大鼠三种鞘内置管术的效果比较

更新时间:2023-05-31 12:09:01 阅读量: 实用文档 文档下载

说明:文章内容仅供预览,部分内容可能不全。下载后的文档,内容与下面显示的完全一致。下载之前请确认下面内容是否您想要的,是否完整无缺。

252

生望壁璧堂盘查丝!!堡!旦筮垫鲞筮!塑垡垡!』皇!堂型生!旦!型盟垫!!!!垡:塑!堕!:!

大鼠三种鞘内置管术的效果比较

章沿锋张小沼姚尚龙

鞘内置管术为鞘内连续给药和收集脑脊液提供了便利,且便于行为学的观察,在动物实验中应用广泛。1976年Yaksh等…报道了经寰枕膜鞘内置管术,但该方法存在术后死亡率和瘫痪率高等弊端乜剖;此后相继出现了经胸段鞘内置管术和经腰段鞘内置管术mJ,均具有置管位置准确和并发症少等优点,但是也存在缺点,如经胸段鞘内置管术操作复杂。本研究拟比较大鼠经寰枕膜鞘内置管术、经胸段鞘内置管术和经腰段鞘内置管术的效果,为实验研究提供参考。

材料与方法

实验动物及分组

雄性SD大鼠180只,体重180。

250

g,由华中科技大学同济医学院动物中心提供。随机分

为3组(n=60),A组行经寰枕膜鞘内置管术;B组行经胸段鞘内置管术;C组行经腰段鞘内置管术。实验期间大鼠饲养于20一24℃环境中,昼夜交替,自由摄取水和食物。饲养7d

后开始实验,实验前禁食水24

h。

鞘内导管的制备导管由两部分组成。穿刺端为10

cm

长的32

G聚氨基甲酸酯导管(内径0.12删,外径0.35衄,

Instech

Solomon公司,美国),非穿刺端为8cm长的聚乙烯

PE.20导管(内径0.38mm,外径1.09

mm,Instech

Solomon公

司,美国)。将穿刺端导管的一端塞入非穿刺端导管的管腔内,再用塑料胶将连接部分封闭、粘连在一起。导管的容积约为15

m。用直径为0.08舢的不锈钢丝作为导芯。导管

及导芯用75%酒精消毒后备用。

操作过程吸入异氟醚麻醉下,各组分别进行鞘内置管术。A组参照Yaksh等…介绍的方法经寰枕膜向尾端鞘内置管约8.0—8.5cm,使其尖端位于腰膨大处。B组参照Pooh等【41介绍的方法经胸段鞘内置管,大鼠取俯卧位,胸部垫高,从TI到k约3

cmx

2啪的矩形区域备皮消毒后铺巾。在

Tl。至Ll棘突之间作2cm长的皮肤纵切口,切开筋膜,分离肌肉,显示TI,椎体。使用骨膜分离器的锐利端在Tl,椎体的左侧椎板上钻一2

mm×2

mm小孔,直至见到硬膜,以22

针穿破硬脊膜,可见清亮的脑脊液外溢。将L形缝线导引器向尾端轻轻插入鞘内,导管顺着引导器缓慢进入1.5.

2.0

cm,直至其尖端位于腰膨大处,再将导管上的硅胶头(既

可固定导管又可标记鞘内导管长度)锚定于椎板上的小孔。

DOI:10.3760/cma.j.issn.0254-1416.2010.02.040

作者单位:430022武汉市,华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科

通信作者:姚尚龙。Email:YAO-Shanglong@yahoo.㈣.∞

其他

退出缝线导引器,并在小孔上涂抹少量组织胶。然后将肌肉外导管绕成小环并用4.0缝线固定在肌肉和筋膜上,以防止鞘内导管的位移和缓冲导管的张力。C组参照Jasmin等b1介绍的方法经腰段鞘内置管,将22G穿刺针向头端穿刺,针尖位于k—s1间隙处,针体与大鼠脊柱约呈200。穿破肌肉、黄韧带及硬脊膜,大鼠出现甩尾动作,说明穿刺针已经进入鞘内。经针体上的缺口置入导管,方向与脊柱纵轴平行,导管插入约4cm,使其尖端位于腰膨大处。三组于置管后注入生理盐水20出冲洗导管,如置管处有脑脊液外溢,则缝合漏口,封闭导管远端以防脑脊液外溢。参照Jasmin等[51介绍

