荧光素钠皮试方法

各类药物的皮试方法

一、青霉素过敏试验

凡初次用药、停药3天后再用，以及在应用中更换青霉素批号时，均须做过敏试验。 1．皮试液配制：以每ml含青霉素200～500U的皮试液为标准，注入剂量为20～50U（0.1ml）。 加0.9%氯化钠溶液 每ml药液青霉素钠含量

要 点 与 说 明

（ml） （U/ml）

80万U 4 20万 用5ml注射器，6～7号针头 0.1ml上液 0.9 2万 以下用1ml注射器，6～7号针头 0.1ml上液 0.9 2000 每次配制时均需将溶液摇匀

1

0.1ml上液 0.9 200 配制完毕换接4/2号针头，妥善放置 青霉素钠

2．试验方法：确定患者无青霉素过敏史，于患者前臂掌侧下段皮内注射青霉素

皮试溶液0.1ml（含青霉素20或50U），20分钟后观察、判断并记录试验结果。 3．试验结果判断： 结果 阴性 阳性

局 部 皮 丘 反 应

大小无改变，周围无红肿，无红晕 皮丘隆起增大，出现红晕，直径大于1cm，周围有伪足伴局部痒感

全 身 情 况

无自觉症状，无不适表现

可有头晕、心慌、恶心，甚至发生过敏性休克

二、破伤风抗毒素过敏试验

1．皮试液配制：用1m

中国人民解放军空军总医院

关于规范抗菌药物皮试的通知

各专业（科室）：

为加强抗菌药物皮试的规范性，避免不正确的皮试用药导致的药物不良反应。现对我院抗菌药物的皮试方法，做如下要求：

1、青霉素类（含复方制剂）药物，一律以青霉素钠做皮试。如皮试中出现阳性反应，则禁用该类药物。

2、头孢菌素类（含复方制剂）和头霉素类药物，一律以原液做皮试。如皮试时出现阳性反应，则禁用本药。

3、链霉素需要皮试，其他抗菌药物应用是无需皮试。 4、皮试液的配臵、过敏观察和处理方案，见《临床常用药物皮试操作指南》（附件）。

5、以原液皮试时，经治医师应明确告知患者，避免不必要纠纷。

6、临床应用中，须先下皮试医嘱，进行皮试并密切观察，皮试用药应在医嘱中明确。确定无过敏反应症状后，方可开具治疗用药。

附件：临床常用药物皮试操作指南

（此页无正文）

空军总医院

二〇一二年九月三日

承办单位：计划科 联系人：李耀武 电话： 927608

附件

临床常用药物皮试操作指南

一、药物过敏试验原则 二、皮内试验结果观察

三、临床常用药物皮试液的配制方法 （一）青霉素皮试液配制方法 （二）头孢菌素类皮试液配制方法 1、0.5g规格 2、0.7

中国人民解放军空军总医院

关于规范抗菌药物皮试的通知

各专业（科室）：

为加强抗菌药物皮试的规范性，避免不正确的皮试用药导致的药物不良反应。现对我院抗菌药物的皮试方法，做如下要求：

1、青霉素类（含复方制剂）药物，一律以青霉素钠做皮试。如皮试中出现阳性反应，则禁用该类药物。

2、头孢菌素类（含复方制剂）和头霉素类药物，一律以原液做皮试。如皮试时出现阳性反应，则禁用本药。

3、链霉素需要皮试，其他抗菌药物应用是无需皮试。 4、皮试液的配臵、过敏观察和处理方案，见《临床常用药物皮试操作指南》（附件）。

5、以原液皮试时，经治医师应明确告知患者，避免不必要纠纷。

6、临床应用中，须先下皮试医嘱，进行皮试并密切观察，皮试用药应在医嘱中明确。确定无过敏反应症状后，方可开具治疗用药。

附件：临床常用药物皮试操作指南

（此页无正文）

空军总医院

二〇一二年九月三日

承办单位：计划科 联系人：李耀武 电话： 927608

附件

临床常用药物皮试操作指南

一、药物过敏试验原则 二、皮内试验结果观察

三、临床常用药物皮试液的配制方法 （一）青霉素皮试液配制方法 （二）头孢菌素类皮试液配制方法 1、0.5g规格 2、0.7

Microchemi -荧光素酶的检测

前言

一 生物发光 二 荧光素酶

三 荧光素酶报告基因 四 荧光素酶的检测方法

五 利用MicroChemi检测植物叶片中的荧光素酶生物发光

附成功案例1：中国农业大学生命科学学院检测烟草叶片中荧光素酶的发光 附成功案例2：吉林大学植物科学学院（已购买）

前言

以色列DNR生物影像公司成立于1993年，他致力于为科研工作者提供杰出而专业的支持与服务，现在已有超过10,000套的DNR成像系统应用于全世界的大学、科研院所、政府、制药和生物公司。

