注射用香菇多糖含量测定检验方法学确认方案2013.03.25

注射用香菇多糖含量测定 检验方法学确认方案

文件编号：VP-4F119MV-00

2013年03月

南京绿叶思科药业有限公司 Nanjing Luye Sike Pharmaceutical Co.,Ltd

南京绿叶思科药业有限公司

验证方案审批表

方案名称： 方案编号：

注射用香菇多糖含量测定检验方法学确认方案 VP-4F119MV-00

方案起草 部 门 姓 名 签 名 日 期 质管部

王峰 方案审核 部 门 姓 名 签 名 日 期 质管部 质管部 质管部 质管部 质管部 *** /

杨红艳 王志华 张 飞 冯 晶 余 冬 *** / / / 方案批准 部 门 姓 名 签 名 日 期 /

卓亚红 年 月 日

颁发日期：

目 录

1. 概述 ....................................................................................................................................... 1 2. 目的 ....................................................................................................................................... 1 3. 范围 ....................................................................................................................................... 1 4. 风险评估 ............................................................................................................................... 1 5. 计划确认时间 ....................................................................................................................... 1 6. 确认人员与职责 ................................................................................................................... 1 7. 确认前准备 ........................................................................................................................... 1 8. 确认内容 ............................................................................................................................... 2 9. 可接受标准 ........................................................................................................................... 3 10. 偏差、变更与异常情况 ..................................................................................................... 4 11. 综合分析与结果评价 ......................................................................................................... 4 12. 确认结论与监测建议 ......................................................................................................... 4 13. 再确认周期 ......................................................................................................................... 4 14. 附件 ..................................................................................................................................... 4

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1. 概述

1.1 现行的注射用香菇多糖质量标准为国家食品药品监督管理局标准YBH01742012。为了确认标准中含量测定采用的检验方法在本公司质管部实验室条件下的适用性，特制定本确认方案。

1.2 确认类型：方法学确认。 2. 目的

确认国家食品药品监督管理局标准YBH01742012中的注射用香菇多糖含量测定检验方法在本公司质管部实验室条件下的适用性。 3. 范围

本确认方案适用于注射用香菇多糖含量测定方法在本公司质管部实验室的方法学确认。 4. 风险评估

4.1 本方案实施过程中质量风险评估如下： 编号 风险 验证小组成员未按照本方案规定的程序、方法和步骤实施验证。 验证小组成员未按照本方案规定的文件执行。 影响 影响验证结果的科学性和有效性。 S P 风险等级 确认活动 验证实施前对验证小组成员进行本方案培训，并在关键步骤验证实施过程中进行复核。 验证实施前组织验证小组成员对相关文件进行确认，并在关键步骤验证实施过程中进行复核。 1 3 1 中 2 影响验证结果的科学性和有效性。 3 1 中 注：S: 严重性 P:可能性 5. 计划确认时间

本确认方案计划于2013 年03月25日至 2013年03月27日在QC实验室实施。 6. 确认人员与职责 6.1 确认小组组长 姓名 王峰 部门 质管部 岗位 QC 验证职责 负责确认方案的起草；负责对确认小组成员进行本方案的培训；负责组织按照本方案实施确认；负责确认过程中的异常、偏差报告和方案变更申请；负责起草确认报告。 6.2确认小组成员 姓名 顾赛男 部门 质管部 岗位 QC 验证职责 负责实施确认活动，收集确认数据、资料及文件 7. 确认前准备

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7.1 参与确认人员的培训

验证开始前由验证小组组长组织对验证小组所有成员进行本方案的培训，并做好培训记录。

（见附表一：人员培训记录）。 7.2 确认相关文件

7.2.1 相关法规、规范和指南

●注射用香菇多糖质量标准（国家食品药品监督管理局标准YBH01742012） ●《中国药典》（2010版）（药品质量标准分析方法验证指导原则） ●《药品生产质量管理规范》（2010年修订）