的方法将导管远端经皮下隧道置于体侧,以金属保护罩保护其末端。最后逐层缝合切口,肌肉注射青霉素3—4万u,防止感染。

项目观察(1)记录手术时间和术后7d内死亡、瘫痪、脑脊液渗漏、膀胱功能障碍(尿失禁或尿潴留)和自残行为

(咬鼠尾、后肢等行为)的发生情况。(2)计算术后7d时大鼠的体重增长幅度。(3)分别于术后4、5、6和7d时使用Rot眦眦“系统(ColumbusInstruments公司,美国)测定运动功能恢复情况【2】,RotamexTM系统为一个逐渐增加转速的旋转踏板(从3.7r/rain到37.5r/rain),可记录大鼠在踏板停留时间,术后瘫痪大鼠不进行测定,计算踏板停留时间恢复率(测定值/基础值×100%)。(4)参照文献[6.7]介绍的方法测定鞘内注射利多卡因对感觉和运动功能的影响。术后3d取未发生瘫痪的动物,经30s鞘内注射2%利多卡因5m,然后再注射10一生理盐水和5止空气,注药后5min内测定感觉和运动功能,将大鼠置于玻璃板上,使用7370型热痛阈测定仪(UGOBasline公司,意大利)照射大鼠足跖底中部,记录从照射到缩爪反应的时间为缩爪潜伏期(PWL),双足均进行测定,每侧测定3次,每次间隔1.5min,取其平均值。大鼠后爪杵状收缩或,和后肢不能站立为发生了运动麻痹。(5)参照文献[8]介绍的方法判断导管尖端的位置。术后7d完成其他实验后,腹腔注射戊巴比妥钠50mg/kg麻醉下,鞘内先后注入5出亚甲蓝和lOm生理盐水,开胸,经主动脉灌注固定后,经L.。椎间盘切断脊柱,由该节段向下寻找导管尖端,记录水平面上导管尖端位于背侧的情况。

统计学处理采用SPSS13.0统计学软件进行分析,计

量资料以均数±标准差(i±s)表示,组间比较采用单因素方差分析,组内比较采用重复测量设计的方差分析,计数资料比较采用z2检验,等级资料比较采用Ridit分析。P<0.05为差异有统计学意义。

主堡盎醛堂盘查丝!Q堡!旦箜垫鲞整;塑

鲤!』皇些些鲤盟!旦啦垫!!:型:箜:盟!:;

C组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。

253

A组、B组和c组导管尖端位于背侧的发生率分别为

28%、43%和37%,B组和C组高于A组(P<O.05),B组与

A组、B组和C组死亡的大鼠分别为10、2和0只,死亡

’率分别为17%、13%和0,均在术后1d死亡。A组、B组和C组手术时间分别为73士13、51±12和(32±8)rain。与A组比较,B组和c组死亡率降低,手术时间缩短(P<O.05);与B组比较,C组手术时间缩短(P<0.05)。与A组比较,B组和C组瘫痪率、脑脊液渗漏、膀胱功能障碍、自残行为的发生率降低,体重增长幅度升高(P<0.05),见表1。

袭1三组大鼠术后并发症发生率及体重增长幅度的比较

本实验对经腰段鞘内置管术的方法参照文献[5]进行了改良,改良内容包括:(1)导管末端以金属罩保护,并固定于体侧,可防止其与笼子顶部的撞击和钩挂,且允许多只大鼠混合圈养,从而节约样本。(2)以更细、更短和带有斜面的穿刺针引导置管,使损伤程度减轻,有助于降低术后并发症的发生机率;将导管绕成环形固定于肌肉和筋膜上,可充分地缓解导管的张力。(3)穿刺端导管以32G聚氨基甲酸酯导管代替PE-10导管,32G聚氨基甲酸酯导管的直径更细,可降低脊髓和神经根损伤的机率。

鞘内置管术后常见的并发症主要发生在术后1—7

dHl,

因此本研究记录术后7d内并发症的发生情况。本实验结果表明,与经胸段鞘内置管术和经腰段鞘内置管术比较,经寰枕膜鞘内置管术后并发症发生率和死亡率较高,运动功能

注:与A组比较,‘P<O.05

恢复较差,其原因为:经寰枕膜鞘内置管术时导管在鞘内需穿行8.0。8.5cm,增加了导管损伤脊髓和神经根的机率归1。本研究中经寰枕膜鞘内置管术后大鼠体重增长缓慢,可能与颈部伤UI疼痛程度较高、脊髓或神经根损伤等影响摄食有关。本研究结果表明,经胸段鞘内置管术和经腰段鞘内置管术的手术时间短于经寰枕膜鞘内置管术,提示经胸段鞘内置管术和经腰段鞘内置管术的操作较简单。

导管尖端的位置是决定鞘内给药后能否扩散到目标位置(腰膨大)的关键因素,在水平面上导管尖端位于背侧时药物更容易扩散至目标位置no】。Dobos等№1的研究中以鞘内注射利多卡因对感觉和运动功能的影响来判断导管尖端的位置,结果表明,100鸺是适宜剂量,因此本研究选择该剂

