环境中微生物的检测实验报告结果分析

猪场生病,微生物鉴定

动物微生物及免疫学实验报告

一、实验目的

（一）掌握一般培养基的制备原理及要求，掌握培养基酸碱度的测定，熟悉一

般培养基的制备过程和各种器皿灭菌方法。

（二）掌握细菌分离培养的基本要领和方法，掌握细菌抹片的制备方法和革兰

氏染色法及油镜的使用方法，并认识革兰氏染色的反应特性。

（三）掌握学习用微生物学原理诊断疾病的一般方法及步骤。

二、实验用品

（一）器材

量筒、烧杯、电子天平、漏斗、三角烧瓶、空试剂瓶、玻璃棒、玻璃平皿、刻度吸管、pH试纸、纱布、脱脂棉、天平、电炉、试剂瓶瓶塞、扎绳、放大镜、包装纸、洗耳球、酒精灯、载玻片、火柴、吸水纸、剪刀、记号笔、接种环、注射器、镊子、钳子、毫米尺、培养箱、水浴培养箱、高压蒸汽灭菌锅、油镜

（二）试剂及材料

肘胨、蛋白胨、猪胆盐、氯化钠、琼脂、乳糖、0.01%结晶紫水溶液、0.5%中性红水溶液、血清、胰化蛋白胨、酵母提取物、氢氧化钠、盐酸、牛血清、革兰氏染色液、蒸馏水、小白鼠、病猪内脏

三、实验步骤

（一）培养基的制备

猪场生病,微生物鉴定

（所有用到的器皿都已121℃高压灭菌15~30min，倾注平板在无菌操作台内完成，并放在无菌操作台内）

1、麦康凯培养基

（1） 组成：蛋白胨17g、肘胨3g、猪胆盐5g、氯化钠5

环境中微生物的检测

微生物体积小、重量轻，因此可以到处传播以致达到“无孔不入”的地步。微生物种类繁多，对外界环境的适应能力又很强，只要生活条件合适，它们就可以迅速繁殖起来。因此，它们是自然界分布最广的一群生物。无论是南极、北极、高山、海洋、陆地、淡水，还是土壤、空气、动植物体内外，几乎到处都有它们的踪迹。

空气、水是维持人类生命不可或缺的物质。它们直接进入人体或与人接触。如果带有病原微生物，将成为传染疾病的媒介。通过空气和水中微生物的检验，对环境质量进行控制。

1.1 土壤中的微生物

1.1.1 土壤是微生物生活的良好环境

在自然界，土壤是微生物生活的良好环境。因为土壤具有微生物生长繁殖所必需的各种环境条件。 1.1.1.1 营养

土壤中有大量动植物残体、植物根系的分泌物、人和动物的排泄物，这些有机物为微生物提供了良好的碳源、氮源和能源；土壤中丰富的矿质元素可以满足微生物对矿质营养的要求。 1.1.1.2 水分和渗透压

土壤中具有一定的持水性，可为微生物提供水分；土壤的渗透压对微生物是等渗或低渗环境，有利于微生物摄取营养。 1.1.1.3 空气

土壤团粒结构中的小孔隙充满空气，土壤中氧的含量比大气少，平均为土壤空气体积的7%-8%。通气良好的

《环境微生物的检测与分析》实验指导

编者：吴方丽 李欧

浙江理工大学生命科学学院

二零一四年十二月 中国 浙江 杭州

1

目 录

实验一 土壤微生物拮抗菌的分离与测数 ..................................... 3 实验二 拮抗菌的鉴定与保藏 .............................................. 14 实验三 变性梯度凝胶电泳（DGGE）分析技术及其在微生物种群多样性研究中的应用 29 附录 各种培养基、试剂的配制 .............................................. 39

2

实验一 土壤微生物拮抗菌的分离与测数

一、实验目的

1、熟悉分离、培养微生物前的有关准备工作及操作方法。 2、初步掌握从土壤中分离微生物和测数的基本方法。 3、了解培养基的配制原理，掌握其配制过程和方法。 4、掌握实验室几种灭菌方法及技术。 5、掌握无菌操作技术。 6、了解平板菌落计数的原理。