●《药品GMP指南》（2011年版）（质量控制实验室与物料系统） 7.2.2 公司相关管理规程

● 验证文件管理规程（SMP-QA-030） ● 验证程序管理规程（SMP-QA-032）

● 检验方法验证、确认和转移管理规程（SMP- QC-039） 7.2.3 确认必备的操作规程

无。

7.2.4 相关质量标准、检验操作规程和检验仪器操作规程

●注射用香菇多糖内控质量标准 （QS-QA-104） ●注射用香菇多糖检验操作规程 （SOP-QC-104）

● METTLER-TOLEDO XS105分析天平操作规程（SOP-EM-519） ● DZF6050型真空干燥箱操作维护保养规程 (SOP-EM-510) （见附表二：文件确认记录）。 7.3 仪器仪表有效性确认

确认本方案实施过程中需用到的仪器仪表是否经过校验合格并在有效期内。 （见附表三：仪器仪表有效性确认记录）。 8. 确认内容 8.1 检验方法描述

对照品溶液：取经五氧化二磷减压干燥至恒重的香菇多糖对照品10mg，精密称定，加0.5mol/L氢氧化钠溶液1ml，研磨使溶解，用水分次转移至20ml量瓶中，加甘露醇1.0g，加水溶解并稀释至刻度、摇匀。精密量取该溶液3ml至25ml量瓶中，加6mol/L

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硫酸溶液2.5ml，摇匀，密塞，至水浴中，准确反应40分钟后，取出，放冷，加酚酞指示液1滴，用30%氢氧化钠溶液调至微红色，加水稀释至刻度，摇匀。

供试品溶液：取供试品5支，分别精密加入2ml水使溶解，合并混匀，精密量取该溶液3ml至25ml量瓶中，加6mol/L硫酸溶液2.5ml，摇匀，密塞，至水浴中，准确反应40分钟后，取出，放冷，加酚酞指示液1滴，用30%氢氧化钠溶液调至微红色，加水稀释至刻度，摇匀。

精密量取上述对照品溶液与供试品溶液各10ml，分别置碘量瓶中，精密加碱性硫酸铜溶液[取无水碳酸钠与酒石酸钾钠各25g，加水约800ml使溶解，在不断搅拌下，通过长颈漏斗加入10%硫酸铜溶液75ml至容器底部，再加碳酸氢钠20g,碘化钾5g,搅拌使溶解，移至1000ml量瓶中，加碘酸钾溶液（称取碘酸钾35.7g，加水溶解使成1000ml,摇匀）25ml，用水稀释至刻度，摇匀。放置过夜，备用]5ml，摇匀，将碘瓶置水浴中，准确计时15分钟，迅速移出碘瓶，立即在流动水中冷却，沿瓶壁加草酸钾-碘化钾溶液（取草酸钾﹑碘化钾各2.5g,加水溶解使成100ml，临用前新制）2ml(以上操作切勿振摇)，加1mol/L硫酸溶液3ml，加塞，置冷水浴中充分振摇至氧化亚铜沉淀全部溶解，用硫代硫酸钠滴定液（0.005mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液5滴，继续滴定至蓝色消失。另取水10ml，照上述方法测定，作为空白。按下式计算含量：

(V0?VT)?S?100% 计算公式：含量（%）=

(V0?VS)?0.6式中：V0：空白消耗硫代硫酸钠滴定液的体积，ml；

VT：供试品消耗硫代硫酸钠滴定液的体积，ml； Vs：对照品消耗硫代硫酸钠滴定液的体积，ml； S：10 ml对照品溶液含对照品的重量，mg； 0.6：10 ml供试品溶液含供试品的标示量，mg。

8.2 方法确认

由两名检验人员分别独立对同一批样品进行检验，具体方法按照8. 1项下进行。 以上确认内容的结果记录于附表四：确认结果记录。 9. 可接受标准 9.1检验方法确认

每名检验人员4份结果的RSD不得过2.5%，两名检验人员8份结果的RSD不得过2.5%。

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10. 偏差、变更与异常情况

在确认过程中，如发现任何异常情况，应按照《验证程序管理规程》（SMP-QA-032）规定的流程进行处理，并将处理情况统计于《异常情况统计表》（附表五）中；如该异常情况被确定为偏差，应按照《验证程序管理规程》（SMP-QA-032）规定的流程进行偏差处理，并将偏差情况统计于《偏差统计表》（附表六）中。

