选修一2.3分解纤维素的微生物的分离学案

盘锦大洼高级中学 天才就是无止境刻苦勤苦的能力

选择培养（可以省略） 目的： ，

大洼高中高三生物一轮复习学案 选修一第二章2.3分解纤维素的微生物的分离

制作人 张洪芬 审核人 高三生物组 适用范围 高三实验班 使用日期：

【教学目标】１、简述纤维素酶的种类和作用 ２、从土壤中分离出分解纤维素的微生物 【教学重难点】从土壤中分离出分解纤维素的微生物 【教学内容】

以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。 梯度稀释 依次将培养液稀释10～10倍

将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上

涂布平板：将稀释度为10～10的菌悬液各取0．1 mL 涂布在平板培养基上，30℃倒置培养。 挑选产生 的菌落

阅读资料三“刚果红染色法”，填表比较两种染色法的各自的优缺点

是 、 。 染色法 优点 缺点 4

6

1

7

基础知识

（一）纤维素与纤维素酶

1．纤维素的化学组成： 三种元素，是一种 糖。

2．纤维素的分布： 是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木 材、作物秸秆等也富含纤维素。

阅读资料三“刚果红染色法”，填表比较两种染色法的各自的优缺点： 显示出的颜色基本上就是纤维素分加入刚果红时会造成杂方法一 解菌的作用，不存在假阳性 菌混杂 〖思考5〗为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？ 方法二 操作简单不存在菌落混杂的问题 可能出现假阳性现象 四：结果分析与评价 3．纤维素酶的作用：纤维素酶是一种 ，一般认为它至少包括三种组分，即 酶、 酶 酶，前两种酶使纤维素分解成 ，第三种酶将纤维二糖分解成 。 （二）纤维素分解菌的筛选 1．筛选方法： 染色法。

2．筛选原理：刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成 ，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，当纤维素被 分解后，红色复合物无法形成，出现以 为中心的 ，我们可以通过 来筛选纤维素分解菌。 3.常用的刚果红染色法有两种

(1)先 再加入 进行颜色反应。 (2)在 时就加入刚果红。 二、试验设计

（一）分解纤维素的微生物的分离的试验流程

土壤取样 采集土样时，应选择富含 的环境。

1

1为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行 实验，纤维素酶的发酵方法有 发酵和 发酵。

2纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的 含量进行定量测定。

五、其他

① 培养基加入 ，鉴别大肠杆菌，菌落黑色，带金属光泽。 ②培养基加入 ，鉴别纤维素分解菌，出现 反应。

鉴别培养基 ③在以尿素为唯一氮源的培养基上加入 指示剂，如果PH升高，指示剂将变

色。

练习

1、下列对分离纤维素分解菌实验的说法错误的是 A．通常采用刚果红染色法筛选纤维素分解菌

B．从土壤中分离含量较多的微生物时，选择培养可以省略 C．该实验用到选择和鉴别培养基

D．在用刚果红染色法中，若将微生物培养在事先加入刚果红的培养基上，出现透明圈的菌落肯定为所需菌种

2、下列是分解成纤维二糖的酶是（ ）

A.C1酶和CX酶 B.C1酶和葡萄糖苷酶

C.CX酶和葡萄糖苷酶 D.C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶

盘锦大洼高级中学 天才就是无止境刻苦勤苦的能力

3、配制的培养基成分是:纤维素粉、NaNO3、Na2HPO4、KH2PO4、MgSO4、KCl、酵母膏、水解酪素，①制备培养基时 ②梯度稀释时 ③倒平板时 ④涂布时 ⑤长出菌落时 该培养基能使下面哪种微生物大量繁殖（ ） A.酵母菌 B.自生固氮菌 C.各种细菌 D.纤维素分解菌

4、用添加纤维素和刚果红的培养基培养纤维素分解菌，结果是（ ） A.菌落的周围出现红色 B.菌落的周围出现紫色 C.菌落的周围出现蓝色 D.菌落的周围出现透明圈 5、下列是分离土壤中纤维素分解菌的方法是（ ）

①稀释倒平板法 ②涂布平板法 ③单细胞挑取法 ④选择培养分离 A.①② B.②③④ C.②③ D.①③④

6、在纤维素分解菌发酵产生纤维素酶浓度的检测实验中，实验变量和因变量分别是（ A.加入葡萄糖还是蒸馏水、纤维素酶的浓度 B.加入葡萄糖还是蒸馏水、纤维素的浓度

C.加入纤维素分解菌的发酵液还是蒸馏水、葡萄糖含量的变化 D.加入纤维素分解菌的发酵液还是蒸馏水、纤维素酶的浓度

7、秸秆处理是解决农村环境问题的关键措施，以下做法没有直接涉及微生物作用的是（ A.秸秆还田

B.加工为青饲料饲喂牛羊，被其消化利用 C.投入沼气池生产沼气

D.粉碎后与纤维素酶混合加工为生产生物能源的原料 8、下列关于纤维素酶的叙述中，错误的是（ ） A.纤维素酶只有一种，只能将纤维素分解为葡萄糖

B.纤维素酶是一种复合酶，至少包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三种 C.纤维素可被纤维素酶水解成葡萄糖，为微生物提供营养物质