7、识别土壤中几大类微生物的菌落特征。

8、学习拮抗作用的试验方法，观察微生物间的拮抗现象及抗生素的抗菌作用。

二、实验原理

自然条件

微生物实验报告

微生物大小和显微计数

刘欣怡201100140057

生物科学基地班

组别：周一下午三组

同组者：曹平平，周楠，

刘艺，刘希伟

实验完成时间：2012年11月26号

一、实验目的

1、明确显微镜下用测微尺测定微生物大小与血球计数板计数的原理 2、增强对细胞大小的感性认识

3、学习并掌握显微镜下测定微生物细胞大小的技术，包括目镜测微尺、镜台测微尺的校正技术与测定细胞大小的技术

4、了解血球计数板的结构，学习并掌握血球计数板测定微生物数量的技术，包括样品的点样、菌数计数的方法与计算 5、巩固无菌操作技术和显微观察技术

二、实验器材

1.菌种 ： 酿酒酵母 2.培养基：

酵母合成培养基（配方见后附） 3.溶液和试剂：

蒸馏水，孔雀绿染液，番红染液，95%乙醇，香柏油，二甲苯等

4.仪器及其他用具：

载玻片，盖玻片，镊子，酒精灯，显微镜，目镜测微尺，镜台测微尺，血球计数板，计数器，滴管，擦镜纸，玻片夹，电子秤，称量纸，双层瓶，

实验报告

微生物综合实验

报告

姓名：杨延景

班级：食品1101

学号：2011040632

指导老师：郭永

黄河水利职业技术学院

实验报告

目录

项目一食品中菌落总数的测定

（一）前言 (3)

（二）实验目的 (3)

（三）实验原理 (3)

（四）实验器材 (3)

（五）实验步骤 (4)

（六）实验结果以及分析 (7)

（七）国标中微生物菌落总数标注 (7)

项目二大肠菌群的测定

（八）实验目的 (9)

（九）实验原理 (9)

（十）实验器材 (9)

（十一）实验步骤 (10)

（十二）实验结果以及分析 (15)

项目三革兰氏染色

（一）实验器材 (18)

（二）实验步骤 (18)

（三）实验结果 (18)

四实验感想

黄河水利职业技术学院 2

实验报告

项目一食品中菌落总数的测定

前言

随着生活人们生活水平的提高，和社会的发展与进步食品安全问题越来越受到人们的关注，然而食品方面的问题这几年也越来越突出，食品安全问题屡见不鲜。由前几年的“苏丹红红心鸭蛋”再到这几年的“三聚氰胺奶粉事件”和“瘦肉精事件”还有“地沟油”等等一系列的事件都不得不让人们对食品安全问题高度关注。然而食品中微生物的菌落总数是用来判定食品被细菌污染的程度即清洁状态及其安全质量，它反映食品在生产过程中是否符合国家食品安全标准要求，以便

实验目的、原理、材料、内容、结果、分析讨论

实验目的

嗜热链球菌的筛选、分离鉴定及发育树鉴定

实验原理

乳酸菌是一类能利用可发酵的糖产生大量乳酸的细菌通称。这类细菌广泛分布在土壤 植物根、茎、湖泊及动物的体内。乳酸菌从形态上可以分为球菌和杆菌，并且均为革兰氏染色阳性。在缺少氧气的环境中生长良好的兼性厌氧菌或厌氧性细菌。

嗜热链球菌来源于乳制品。它是一种耗氧的革兰氏阳性菌，以两个卵圆型为一对的球菌连成约0.7到0.9微米的长链。在选择性培养基，嗜热链球菌会长成米色的菌落。嗜热链球菌也可在含有下列任一种糖类的培养基上生长。这些糖类包括半乳糖、葡萄糖、果糖、乳糖、蔗糖。 乳糖的降解需要一种特殊的酶，叫β-半乳糖苷酶。乳糖不耐受的人身体内就是缺乏了这一种酶。嗜热链球菌是一种能产生β-半乳糖苷酶的细菌，所以可以帮助乳糖的消化。 嗜热链球菌个体中多有2球体连接、3、4球体连接、5、6球体连接的，8球体以上连接的和单球体的少见。所以个体大小差距较大。多在0.4-0.7×1.0-6um范围内。

利用是嗜热链球菌的选择性培养基——改良型M17培养基，可以筛选出酸奶中的嗜热链球菌，然后进行筛选并分离纯培养。

传统的微生物分类主要依靠形态学特征以及

实验1 培养基的配制和灭菌

一、目的要求

1.了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。

2.了解几种灭菌方法，掌握高压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。 3.熟悉菌种分离筛选的前期准备工作及操作方法。 4.每2人一组，每人一份实验报告。 二、实验材料

1.药品：酵母粉、蛋白胨、氯化钠、琼脂、葡萄糖、KNO3、MgSO4?7H2O、FeSO4?7H2O、1N HCl、1N NaOH

2.设备：高压蒸汽灭菌锅、紫外线灭菌灯、75%酒精棉。

3.材料：天平、药匙、电炉、pH 试纸、烧杯、量筒、5mL、10mL 注射器、玻璃棒、试管、培养基、吸管、移液器（1mL 0.2mL）、牛皮纸、线绳、标签等。 三、实验内容 (一) 培养基的配制 1．培养基的配制方法和步骤

1)称量：按照配方正确称取所需药品放于烧杯中。 2)溶化：在烧杯中加入所需水量，玻棒搅匀，加热溶解。 3)调pH 值：用1N NaOH 或1N HCl 调pH，用pH 试纸对照。 4)加琼脂溶化：加热过程要不断搅拌，可适当补水。 5)分装：注意不要污染试管塞或纱布。 6)包扎成捆：用记号笔注明何种培养基。

7)灭菌：在高压锅中， 115 °C 高温灭菌30min。 2．培养基的配制 A.

