两种人脐静脉内皮细胞培养方法的比较

两种人脐静脉内皮细胞培养方法的比较 作者：王燕 王君 龚坚 王汉琴

来源：《中外医学研究》2013年第02期

【摘要】 目的：用两种不同的方法培养人脐静脉内皮细胞，比较两种方法的优缺点。方法：（1）方法1，用0.125%胰酶加0.02%的EDTA消化液消化、方离脐静脉内皮细胞，用含20%的胎牛血清的DMEM完全培养液，于37 ℃、5% CO2条件下培养。（2）方法2，用胶原酶Ⅱ消化脐静脉内皮细胞，用含20%胎牛血清+细胞生长因子+明胶铺板，于37 ℃、5% CO2条件下培养。比较两种方法对细胞活力、培养细胞数量等方面的影响。结果：以改良方法培养的内皮细胞4 h贴壁生长，细胞数量达到整瓶的80%～90%，48～72 h生长最快，细胞融合，内皮细胞呈单层铺路石样外观。传统方法培养的内皮细胞24 h后细胞数量只达到整瓶的20%～30%，细胞融合较慢。结论：用0.125%胰酶加0.02%的EDTA灌注脐静脉消化内皮细胞是获取内皮细胞的一种好方法，更加简便、经济，是建立稳定的人脐静脉内皮细胞分离和培养的好方法。

【关键词】 人脐静脉内皮细胞； 消化液； 培养方法

中图分类号 R446 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2013）2-0038-02

人脐静脉内皮细胞为位于血管内壁与血液直接接触的单层细胞。内皮功能失常可破坏血管壁凝血和循环功能障碍，与多种疾病发生密切相关，血管细胞的研究因此成为动脉粥样硬化以及其他血管疾病研究的重要方向[1-2]。人们常用脐静脉作为获取血管内皮细胞的来源。本研究利用健康婴儿脐带，分别采用改良方法和传统方法来获取内皮细胞，结果发现细胞数量和细胞活力都出现不同的效果。

1 材料与方法

1.1 实验材料及主要试剂、仪器

1.1.1 材料 足月健康出生的新生儿脐带由太和医院妇产科提供，产妇及其家属签署知情同意书。

1.1.2 主要试剂 M199培养基，胎牛血清（Hyclone公司），胰蛋白酶，EDTA（国产，武汉天源生物技术有限公司），胶原酶Ⅱ（Amresco公司）

1.1.3 仪器 倒置显微镜（Olympus公司，日本），恒温恒湿培养箱（Thermo公司，美国）

1.2 实验方法

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/yig4.html