D.分解纤维素的细菌、真菌和放线菌，都是通过产生纤维素酶来分解纤维素的 9、下列对纤维素的描述中，不正确的是（ ） A.纤维素是由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物

B.纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，是因为这些微生物能产生纤维素酶 C.植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素

D.自然界中的各种生物均能把纤维素分解成葡萄糖，从而作为生物体的能量来源 10、下列对纤维素酶分解作用的验证实验的描述，错误的是（ ） A.可用报纸、复印纸来代替滤纸条 B.两支试管中所加缓冲液的量相等

C.在一定范围内，滤纸条的分解速度会随着纤维素酶含量的增加而加快 D.振荡会加快滤纸条的分解

11、下列分离纤维素分解菌的实验过程中，操作有误的是（ ） A.经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 B.选择培养这一步可省略，但培养的纤维素分解菌少 C.经稀释培养后，用刚果红染色

D.对照组可用等量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上

12、在做分离分解纤维素细菌的实验中，加入刚果红应该在（ ）

A.①③ B.②⑤ C.③⑤ D.④⑤

13、分离出的微生物还要进行鉴定，而微生物的鉴定需要鉴别培养基，下列不属于鉴别培养基的是 A.加入酚红的培养基 B.加入刚果红的培养基 C.加入伊红—美蓝的培养基 D.加入纤维素粉的培养基

14、下列关于纤维素分解菌的选择培养的叙述，正确的是（ ） A.可以增加纤维素分解菌的浓度 B.可以减少纤维素分解菌的浓度 C.所用培养基是固体培养基 D.所用培养基是平板培养基

15、关于分解纤维素的细菌的分离和纯化操作的叙述中，不正确的是（ ） A.在地表下面3～8cm处的土壤中取样

） B.要用只含有纤维素的液体选择培养基进行选择培养 C.要用酚红培养基进行进一步鉴定 D.要用稀释涂布平板法进行接种

16、要测定纤维素酶的活性时，下列常用来的方法是（ ） A.对纤维素进行定量测定

）。 B.对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定 C.对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定 D.对纤维素分解菌进行定量测定

17、某实验小组欲从土壤中筛选出能分解淀粉的芽孢杆菌。下列叙述不正确的是（ ） A.采样与培养：称量1g土样置于刚配制的液体培养基中，30℃振荡培养 B.接种：为避免培养液中菌体浓度过高，需经过系列稀释后接种 C.选择：所用的固体培养基中作为唯一碳源的是淀粉

D.筛选：将适量的碘液滴加到平板中的菌落周围，出现透明圈的说明此种菌能分解淀粉

18、“筛选”是分离和培养生物新类型常用的手段，以下有关技术中不能筛选成功的是（ ） A．在全营养的培养基中，筛选大肠杆菌

B．在尿素固体培养基中，筛选能够分解尿素的微生物

C．用纤维素为唯一碳的培养基，筛选能够分解纤维素的微生物 D．在培养基中加入不同浓度的氯化钠，筛选抗盐突变体植物

19.下列是从土壤中筛选出，能高效分解纤维素的微生物的实验流程，请回答以下问题：

（1）选择培养使用的培养基是以 为唯一碳源，该培基是 （固体或液体）培养基。（2）鉴别纤维素分解菌的培养基中应加入 染料，它可以与纤维素形成 色复合物，最终应挑选透明圆的 （大或小）的菌落进行纯化培养。（3）实验中对培养基进行灭菌常用的方法是 。挑选菌落前，对接种环的灭菌方法是 。（4）上述实验中，接种操作都应在火焰附近进行，以防止 。

2

盘锦大洼高级中学 天才就是无止境刻苦勤苦的能力

参考答案 １.D 2、A 3、D 4、D 5、B 6、C 7、D 8、A 9、D 10、B 11、A 12、C 13、D 14、A 15、C 16、B 17、A 18、A 19、

【答案】（1）纤维素 杂菌污染

液体 （2）刚果红 红 大 （3）高压蒸汽灭菌 灼烧灭菌

参考答案 １.D 2、A 3、D 4、D 5、B 6、C 7、D 8、A 9、D 10、B 11、A 12、C 13、D 14、A 15、C 16、B 17、A 18、A 19、

4）【答案】（1）纤维素杂菌污染

3

液体 （2）刚果红 红 大 （3）高压蒸汽灭菌灼烧灭菌4） （ （

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/z6rp.html