大一溶液的配制实验内容

实验一 溶液的配制

一、 实验目的

1． 掌握各种浓度溶液的配制及溶液稀释的操作

2． 熟悉规范化地使用台秤、量筒或量杯等仪器的实验操作 3． 培养细心观察，准确操作，认真记录的良好习惯

二、实验原理

溶液的浓度是指一定量的溶液或溶剂中所含溶质的量。常用的浓度表示方法有：

物质的量浓度：CB=nB/V 单位：mol/L 质量浓度：ρB=mB/V 单位：g/L 质量分数：ωB=mB/m 体积分数：φB=VB/V

溶液浓度的配制方法有两种：

1． 用一定量的溶液中所含的溶质来表示溶液的浓度，如ωB，其配制的方法是：将定量的溶质和溶剂混合均匀即可

2． 用一定体积的溶液中所含溶质的量来表示溶液的浓度，如CB、ρB、φB，其配制的方法是：将一定量的溶质与适量的溶剂酰混合，使得溶质完全溶解，定量转移到量筒或量杯中，然后再加溶剂到溶液总体积，最后用玻璃棒搅匀。

三、实验预习题

1． 配制固体溶质的溶液时，该如何操作？ 2． 用浓硫酸配制稀硫酸时，该如何操作？

3． 什么叫浓度？表示溶液的浓度有几种方法？写出其数学表达式

四、实验用品

φB＝0.95的酒精，Na

实验一 溶液的配制

一、 实验目的

1． 掌握各种浓度溶液的配制及溶液稀释的操作

2． 熟悉规范化地使用台秤、量筒或量杯等仪器的实验操作 3． 培养细心观察，准确操作，认真记录的良好习惯

二、实验原理

溶液的浓度是指一定量的溶液或溶剂中所含溶质的量。常用的浓度表示方法有：

物质的量浓度：CB=nB/V 单位：mol/L 质量浓度：ρB=mB/V 单位：g/L 质量分数：ωB=mB/m 体积分数：φB=VB/V

溶液浓度的配制方法有两种：

1． 用一定量的溶液中所含的溶质来表示溶液的浓度，如ωB，其配制的方法是：将定量的溶质和溶剂混合均匀即可

2． 用一定体积的溶液中所含溶质的量来表示溶液的浓度，如CB、ρB、φB，其配制的方法是：将一定量的溶质与适量的溶剂酰混合，使得溶质完全溶解，定量转移到量筒或量杯中，然后再加溶剂到溶液总体积，最后用玻璃棒搅匀。

三、实验预习题

1． 配制固体溶质的溶液时，该如何操作？ 2． 用浓硫酸配制稀硫酸时，该如何操作？

3． 什么叫浓度？表示溶液的浓度有几种方法？写出其数学表达式

四、实验用品

φB＝0.95的酒精，Na

实验室常用溶液的配制

1．30%丙烯酰胺溶液（100ml） 【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的蒸馏水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于4℃温度。

【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂（MB-1Mallinckrodt），搅拌过夜，然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸，因此大于1年的溶液应该被丢弃。 2．40%丙烯酰胺（用于DNA测序，1L） 【配制方法】把380g丙烯酰胺（DNA测序级）和20g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足 至终体积为1L。置棕色瓶中保存于室温

实验一

1．界面设计如图1.1所示，在窗体上有1个文本框(Text1)，12个命令按钮(Command0～Command11)，按下列要求设计界面，设置对象属性和编写事件过程。

要求：(1) 窗体标题设为“计算器”。 (2) 文本框Text1文本居右对齐，五号宋体。 (3) 命令按钮Command0～Command9的Caption属性分别为0～9，Command10的Caption属性为“.”，Command11的Caption属性为“CE”，字体为五号宋体。

(4) 单击“CE”按钮清空文本框。

2．界面设计如图1.2所示，标签框的文本为黑体、28磅、居中，单击“前景”按钮，使标签框的文本颜色为红色；单击“背景”按钮，使标签框的背景颜色成蓝色；单击“还原”按钮，使标签框的前景和背景还原到初始颜色；单击“结束”按钮结束程序运行。