在确认过程中，如需对方案进行变更，应按照《验证程序管理规程》（SMP-QA-032）规定的流程进行审批后培训执行，并将变更情况统计于《方案变更统计表》（附表七）中；

确认过程中产生的任何异常情况处理记录、偏差处理记录和验证方案变更记录等应附于验证报告中。 11. 综合分析与结果评价

确认报告起草完成后由验证小组组长对验证报告进行评价，填写《验证报告评价表》（附表十），主要评价内容如下：

◆确认方案是否有变更，验证是否严格按照批准的方案执行； ◆确认过程是否出现异常情况或偏差，是否调查处理完毕并已关闭； ◆ 确认报告和记录是否完整； ◆ 确认结果是否符合方案设定的标准；

◆ 根据确认结果，决定是否需要制定相关文件或对相关文件进行修订，同时列出需要修订的文件名称、编号和版本号；

◆ 根据方案实施过程中是否出现因培训原因造成的人为偏差，对方案培训效果评价。

12. 确认结论和监测建议

确认小组根据确认过程和结果提出确认结论和日常监测建议，报验证委员会审批，由验证委员会决定本次确认是否有效和是否发放验证合格证书。 13. 再确认周期

确认小组根据确认过程和结果，拟定再确认周期，报验证委员会审批。 14. 附件

附表一：人员培训记录 附表二：文件确认记录

附表三：仪器/仪表有效性确认记录

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附表四：确认结果记录 附表五：异常情况统计表 附表六：偏差统计表 附表七：方案变更统计表 附表八：验证报告评价表

文件编号：VP-4F119MV-00 第 5 页 共 5页

附表一：

人员培训记录 验证项目名称：注射用香菇多糖含量检验方法确认

验证项目编号：VA-4F119MV-00 第1页 共1页

培训主题： 主讲人： 培训部门： 培训方式： 培训内容： 培训时间： 培训地点： 所在部门 □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： 本人签名 所在部门 □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： 本人签名 所在部门 □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： 本人签名 □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： □质管部 □生产部 □工程部 □物料部 其它： 备注：

附表二：

文件确认记录 验证项目名称：注射用香菇多糖含量测定检验方法学确认

验证项目编号：VA-4F119MV-00 第1页 共1页

序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 结论： 确认人/日期：

文件名称 文件编号 存放处 复核人/日期：

附表三：

仪器/仪表有效性确认记录 验证项目名称：注射用香菇多糖含量测定检验方法学确认

验证项目编号：VA-4F119MV-00 第1页 共1页

序号 1 2 3 4 5 仪器/仪表/设备名称 计量编号 有效期至 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 结论： 确认人/日期：

复核人/日期：

附表四：

确认结果记录 验证项目名称：注射用香菇多糖含量测定检验方法学确认

验证项目编号：VA-4F119MV-00 第1页 共3页

室温： ℃，湿度： %。

仪器： 电子天平，仪器编号： ，滴定管编号： 。

香菇多糖对照品：批号： ，来源： ，含量： 。 硫代硫酸钠滴定液浓度： mol/L，标定日期： ，配制批号： 。 草酸钾-碘化钾溶液的配制：称取一水合草酸钾（试剂编号 ） g、碘化钾（试剂编号 ） g，加水适量使溶解，并稀释成 ml，摇匀。

淀粉指示液（0.5%）的配制：称取可溶性淀粉（试剂编号 ） g，加水5ml搅匀后，缓缓倾入100ml沸水中，随加随搅拌，继续煮沸2min，放冷，倾取上层清液，即得。 其他溶液、试液、指示液及配制批号：

