小鼠卵巢石蜡包埋

石蜡包埋

第一天：固定，取材当天即把所需包埋的组织（取出后放入4%的多聚甲醛中过夜（12h）；

第二天：冲水，12小时（注意水流不需要太大，不可将水流直接冲击组织）

脱水，60%酒精4h白天（或者60%酒精4℃过

夜12h）→

第三天：→70%酒精4h→80%酒精4h→90%酒精4h→95%酒精4℃过夜(不一定12小时) →

第四天：→100%酒精Ⅰ2h→100%酒精Ⅱ2h→100%酒精Ⅲ2h→

透明，二甲苯Ⅰ5+3 min→二甲苯Ⅱ5+3 min→

二甲苯Ⅲ 5+3 min→二甲苯Ⅳ 3+2 min→

（此处注意，在透明过程进行到此处时，应在浸完后拿出脑组织观察一下透明是否彻底，一般来说透明完全的脑组织是呈现为一个通体琥珀状，如果是发现脑组织内部仍呈现不通透的白色则继续酌情追加浸泡（透明）时间）

浸蜡，软蜡Ⅰ2h→软蜡Ⅱ2h→软蜡Ⅲ 2h→ 中蜡包埋 备注：1、软蜡是指熔点48-50℃的石蜡，中蜡是指熔点58—60℃的石蜡。在包埋前应该提前将各种蜡准备好，放在对应的蜡缸里融好，注意不要加热太长时间。待蜡完全融好后关

上煤气，冷却至烧杯上沿不是太烫手且蜡也未凝固是将蜡挪到６０℃温箱里备用。在融蜡时要注意通风橱使用规范。

2、包埋组织块时要注意动作熟

石蜡包埋步骤

1. 取材固定：离体的组织不及时固定，组织就会自溶，抗原就会扩散。固定就是加入一些可以让蛋白质变性的物质（比如说甲醛），使得蛋白质的结构被固定住，不再发生变化，同时也不会再发生一些活性反应，这样才好做后续的染色步骤。常见固定液是4%的多聚甲醛和饱和苦味酸。根据不同目的、组织特征代表性取材。取的材料应该小而薄。便于固定剂迅速渗入内部，一般厚度不超过2mm，大小不超过5×5mm2。每个组织最好多切几块。新鲜组织固定（组织块不宜太大太厚，这样固定液很难进入里面，可能会导致在较短的时间内脱水不完全，引起一系列的问题，比如浸蜡不彻底，切片不好完成，切不完整。导致后来切片染色的脱落，造成染色的失败。组织块也不能太小，否则不能保证切片数量，且透明时间和浸蜡时间不能很好的把握。）固定时间因固定剂种类而异，大多6-12小时，一般不超过12小时。视组织固定的难易程度而定。后续如果做免疫组化，不应超过12小时；后续如果做HE染色，不应超过24小时。固定完之后用水洗（目的：洗去渗入组织的固定液，终止固定以免影响对组织的内结构的观察，分析。换液两次，一次半小时。）之后可直接脱水包埋或放入75%的乙醇4度可长期保存。

2. 脱水：从75%的乙醇中取出，分别

组织块石蜡包埋的步骤：

1. 取材：尽量活杀，在处死30min内取材完毕，组织块的大小一般为（1.0-1.5cm）

*1.0cm*(0.2-0.3cm) 2. 固定：常用甲醛液浓度为4%，是40%甲醛溶液和水按1:9比例配制而成。固定时间

以12-24h为宜。（4℃冰箱可放置1-3个月） 3. 冲洗：将组织块放在固定的容器中用流水冲洗24h.

4. 脱水：一次70%酒精2h, 80%酒精2h, 90%酒精1h, 95%酒精40min,无水乙醇Ⅰ40min, 无水乙醇Ⅱ30min。可将组织放于70%酒精中过夜。 5. 透明：将脱水后组织直接浸入二甲苯透明剂中（二甲苯Ⅰ, 二甲苯Ⅱ），每次透明

为10min。 6. 浸蜡：常规制片常用熔点高于56℃以上的石蜡，普通采用56℃-58℃石蜡。先将组

织浸入软蜡Ⅰ1h左右, 再浸入软蜡Ⅱ40min；硬蜡Ⅰ40min, 硬蜡Ⅱ1h。（一般浸蜡时间为3-4h）软蜡熔点为45℃-50℃，硬蜡熔点为55℃-60℃。 7. 包埋：将蜡液注入包埋硬具中，迅速将组织块平放入蜡液中，摆正并铺平，然后移