2009年，东胜创新成为DNR公司生产的凝胶成像系统全线产品的中国区总代理。三年多以来，经过东胜人的不懈努力，我们在全国范围内取得了良好的销量。同时，DNR凝胶成像系统凭借优异的质量和出色的表现，得到了新老用户的一致认可，成为广大科研工作者的良好伙伴。

其中，特别是MicroChemi化学发光凝胶成像受到众多用户好评如潮 如：中科院微生物所（已推荐并完成动物所老师的购买）

华中科技大学同济医学院（购三台MicroChemi），完成多篇SCI的文章发表

中科院遗传与发育生物学研究所、吉林大学、中国医科大学、东北师范大学、东北农业大学、北京康为世纪生物科技有

Microchemi -荧光素酶的检测

前言

一 生物发光 二 荧光素酶

三 荧光素酶报告基因 四 荧光素酶的检测方法

五 利用MicroChemi检测植物叶片中的荧光素酶生物发光

附成功案例1：中国农业大学生命科学学院检测烟草叶片中荧光素酶的发光 附成功案例2：吉林大学植物科学学院（已购买）

前言

以色列DNR生物影像公司成立于1993年，他致力于为科研工作者提供杰出而专业的支持与服务，现在已有超过10,000套的DNR成像系统应用于全世界的大学、科研院所、政府、制药和生物公司。

2009年，东胜创新成为DNR公司生产的凝胶成像系统全线产品的中国区总代理。三年多以来，经过东胜人的不懈努力，我们在全国范围内取得了良好的销量。同时，DNR凝胶成像系统凭借优异的质量和出色的表现，得到了新老用户的一致认可，成为广大科研工作者的良好伙伴。

其中，特别是MicroChemi化学发光凝胶成像受到众多用户好评如潮 如：中科院微生物所（已推荐并完成动物所老师的购买）

华中科技大学同济医学院（购三台MicroChemi），完成多篇SCI的文章发表

中科院遗传与发育生物学研究所、吉林大学、中国医科大学、东北师范大学、东北农业大学、北京康为世纪生物科技有

带Luciferin荧光素酶细胞转染实验的具体步骤及方法

一、细胞名称LLC-GFP-luc

二、组织小鼠肺癌细胞系

三、母细胞来源ATCC

四、转染方法与标记过程的描述慢病毒转染Hygromycin筛选

(一) 质粒部分

1.酶切载体：pGL4.10（luc2）由酶切获得1400bp的luc2基因片断；EGFP片段由PCR扩增获得700-800bp左右片段；pSin-hyg-T2A载体酶切线性化。

2.电泳和胶回收：上述酶切产物DNA电泳，TAKARA试剂盒胶回收，回收产物取少量电泳鉴定。

3.连接载体与目的片段:使用Invitrogen T4连接酶连接luc2、EGFP片段和pSin-hyg-T2A线性化载体，连接使用20ul体系，25℃，10min。

4.转化：感受态菌One Shot Stbl3在冰上融化后，加入连接产物，静置25min 后在水浴42℃，45sec热休克，后加入250ul无抗培养基225转摇菌1h，将转化的菌铺于有氨苄抗性平板37度过夜。

5.挑取单克隆：观察平板后挑取15个单克隆至含2ml氨苄抗性LB培养基摇菌管中，255转摇菌

6.5h。

6.小抽质粒与鉴定：使用碱裂解法小抽，质粒用25ul含RNA酶ddH2O溶解；酶切鉴定: 重

槐花米中芸香苷提取及槲皮素的分离与检识

[适用对象] 药学专业

[实验学时] 18学时

一、实验目的

学习黄酮类化合物的提取、分离和检识，通过实验要求：

（1）通过芸香苷提取与精制，掌握沸水提取黄酮类化合物的原理和操作。

（2）掌握由芸香苷水解制取槲皮素的方法。

（3）掌握黄酮苷和黄酮苷元的分离。

（4）掌握黄酮类化合物的主要性质及黄酮苷、苷元和糖部分的检识方法。

二、实验原理

由槐花中提取芸香苷的方法很多，本实验是根据芸香苷在冷水和热水中的溶解度差异的特性进行提取和精制，或根据芸香苷分子中具有酚羟基，显弱酸性，能与碱成盐而增大溶解度，以碱水为溶剂煮沸提取，其提取液加酸酸化后则芸香苷游离析出。