B组和C组术后4、5、6和7d时踏板停留时间恢复率高于A组(P<0.05),B组与C组间比较差异无统计学意义(P>O.05);三组术后7d时踏板停留时问恢复率高于术后

d时(P<0.05),见表2。

襄2三组大鼠术后不同时点踏板停留时间恢复率的

比较(%,i士s)

注:与A组比较,‘P<O.05与4d时比较,‘P<O.05量。本研究结果表明,B组和c组鞘内注射利多卡因后PWL较长,运动麻痹程度较高,提示导管尖端位于背侧的发生率较高,且在水平面上B组和C组导管尖端位于背侧的发生率较高,即经胸段鞘内置管位置术和经腰段鞘内置管术置管位置的准确性高于经寰枕膜鞘内置管术,其原因为:经寰枕膜鞘内置管术时导管在鞘内穿行的距离较长,导致导管尖端偏向左侧、右侧或腹侧的机率升高。

综上所述,与经寰枕膜鞘内置管术比较,经胸段鞘内置管术和经腰段鞘内置管术后大鼠并发症的发生率及死亡率降低,操作较简单,运动功能恢复较快,且置管位置准确性较

与A组比较,B组和c组鞘内注射利多卡因后PWL延长,后肢运动麻痹程度升高(P<O.05);B组与C组间比较差异无统计学意义(P>0.05),见表3,4。

表4三组鞘内注射利多卡因后运动麻痹程度的比较(只)

注:与A组比较,‘P<0.05

袭3三组大鼠鞘内注射利多卡因后阿L的比较(只)

注:与A组比较,‘P<O.05

主堡盎璧堂盘查垫!垒生!旦整塑鲞筮!塑垡坚!』皇!堂墅型!曼盟型!堕垫!!:!堕:垫:坠:!

高;因此建议实验研究中采用经胸段鞘内置管术或经腰段鞘内置管术。

参考文献

[1】

YakshTL,RudyTA.Chronicrachnoid

space.Physiol

catheterization

of

rL

JNeuro∞iMethods,2001,110(1-2):81-89.

K,Kekosi

G,eta1.1'№significance

ofintrathecal

引1J¨1J

Dobos

I,Toth

catheterlocationinrats.Anosth

Amlg,2003,96(2):487-492.

lumbar

of

puncture

Xu耵,WallaBC,DiazMF,era1.Intermittent

for

in

the叫halⅢha

引1J

曲:n

Asatu

novelmethodthe

experimental

studyopioidtolerance.

Behav,1976,17(6):1031-1036.

AnosthAnalg,2006,103(3):714—720.

F,BufferM,BlombergH,et

[2]TsangBK,liez,MaT,eta1.Decreasedparalysisandbettermotor

with

a1.Distributionofintrathecal

coordinationpainstudy

mlcrospinal

verlsul¥PEIOintrathecalcathetersin

catheterpositionsinrat.ActaAnaeathesiol611.

rL

Scand,2001,45(5):608

rats.An∞th

A瑚】g,1997,84(3):591—594.

[3]KristeosenJD,PostC,Gordh

and

Jr,ma1.Spinal

cord

nra'phology

of

Storkson

RV,KjorsvikA,Tjohen

subarachnoid

space

A,eta1.Lumbarin

the

catheterization

Methods。

antinoeieeption

afterchronicintrathecaladministration

ofthespinalrat.JNeurosci

excitatoryaminoacid316.

antagonists

inthe

rat.Pain,1993,54(3):309—

[叫1996.65(2):167.172.

Oobos

I。TothK,Kekesi

G,eta1.n”significance

ofintrathecal

[4]PoonYY,Chang

AY,KoSF,at

a1.An

improvedprocedure

in

the

for

rat.

catheterlocationinrats.Anesth

A∞19,2003。96(2):487-492.

(收稿日期:2009-06一09)(本文编辑:刘玉华)

catheterizationofthe

thoracic8伽nalsubarachnoidspace

Anesth^nalg,2005,101(1):155-160.

[5]Jasmin

L,Ohara

PT.Long-termimMthec8l

catheterizationinthe

rat.