0.5mol/L氢氧化钠溶液： ，30%氢氧化钠溶液： ， 碱性硫酸铜溶液： ，酚酞指示液： ， 6mol/L硫酸溶液： ，1mol/L硫酸溶液： 。 检测结果： 对照品重(mg) S (mg) 空白消耗 滴定液体积(ml) 平均 供试品消耗 滴定液体积(ml) 对照品消耗 滴定液体积(ml)

含量1（%）＝ ×100% ＝

含量2（%）＝ ×100% ＝

含量3（%）＝ ×100% ＝

附表四：

确认结果记录 验证项目名称：注射用香菇多糖含量测定检验方法学确认

验证项目编号：VA-4F119MV-00 第2页 共3页

含量4（%）＝ ×100% ＝

含量平均值（%）＝ RSD（%）＝

检验人/日期 复核人/日期 第二人检验结果

室温： ℃，湿度： %。

仪器： 电子天平，仪器编号： ，滴定管编号： 。

香菇多糖对照品：批号： ，来源： ，含量： 。 草酸钾-碘化钾溶液的配制：称取一水合草酸钾（试剂编号 ） g、碘化钾（试剂编号 ） g，加水适量使溶解，并稀释成 ml，摇匀。

淀粉指示液（0.5%）的配制：称取可溶性淀粉（试剂编号 ） g，加水5ml搅匀后，缓缓倾入100ml沸水中，随加随搅拌，继续煮沸2min，放冷，倾取上层清液，即得。 其他溶液、试液、指示液及配制批号：

0.5mol/L氢氧化钠溶液： ，30%氢氧化钠溶液： ， 碱性硫酸铜溶液： ，酚酞指示液： ， 6mol/L硫酸溶液： ，1mol/L硫酸溶液： 。 检测结果： 对照品重(mg) S (mg) 空白消耗 滴定液体积(ml) 平均 供试品消耗 滴定液体积(ml) 对照品消耗 滴定液体积(ml)

含量1（%）＝ ×100% ＝

附表四：

确认结果记录 验证项目名称：注射用香菇多糖含量测定检验方法学确认

验证项目编号：VA-4F119MV-00 第3页 共3页

含量2（%）＝ ×100% ＝

含量3（%）＝ ×100% ＝

含量4（%）＝ ×100% ＝

含量平均值（%）＝ RSD（%）＝

两人供试品含量8份结果的RSD为

可接受标准：每名检验人员4份结果的RSD不得过2.5%，两名检验人员8份结果的RSD不得过2.5%

结论：□符合规定 □不符合规定

检验人/日期 复核人/日期

附表五：

异常情况统计表 验证项目名称：注射用香菇多糖含量测定检验方法学确认

验证项目编号：VA-4F119MV-00 第1页 共1页

序号 发生日期 异常情况描述 处理情况 1 2 3 4 5 备注： 统计人/日期：

复核人/日期：

附表六：

偏差统计表 验证项目名称：注射用香菇多糖含量测定检验方法学确认

验证项目编号：VA-4F119MV-00 第1页 共1页

序号 偏差编号 发生日期 是否关闭 偏差概述 1 2 3 4 5 备注： 统计人/日期：

复核人/日期：

附表七：

方案变更统计表 验证项目名称：注射用香菇多糖含量测定检验方法学确认

验证项目编号：VA-4F119MV-00 第1页 共1页

序号 申请日期 批准日期 变更前内容 变更后内容 1 2 3 4 5 备注： 统计人/日期：

复核人/日期：

附表八：

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验证报告评价表

验证报告名称 验证报告编号 评价项目 1 验证方案执行情况 评价标准 是否按批准的方案实施验证 是否无变更 2 验证方案变更情况 有变更，是否按规定程序审批 验证过程 异常情况和偏差 验证报告与记录 验证结果 是否无验证异常和偏差 有异常和偏差，是否调查处理完毕并已关闭 是否完整 是否符合设定的合格标准 未出现因培训原因造成的执行偏离 6 培训效果评价 出现因培训原因造成的执行偏离，已纠偏 评价结论： 与该验证项目有关的文件评价： 评价人（验证组长）： 年 月 日 结 论 是 否 3 4 5

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