实验十 一 IMViC与硫化氢试验

指导教师：李海花 周六 第三组

学号：060122010041 姓名：宋天佳 专业：2010级水产养殖 学号：030212010025 姓名：皇 昊 专业：2010级化学1班 学号：060122010055 姓名：续鹏辉 专业：2010级水产养殖

一、实验目的

了解IMViC与硫化氢反应的原理及其在肠道菌鉴定中的意义和方法。 二、实验原理

IMViC是I－吲哚（indol test）、M－甲基红（methyl red test）、V－伏-普（Voges-Prolauer test）和C－柠檬酸盐（citrate test）4个实验的缩写。这4个实验主要用来快速鉴别产气杆菌与大肠杆菌，多用于水的细菌检查。大肠杆菌虽非致病菌，但在饮用水时若超过一定指标，则表示水质受粪便污染。产气杆菌也广泛存在于自然界中，因此检查水是要将两者分开。硫化氢（H2S）实验也是检查肠道细菌的生化实验。 （一）吲哚试验（indol test）

吲哚试验是用来检测吲哚试验的产生，有些细菌分解培养基中的色氨酸生成吲哚（靛基质），经与试剂中的对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而呈红

实验目的、原理、材料、内容、结果、分析讨论

实验目的

嗜热链球菌的筛选、分离鉴定及发育树鉴定

实验原理

乳酸菌是一类能利用可发酵的糖产生大量乳酸的细菌通称。这类细菌广泛分布在土壤 植物根、茎、湖泊及动物的体内。乳酸菌从形态上可以分为球菌和杆菌，并且均为革兰氏染色阳性。在缺少氧气的环境中生长良好的兼性厌氧菌或厌氧性细菌。

嗜热链球菌来源于乳制品。它是一种耗氧的革兰氏阳性菌，以两个卵圆型为一对的球菌连成约0.7到0.9微米的长链。在选择性培养基，嗜热链球菌会长成米色的菌落。嗜热链球菌也可在含有下列任一种糖类的培养基上生长。这些糖类包括半乳糖、葡萄糖、果糖、乳糖、蔗糖。 乳糖的降解需要一种特殊的酶，叫β-半乳糖苷酶。乳糖不耐受的人身体内就是缺乏了这一种酶。嗜热链球菌是一种能产生β-半乳糖苷酶的细菌，所以可以帮助乳糖的消化。 嗜热链球菌个体中多有2球体连接、3、4球体连接、5、6球体连接的，8球体以上连接的和单球体的少见。所以个体大小差距较大。多在0.4-0.7×1.0-6um范围内。

利用是嗜热链球菌的选择性培养基——改良型M17培养基，可以筛选出酸奶中的嗜热链球菌，然后进行筛选并分离纯培养。

传统的微生物分类主要依靠形态学特征以及

中 国 海 洋 大 学 实 验 报 告

实验一 培养基的配制和灭菌

一、目的要求

1.了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。

2.了解几种灭菌方法，掌握高压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。 3.熟悉菌种分离筛选的前期准备工作及操作方法。 4.每2人一组，每人一份实验报告。

二、实验材料

1、药品：酵母粉、蛋白胨、氯化钠、琼脂、葡萄糖、KNO3、MgSO4?7H2O、FeSO4?7H2O、1N HCl、1N NaOH。

2、设备：高压蒸汽灭菌锅、紫外线灭菌灯、75%酒精棉。

3、材料：天平、药匙、电炉、pH试纸、烧杯、量筒、5mL、10mL注射器、玻璃棒、试管、培养基、吸管、牛皮纸、线绳、标签等。 移液器（1mL 0.2mL）。

三、实验内容

(一) 培养基的配制 1、培养基的配制方法和步骤

1)称量：按照配方正确称取所需药品放于烧杯中。 2)溶化：在烧杯中加入所需水量，玻棒搅匀，加热溶解。 3)调pH值：用1N NaOH或1N HCl调pH，用pH试纸对照。 4)加琼脂溶化：加热过程要不断搅拌，可适当补水。 5)分装：注意不要污染试管塞或纱布。 6)包扎成捆：用记号笔注明何种培养基。 7)灭菌：在高压锅中， 115 ?C高温