提示：可以用Visual Basic系统提供的颜色常量设置前景和背景颜色(红色vbRed、蓝色vbBlue)，可以用当前窗体的ForeColor、BackColor属性还原标签框的前景和背景颜色。

还原标签框前景的代码为：Label1.ForeColor = Form1.ForeColor

3．在文本框中输入一个字

生物实验常用溶液的配制

一、DNA电泳相关：

1、DNA电泳缓冲液：

（1）Tris-乙酸（TAE）缓冲液：TAE较为常用，且价格低，但其缓冲能力较弱。所以TAE电泳需要蠕动泵使两极贮液槽进行液体循环，而且TAE需要经常更新；且要加入EDTA，目的在于鳌合二价离子，抑制DNase，以保护DNA。

① TAE使用液：

1×：40mmol/L Tris-乙酸 1mmol/L EDTA ② TAE贮存液（每L）： 50×：242g Tris碱 57.1ml 冰乙酸

100ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）

（2）Tris-硼酸（TBE）缓冲液：

① TBE使用液：

0.5×：0.045mol/L Tris-硼酸 1mmol/L EDTA ② TBE贮存液（每L）： 5×： 54g Tris碱 27.5ml 硼酸

20ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）

（3）Tris-磷酸（TPE）缓冲液：

① TPE使用液：

1×：90mmol/L Tris-磷酸 2mmol/L EDTA ② TPE贮

实验6 溶液的配制与标定

一、实验目的

1. 掌握常用容量仪器的一般洗涤方法，标准溶液的配制方法。 2. 学会量筒、容量瓶、移液管的正确使用方法。 3. 掌握用基准物质标定酸、碱溶液的方法。

4. 掌握滴定管的准备、滴定操作和确定滴定终点的方法。 5. 熟悉酸碱指示剂的选择和终点的颜色变化。

二、实验原理

1. 标准溶液：标准溶液是指浓度准确已知并可用来滴定的溶液，一般采用直接法或间接法来配制。通常，只有基准物质才能用直接法配制标准溶液，而其他的物质只能用间接法配制。基准物质应符合下列要求： ① 试剂的组成应与它的化学式完全相符； ② 试剂的纯度在99.9%以上；

③ 试剂在一般情况下应该很稳定； ④ 试剂最好有较大的摩尔质量。

直接法：准确称取一定量的基准物质，溶解后，定量的转移至一定体积的容量瓶中，稀释定容，摇匀。溶液的浓度可通过计算直接得到。

间接法：先配制近似于所需浓度的溶液，然后再用基准物质（或已经用基准物质标定过的标准溶液）来标定其准确浓度。

2. 酸碱标准溶液的配制：一般的酸碱因含有杂质、潮解和吸附等问题，不能直接配制准确浓度的溶液，通常先配成近似浓度的溶液，然后再用适当的基准物质进行标定。本实验中所用到的N

Western blot 实验所需试剂配制方法

页脚内容

WB 所需溶液的配制

1 Tris-甘氨酸电泳缓冲液 (Running buffer) 5× Tris base 15.14g

Glycine(甘氨酸) 72.0g

SDS 5.0g

蒸馏水 溶解至1000ml

5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液：15.1g Tris 碱和72ｇ甘氨酸，5ｇ电泳级的SDS ，双蒸水定容至1L ，pH 值为8.3。使用前，将5×稀释到1×：取200ml 5×，定容到1000ml 。

2 转膜缓冲液 （Sending buffer ）（现用现配） 1000 ml 1500 ml

Glycine(甘氨酸) 14.413 g 21.6 g

1.0 M Tris.HCl (pH8.3) 25 ml 37.5ml

10% SDS 1 ml 1.5 ml

甲醇 (methanol) 200 ml 300 ml

蒸馏水 溶解至1000 ml 溶解至1500 ml

必须新鲜配置，因为甘氨酸溶于水后易分解。小片段可不加SDS 。

3 10% SDS 配置

电泳级十二烷基硫酸钠也叫SDS （Sodium Dodecyl Sulfate ，SDS,C 12H 25O 4NaS ）溶液:

附录：常用试剂配制及应用

一、常用缓冲液、试剂的配制

碳酸盐缓冲液(Carbonate-Bicarbonate Buffer)

由于碳酸盐pH值偏碱，因此，常用于pH>9的缓冲液配制（附表1）。

附表1. 0.2 mol/L碳酸盐缓冲液（pH9.2～10.7）

pH 9.2 9.3 9.4 9.5 9.6 9.7 9.8 9.9 0.2mol/L Na2CO3 (ml) 4.0 7.5 9.5 13.0 16.0 19.5 22.0 25.0 0.2mol/L NaHCO3 (ml) 46.0 42.5 40.5 37.0 34.0 30.5 28.0 25.0 pH 10.0 10.1 10.2 10.3 10.4 10.5 10.6 10.7 0.2mol/L Na2CO3 (ml) 27.5 30.0 33.0 35.5 38.5 40.5 42.5 45.0 0.2mol/L NaHCO3 (ml) 22.5 20.0 17.0 14.5 11.5 9.5 7.5 5.0 磷酸缓冲液(Phosphate Buffers，PB)

磷酸盐是使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH

氢氧化钠标准溶液的配制和标定

一、目的要求

1.掌握NaOH标准溶液的配制和标定。

2.掌握碱式滴定管的使用，掌握酚酞指示剂的滴定终点的判断。 二、方法原理

NaOH有很强的吸水性和吸收空气中的CO2，因而，市售NaOH中常含有Na2CO3。 反应方程式： 2NaOH + CO2 → Na2CO3 + H2O 由于碳酸钠的存在，对指示剂的使用影响较大，应设法除去。 除去Na2CO3最通常的方法是将NaOH先配成饱和溶液（约52%，W/W），由于Na2CO3在饱和NaOH溶液中几乎不溶解，会慢慢沉淀出来，因此，可用饱和氢氧化钠溶液，配制不含Na2CO3的NaOH溶液。待Na2CO3沉淀后，可吸取一定量的上清液，稀释至所需浓度即可。此外，用来配制NaOH溶液的蒸馏水，也应加热煮沸放冷，除去其中的CO2。 标定碱溶液的基准物质很多，常用的有草酸（H2C2O4?2H2O）、苯甲酸（C6H5COOH）和邻苯二甲酸氢钾（C6H4COOHCOOK）等。最常用的是邻苯二甲酸氢钾，滴定反应如下： C6H4COOHCOOK + NaOH → C6H4COONaCOOK + H2O

实验二酸碱标准溶液的配制与标定

一、实验目的：

1.掌握间接法配制HCl、NaOH标准溶液的方法。

2. 熟练掌握差减称量法称取基准物的方法及滴定操作基本技能。 3.学习酸碱标准溶液的标定方法。 二、实验原理：

在酸碱滴定法中，常用到盐酸或氢氧化钠标准溶液，它们都不宜直接配制，因为浓盐酸易挥发，浓度和纯度不一，固体氢氧化钠中常因吸收空气中的二氧化碳和水蒸气，而含有碳酸钠和水分，因此，只能先将它们配制成近似浓度的溶液。然后通过标定来确定它们的准确浓度。

1.标定盐酸的基准物质：硼砂Na2B4O7·10H2O和无水碳酸钠Na2CO3。

(1)硼砂(四硼酸钠，Na2B4O7·10H2O)：易制得纯品，不易吸水，性质比较稳定，而且摩 尔质量较大(381.37g/mol)，称量误差小，是标定HCl溶液常用的基准物质，但硼砂易风化失水，需保存在相对湿度为60%密闭容器中。1︰2反应，其标定反应为：

Na2B4O7·10H2O + 2HCI ＝ 2NaCI + 4H3BO3 + 5H2O

在化学计量点时，由于生成的硼酸是弱酸，溶液pH=5.1，可用甲基橙作指示剂。 (2)无水碳酸钠(Na2CO3)：容易制得纯品，摩尔质量为105.99g/mol，但易吸湿，