疼痛诊疗与研究

急性心肌缺血大鼠背根神经节吗啡肽.2水平的变化

丁建英

蒲栋

张志军

郭政

Ascent酶标仪(ThermoFisher公司,美国)。

动物选择及分组健康成年雄性sD大鼠90只(山西医科大学动物中心提供),体重270。300g,随机分为3组(t/,=30):对照组(C组)、假手术组(s组)和急性心肌缺血组(AMI组)。S组仅穿线但不结扎冠状动脉;AMI组穿线后结扎冠状动脉左前降支。

心肌缺血模型的制备

腹腔注射乌拉坦1.2g,l【g麻醉

吗啡肽一2(EM.2)是”受体的特异性内源性配体,是体内重要的痛觉调节物质,可以抑制伤害性刺激的上传。急性心肌缺血可诱发心肌代谢功能障碍,还可诱发心绞痛,这种伤害性刺激沿内脏感觉神经纤维向中枢传递,引起轴突释放含有神经肽的囊泡,使伤害性感受器敏感化…。背根神经节是伤害性信息由外周向中枢传人的第一级神经元。本研究拟评价急性心肌缺血大鼠背根神经节EM.2水平的变化。

材料与方法

主要试剂和仪器EM.2一抗(PhoenixPharmaceuticals公司,美国),SABC免疫组化染色试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司),DAB显色试剂盒(北京中山生物技术公司),EM.2ELISA试剂盒(PhoenixPharmaceuticals公司,美国),Leica

CM.

后固定于实验台,气管切开插管行人工机械通气(通气频率75次/rain,潮气量8ml/kg),开胸后切开心包,以左冠状静脉主干为标志,在左心耳下方2mm处进针,用0/6手术用无损伤线穿过心肌表层肌肉,在肺动脉圆锥旁出针,结扎冠状动脉左前降支,左前壁心肌变为暗红色,Ⅱ导联心电图出现ST-T改变,证明急性心肌缺血模型制备成功,逐层关胸,负压吸引,脱离呼吸机后即刻自行恢复自主呼吸。每小时经尾静脉补充生理盐水l

ml。

1850恒冷箱切片机(Leica公司,德国),IDA-2000数码显微图像分析系统(中国科学院北京空海科技发展有限公司),BX-51型显微镜(TKO光学仪器株式会社,日本),JY92.IIDN超声波细胞粉碎机(宁波新芝生物科技股份有限公司),Multiskan

EM.2表达的检测分别于结扎冠状动脉左前降支后

0.5、1、3和6h(TJ。.)时再次开胸,经左心室插管快速灌注

4℃生理盐水约100ml(待上、下腔静脉流出的液体由红色变

DOI:10.3760/ema.j.isan.0254-1416.2010.02.041

为清亮时停止);然后灌注4℃4%多聚甲醛约300—400将胸段脊髓T1.,及其两侧的背根神经节取出,置于4

ml。

基金项目:国家自然科学基金(30471656)

作者单位:030001太原市中心医院麻醉科(丁建英、蒲栋)。心血管内科(张志军);山西医科大学第二医院麻醉科(郭政)

通信作者:郭政,030001太原市,山西医科大学第二医院麻醉科,

oC4%

多聚甲醛中固定3h,然后移入40C30%蔗糖中脱水24h。冰冻切片包埋剂包埋后,用Leica恒冷箱切片机做20pm厚连续冠状冰冻切片。采用SABC法行免疫组织化学染色、DAB显色。随机观察60个高倍视野(×,too),使用BX-51型显微

Email:ykd蕊z004@yahoo.Ⅷ.∞

大鼠三种鞘内置管术的效果比较

作者:作者单位:刊名:英文刊名:年,卷(期):

章沿锋, 张小洺, 姚尚龙

华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科,武汉市,430022中华麻醉学杂志

CHINESE JOURNAL OF ANESTHESIOLOGY2010,30(2)

参考文献(10条)

1.Tsang BK;He Z;Ma T Decreased paralysis and better motor coordination with microspinal versus PE10intrathecal catheters in pain study rats 1997(03)

2.Yaksh TL;Rudy TA Chronic catheterization of the spinal subarachnoid space 1976(06)3.Dobos I;Toth K;Kekesi G The significance of intrathecal catheter location in rats 2003(02)4.Storkson RV;Kjorsvik A;Tjolsen A Lumbar catheterization of the spinal subarachnoid space in therat 1996(02)

5.Asato F;Butler M;Blomberg H Distribution of intrathecal catheter positions in rat[外文期刊]2001(05)

6.Xu JJ;Walla BC;Diaz MF;er al Intermittent lumbar puncture in rats:a novel method for theexperimental study of opinid tolerance 2006(03)

7.Dobos I;Toth K;Kekesi G The significance of intrathecal catheter location in rats 2003(02)8.Jasmin L;Ohara PT Long-term intrathecal catheterization in the rat 2001(1-2)

9.Poon YY;Chang AY;Ko SF An improved procedure for catheterization of the thoracic spinalsubarachnoid space in the rat 2005(01)

10.Kristensen JD;Post C;Gordh T Jr Spinal cord morphology and antinociception after chronicintrathecal administration of excitatory amino acid antagonists in the rat 1993(03)

本文链接:/Periodical_zhmzxzz98201002042.aspx

本文来源:https://www.bwwdw.com/article/ziu4.html

Top