至冷却台，使组织块同蜡液凝固在一起的过程。（硬蜡凝固定型）

石蜡切片法：

在切片前应先切去标本周围过多的石蜡（此过程称为“

小鼠眼球标本石蜡切片技术的探索与改进

目的 眼球组织结构特殊，从眼球壁各层组织到晶状体、玻璃体，软硬程度各不相同，连接性差，如果采用普通的石蜡切片步骤，会造成各层分离，尤其是视网膜的脱离，难以制作出完整的眼球石蜡切片。而且动物标本与人的标本存在一定程度的差异，动物的组织比人的组织柔软，含水量多，在石蜡制片过程中操作不当容易出现组织块变脆，影响切片，因此小鼠的石蜡切片不能完全按照人的石蜡切片程序来进行。我们实验室通过对小鼠石蜡切片制作方法的多次探索，总结出一些特别用于小鼠眼球的石蜡切片技术改进方法。方法 BALB/c小鼠20只，拉颈处死，无菌条件下手术摘除眼球并做好标记。与普通组织标本不同的是，小鼠眼球石蜡切片的第一步是固定，小鼠眼球离体以后，由于质地太软，不能立即进行取材，否则会造成眼球各部分变形和眼内容物的脱出。所以需要先经过固定液的固定。经过对各种固定液的尝试，我们认为采用冰醋酸、甲醛、生理盐水和75%乙醇按照1:2:7:10的比例混合而成的固定液对于制片效果较好。固定时间为24小时。固定后进行取材。将眼球标本置于水平方位，沿视神经的上方和下方，从眼球后壁向角膜分别剖开。组织脱水采用乙醇脱水：将标本分别经过70%、80%、90%、95%、

四川友谊医院

作业指导书 SOP 常规石蜡包埋组织制片 制备标准操作流程 文件编号：SOP-BL-01-02 版本：A/0

常规石蜡包埋组织制片制备

标准操作流程

1)制备程序 1．水洗。 2．脱水。 3．透明。 4．浸蜡。 5．包埋。 6．切片。

2)注意事项

组织切片制备及其HE染色过程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蜡等为易燃、有毒物，必须专人管理，2m以内不得有明火，局部环境应有良好的通风和消防设施。

3)常规切片的手工操作

1．水洗 用流水冲洗已经固定的组织块30min。 2．脱水(常温下)

(1)乙醇—甲醛(AF)液固定：60～120min。 (2)80％乙醇：60～120min。 (3)95％乙醇I：60～120min。 (4)95％乙醇Ⅱ：60～120min。 (5)无水乙醇I：30～60min。 (6)无水乙醇Ⅱ：30～60min。 (7)无水乙醇Ⅲ：30～60min。

注意事项：①未经充分固定的组织不得进入脱水程序；②用于脱水的试剂容积应为组织块总体积的5～l0倍以上；③自低浓度乙醇向高浓度乙醇逐级移进脱水；④脱水试剂应及时过滤、更换(500ml乙

石蜡切片制作

一、苏木精-伊红对染法

——paraffin section

一、器材及试剂： 1. 器材：

切片刀，切片机，恒温箱，蜡杯，酒精灯，解剖刀，解剖剪，解剖盘，培养皿，镊子，单面刀片，毛笔，包埋盒，染色缸，盖玻片，载玻片，玻片盘，树胶，树胶瓶，显微镜，温度计，脸盆，水浴锅。

切片机，切片刀，温台，恒温箱，解剖刀，镊子，剪刀，解剖针，单面刀片，小台木，洒精灯，包埋纸盒，染色缸，烧杯，水盆，熔蜡炉，蜡杯。 2．试剂：

中性福尔马林固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、蜂蜡、苏木精染液， 1%伊红酒精溶液，1%盐酸酒精溶液，甘油蛋白粘片剂，中性树胶。 卡诺（Carnoy）固定液，埃利希苏木精染液，1%伊红酒精溶液，1%盐酸乙醇液，各级酒精（30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%），二甲苯，中性树胶。 3. 材料：

鼠肝、肾、心肌、骨骼肌或其他组织、大豆或小麦、绿豆、洋葱、大蒜、蚕豆的根、茎、叶等。 二、实验原理：

石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法）是组织切片最常用的染色

篇一：石蜡切片技术实验报告 题目：石蜡切片技术实验报告

学院：农学院，专业：植物学，姓名：张永丰，学号：2011202010 目的

掌握石蜡切片技术，为以后的科研中切出合格的实验装片做准备。并观察植物叶的横切面内部结构。

材料：已经固定好的女贞叶 方法与操作步骤

一、 脱水：依次使用下列浓度的乙醇脱水

50%乙醇—70%乙醇—85%乙醇—95%乙醇—100%乙醇—100%乙醇 每步两个小时。 二、 透明：依次通过下列试剂进行透明

1、1/2无水乙醇1/2二甲苯（加少许番红粉末，对材料进行附染）两个小时 2、二甲苯两个小时 3、二甲苯一个小时

三、 浸蜡：浸蜡步骤如下 1、将材料瓶中的二甲苯取出1/2，加入剩余二甲苯的体积3/2倍的石蜡液于36℃温箱中处理35小时

2、换用纯石蜡液于60℃温箱中处理2小时，再换一次纯石蜡液处理2小时 四、 包埋与切片

1、在提前准备好的纸盒中放入少量蜡液。

2、片刻后放入材料，避免形成断层还要注意材料摆放的位置和方向。 3、及时将蜡块冷却，防治形成结晶。

4、修块与粘连：将多余的石蜡切除，使蜡块成为梯形；将蜡块一正确的方向粘连在枕木上。 5、切片：利用切片机将蜡块切成薄片。切片厚度为8～10μm，以每分

篇一：卵巢保养话术

卵巢保养销售及话术

一. 认识卵巢并了解卵巢的重要性:

1. 卵巢是女性的荷尔蒙主要来源地约占总量的80%;

2. 卵巢是女性的生殖器官,位于子宫两侧,左右各一个.大约在脐下3

寸旁开3寸;

3. 主要分泌三种性激素:其中雌激素75.4%,雄激素14.8%,孕激素

9.8%,它们分别作用于:发育.身材.皮肤.心情.怀孕.分娩.哺乳.月经及各种女性疾病.而每种激素分泌量过高或过低均会在这些方便产生不同的影响.

(1).其中雌激素分泌量过高则会出现面部长斑.皱纹,皮肤干燥;腰腹部长赘肉,易发胸腺疾病及妇科疾病;

(2).雄激素是有部分雌激素转换而来,其量偏高则会出现面部长痘,暗疮.油脂分泌过旺,毛孔粗大;身材发育迟缓女性特征表现不够突出,毛发粗重;

(3)孕激素其分泌量过高易导致流产,过少则会造成不易怀孕;

4.产生并排出卵子,成年女性每月只会排出一到两个成熟的卵子;

5.保持女性体态的优美;

6.保持女性身心健康;

7.保持青春容颜,改善色斑,暗疮,稳定平衡身体的内部环境,以内养外.

8.是女性最主要的性器官,维持性生活的和谐.

脸是卵巢的镜子,卵巢是女人的花根!!!

二. 卵巢”早衰”的主要因素:

1. 与月经每月不规则变化有关;

2. 与生育有关;

3. 心理

石蜡切片制作

一、苏木精-伊红对染法

——paraffin section

一、器材及试剂： 1. 器材：

切片刀，切片机，恒温箱，蜡杯，酒精灯，解剖刀，解剖剪，解剖盘，培养皿，镊子，单面刀片，毛笔，包埋盒，染色缸，盖玻片，载玻片，玻片盘，树胶，树胶瓶，显微镜，温度计，脸盆，水浴锅。

切片机，切片刀，温台，恒温箱，解剖刀，镊子，剪刀，解剖针，单面刀片，小台木，洒精灯，包埋纸盒，染色缸，烧杯，水盆，熔蜡炉，蜡杯。 2．试剂：

中性福尔马林固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、蜂蜡、苏木精染液， 1%伊红酒精溶液，1%盐酸酒精溶液，甘油蛋白粘片剂，中性树胶。 卡诺（Carnoy）固定液，埃利希苏木精染液，1%伊红酒精溶液，1%盐酸乙醇液，各级酒精（30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%），二甲苯，中性树胶。 3. 材料：

鼠肝、肾、心肌、骨骼肌或其他组织、大豆或小麦、绿豆、洋葱、大蒜、蚕豆的根、茎、叶等。 二、实验原理：

石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法）是组织切片最常用的染色

卵巢良性肿瘤（经腹腔镜单侧卵巢囊肿

剥除术）临床路径

一、卵巢良性肿瘤（经腹腔镜单侧卵巢囊肿剥除术）临床路径标准住院流程

（一）适用对象。

第一诊断为卵巢良性肿瘤（ICD-10：D27）

行经腹腔镜单侧卵巢囊肿剥除术（ICD-9-CM-3： 65.25002）（含腹腔镜单侧卵巢病损切除术）

（二）诊断依据。

根据《临床诊疗指南-妇产科学分册》（中华医学会编著，人民卫生出版社）

1.妇科检查提示。

2.盆腔超声或CT或MRI提示。 （三）治疗方案的选择。

根据《临床诊疗指南-妇产科学分册》（中华医学会编著，人民卫生出版社）

1. 肿块直径小于5cm，疑为瘤样病变，肿瘤生长缓慢，未婚未育，可做短期观察；

2.手术方式：单侧卵巢肿瘤剥除术或附件切除术。 3.手术途径：经腹腔镜或开腹。 （四）标准住院日为≤10天。 （五）进入路径标准。

1.第一诊断符合ICD-10:D27卵巢良性肿瘤疾病编码。

2.符合手术适应证，无手术禁忌证。

3.当患者同时具有其他疾病诊断，但在住院期间不需要特殊处理也不影响第一诊断的临床路径流程实施时，可以进入路径。

（六）术前准备（术前评估）2天。 1.所必须的检查项目：

（1）血常规、尿常规、大便常规；

（2）肝肾功能、电