三、仪器设备

单口园底烧瓶，冷凝管，铁架台，烧杯，电炉，烘箱、水浴锅、三角烧瓶，微量抽滤器，布氏漏斗，滤纸，试管，层析槽，石棉网，毛细管等。

四、相关知识点

槐花为豆科植物槐Sophora japonica L.的干燥花及花蕾，主要含

芸香苷（芦丁），含量高达12~20%，水解生成槲皮素、葡萄糖及鼠李糖。

芸香苷（rutoside），分子式C27 H30 O16，分子量610.51，淡黄色针状结晶，mp.177~178℃。难溶于冷水（1﹕8000），略溶于热水（1﹕200），溶于热甲

中铁十一局集团有限公司

目 录

一、编制依据 ................................................................ 1 二、工程概况 ................................................................ 1 三、试桩目的 ................................................................ 2 四、施工组织及试桩安排 ...................................................... 3 １、素混凝土试桩管理及施工人员配备 .......................................... 3 ２、素混凝土试桩主要机械配备 ................................................ 3 ３、素混凝土试桩施工计划时间及试桩地点 ...................................... 3 ４、试桩类型及数量 .....................

天然药物化学设计实验

开题报告

题目：槲皮素提取及结构鉴定

学生姓名： 舒泉湧

学 号： 200804040125

院 （系）： 生命科学与工程学院

专 业： 制药工程

指导教师： 孔阳

一．【文献综述】 1．1研究意义

我国北部、华南和西南地区等地区都产槐花，尤河北和江苏省产量最为丰富。槐花中含有丰富的黄酮类化合物，其芦丁(nltin)为黄酮中的主要成分，含量为8—20％；槲皮素(quercetin)为芦丁的苷元。芦丁和槲皮素具有抗炎作用、抗氧化作用、抗肿瘤作用、抗血小板聚集作用；对糖尿病的肾脏、胃肠粘膜、器官缺血损伤具有保护作用；同时还有抗忧郁、抗心胸肥大、降压等作用。因此，对槐花中芦丁和槲皮素的提取分离研究具有非常重要的研究意义。 1．2研究现状

1．2．1槐花性状与产地简介

槐花为豆科植物槐Sophora japonica L.的干燥花及花蕾；前者习称为“槐花”，后者习称为槐米。落叶乔木，单数羽状复叶互生，长达25 cm，叶柄基部膨大，小叶7—15，卵状长圆形或卵状披针形，长2.55 cm，先端尖，基部圆形或阔楔形，全缘,上面绿色，下面伏生白色短毛。小叶柄长2.5cm；托叶镰刀状，早落。花瓣多数散落，完整花呈飞鸟状，花瓣5枚，黄色或淡

天然药物化学设计实验

开题报告

题目：槲皮素提取及结构鉴定

学生姓名： 舒泉湧

学 号： 200804040125

院 （系）： 生命科学与工程学院

专 业： 制药工程

指导教师： 孔阳

一．【文献综述】 1．1研究意义

我国北部、华南和西南地区等地区都产槐花，尤河北和江苏省产量最为丰富。槐花中含有丰富的黄酮类化合物，其芦丁(nltin)为黄酮中的主要成分，含量为8—20％；槲皮素(quercetin)为芦丁的苷元。芦丁和槲皮素具有抗炎作用、抗氧化作用、抗肿瘤作用、抗血小板聚集作用；对糖尿病的肾脏、胃肠粘膜、器官缺血损伤具有保护作用；同时还有抗忧郁、抗心胸肥大、降压等作用。因此，对槐花中芦丁和槲皮素的提取分离研究具有非常重要的研究意义。 1．2研究现状

1．2．1槐花性状与产地简介

槐花为豆科植物槐Sophora japonica L.的干燥花及花蕾；前者习称为“槐花”，后者习称为槐米。落叶乔木，单数羽状复叶互生，长达25 cm，叶柄基部膨大，小叶7—15，卵状长圆形或卵状披针形，长2.55 cm，先端尖，基部圆形或阔楔形，全缘,上面绿色，下面伏生白色短毛。小叶柄长2.5cm；托叶镰刀状，早落。花瓣多数散落，完整花呈飞鸟状，花瓣5枚，黄色或淡