胚来检测

半数细胞培养物感染量TCID50（50% tissue culture infective dose)：用细胞来检测 蚀斑形成单位（plaque forming unit，PFU）：用细胞来检测

三、材料

1、长满单层的细胞1瓶 2、胰酶、吸球、吸管、生长液 3、96孔细胞培养板 4、加样器、枪头 5、病毒液（PRV） TCID50的操作步骤

1) 准备细胞

取出一块细胞培养板，每个孔大约传8000～10000个细胞（一个T25瓶的细

胞消化后加10ml培养液正好传一块96孔板，要传匀）。每个孔的细胞铺成单层

过氧化氢酶制备与测定

小鼠肝脏过氧化氢酶的制备与测定

摘要：

过氧化氢酶(Catalase) 是一种广泛存在于生物体内的氧化还原酶，是过氧化物酶体的标志酶尤其在动物的肝脏、肾脏、红细胞中含量较多，其生物学功能是催化细胞内H2O2分解，防止过多H2O2 对细胞的危害。人工制备的过氧化氢酶可广泛应用于食品与乳制品业，造纸与印染业，农业与环保业，以及医疗卫生业等多领域。

过氧化氢酶分子量约为238KD，结构上由4个具有相同多肽链的亚基组成，是以铁卟啉为辅基的结合酶，在407nm波长下有特征性的吸收。溶于水,几乎不溶于乙醇、氯仿、乙醚等有机试剂，酸性环境下溶解度低易析出，最适温度为37℃，最适pH值约为7.8。本实验以小鼠肝脏为原料，根据过氧化氢酶溶解性和大分子等特性，通过组织匀浆、盐析、透析、分子筛层析等步骤，提取纯化过氧化氢酶。建立了一套适合一般实验室分离纯化过氧化氢酶的方法，并对制备的过氧化氢酶进行蛋白浓度、分子量、米氏常数等测定。 现报告如下：

一、实验器材

1、实验动物： 成年雄性小鼠 （河北医科大学实验动物中心提供）

2、主要器材： 托盘天平，组织捣碎机，离心管，H2050R高速冷冻离心机，CU600型电热恒温水箱，DY

病毒感染力的滴定（TCID50的测定）

概念：半数感染量（median infective dose， ID50） 表示在规定时间内，通过指定感染途径，使一定体重或年龄的某种动物半数感染所需最小细菌数或毒素量。 一、实验目的

了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。 二、测定病毒感染力的方法

半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测 半数鸡胚感染量EID50(egg 50% infective dose)：用鸡胚来检测 半数细胞培养物(tissue,组织)感染量TCID50（50% tissue culture infective dose)：用细胞来检测

蚀斑形成单位（plaque forming unit，PFU）：用细胞来检测 三、材料

1、长满单层的细胞1瓶 2、胰酶、吸球、吸管、生长液 3、96孔细胞培养板 4、加样器、枪头 5、病毒液（PRV） 四、TCID50的操作步骤

1、在青霉素瓶或离心管中将病毒液作连续10倍的稀释，从10-1-10-10。

2、将稀释好的病毒接种到96孔微量培养板中，每一稀释度接种一纵排共8 孔，每孔接种100μl

病毒感染力的滴定（TCID50的测定）

概念：半数感染量（median infective dose， ID50） 表示在规定时间内，通过指定感染途径，使一定体重或年龄的某种动物半数感染所需最小细菌数或毒素量。 一、实验目的

了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。 二、测定病毒感染力的方法

半数致死量LD50( 50% lethal dose)：用动物或鸡胚来检测 半数鸡胚感染量EID50(egg 50% infective dose)：用鸡胚来检测 半数细胞培养物(tissue,组织)感染量TCID50（50% tissue culture infective dose)：用细胞来检测

蚀斑形成单位（plaque forming unit，PFU）：用细胞来检测 三、材料

1、长满单层的细胞1瓶 2、胰酶、吸球、吸管、生长液 3、96孔细胞培养板 4、加样器、枪头 5、病毒液（PRV） 四、TCID50的操作步骤

1、在青霉素瓶或离心管中将病毒液作连续10倍的稀释，从10-1-10-10。

2、将稀释好的病毒接种到96孔微量培养板中，每一稀释度接种一纵排共8 孔，每孔接种100μl

本文档主要是介绍了药物分析实验报告-亚硝酸钠滴定法测定盐酸普鲁卡因注射液的含量

亚硝酸钠滴定法测定盐酸普鲁卡因注射液的含量

【实验目的】

1. 掌握亚硝酸钠滴定法的原理及方法；

2. 掌握永停滴定法指示终点的原理及操作。

【实验原理】

1. 药物

本品为盐酸普鲁卡因加氯化钠适量制成的等渗灭菌水溶液，含盐酸普鲁卡因应为标示量的95.0%~105.0%。

2. 原理

永停滴定法又称死停滴定法、死停终点法。该法是把两个相同的铂电极插入滴定液中，在两个电极间外加一小电压，观察滴定过程中通过两个电极间的电流突变。根据电流的变化情况，确定滴定终点。因此，永停滴定法是容量分析中用以确定终点的一种方法。

盐酸普鲁卡因分子结构中具有芳伯胺基，在酸性条件下可与亚硝酸钠定量反应生成重氮化合物，可采用永停滴定法指示终点。即在滴定过程中用两个相同的铂电极，当在电极间加一低电压时，若电极在溶液中极化，则在未到滴定终点前，仅有很少或无电流通过，电流计指针不发生偏转或偏转后即回复到初始位置；但当到达滴定终点时，滴定液略有过剩，使电极去极化，发生如下氧化还原反应。

本文档主要是介绍了药物分析实验报告-亚硝酸钠滴定法测定盐酸普鲁卡因注射液的含量

此时，溶液中即有电流通过，电流计指针突然偏转，并不再回复

病毒TCID50测定

操作步骤 (1) 准备细胞

取出一块细胞培养板，每个孔大约传8000～10000个细胞（一个T25瓶的细 胞消化后加10ml培养液正好传一块96孔板，要传匀）。每个孔的细胞铺成单层大约60％丰度即可接种病毒（下午传好板第二天早上就能用）。

细胞对照选取16个孔即可。滴定与对照可以在一块培养板上进行，操作中注意不要窜孔。也可以分别在不同的细胞培养板上进行，但要保证实验条件一致。 (2) 稀释待测病毒液。

A法为参考书上标准的操作方法 B法参照书将液体量减少后的结果

病毒稀释液根据是否需要胰酶来选择适合的液体，无论哪种都无血清。

A向每支试管中加入1.8ml病毒稀释液。向1号试管中加入0.2ml病毒，依次10倍系列稀释至适宜浓度，最后一支试管。

B在EP管中用无血清的孵育液10倍倍比稀释病毒原液(10-1，10-2…10-10等)，根据病毒大致的滴度确定稀释的倍数。首次滴定可以多稀释几个滴度。

根据接种的孔数稀释病毒，常规每个稀释度接种4孔，则每个稀释度配500μl，即10-1为50μl加入450μl的孵育液中；如每个稀释度接种8个孔，则各配制1ml，即10-1为100μl加入900μl孵育液中。若接种8个孔，则相应增加液