中药鉴别中常用的方法

1. 中药鉴别中常用的方法是什么？为什么？

十九世纪至二十世纪，中药鉴别最常用的“四大鉴定”。

1.基原鉴定，即中药的原植(动)物鉴定,是应用生物分类学鉴定中药的生物学来源,确定其正确的学名,这是中药鉴定工作的基础。

2.性状鉴定，性状鉴定就是应用看、摸、闻、尝等方法,对中药的性状,包括形状、 大小、色泽、表面、质地、断面、气味等特征进行观察,作为鉴别的依据,它是我 国中医药工作者长期的丰富经验的总结,具有简单、快速、直观的特点,性状鉴别主要是观察完整的药材及饮片。

3.，显微鉴定，生药的显微鉴定主要是利用显微观察植(动)物生药内部的细胞、组织结构及细胞内含物,描述显微特征,制定显微鉴别的依据以鉴定真品、类似品或用品的一种方法。通常应用于单凭性状不易识别的生药,性状相似不易区别的多来源生药、破碎生药、粉末生药,以及用粉末、生药制成的丸散片丹等，中药成分制剂的鉴定。显微鉴定是一种专门技术,需要有植物解剖、植物显微化学的基本知识和显微 切片的制作技术,显微鉴定也是鉴定中成药丸散片丹和制定品质标准的科学方法之一,对保证中成药的质量,有一定的科学意义和应用价值。

4.理化鉴定，是利用中药所含化学成分的某些物理性质或化学反应对中药进行 定性和定量分析,一般应用于含不同化学成分、性状相似而又无明显显微鉴定特征的药材。

常用的现代中药鉴别方法：

由于物理、化学、生物学和计算机的加速发展使仪器分析的手段不断更新,紫外、 红外、气相、高效液相、核磁共振、扫描电子显微镜、计算机图象处理分析、各种电泳、同功酶分析法、分子生物学技术、X射线衍射技术、差热分析技术、聚类分析法等均被吸收到中药鉴别的方法中来,大大的丰富了中药鉴别方法,形成了以“四大鉴别”法为基础,以理化分析为重点,逐步适应中药现代化并利于中药走向世界的一套更为科学、完善、先进的中药鉴别体系。

1.色谱法。色谱法是20世纪初产生，于60年代开始用于中药分析,经逐步完善最后列入1977年中国药典,并在以后各版药典的中药和成方制剂中的应用比例 迅速上升,成为中药鉴别的最主要的方法之一。其理论基础是上述的层析法,根据色谱法的分离方法可为纸色谱法、薄层色谱法、柱色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法。

（1）薄层色谱法(TLC)。薄层色谱法用于生药主要成分的定量测定,具有用量少, 方法简便,适用范围广,重现性好等特点,除可将薄层上主要成分斑点刮取,经溶剂洗脱后进行测定外,也可在薄层柱上直接测定含量。当前应用较多的是薄层扫描法(TLCS),由于不必洗脱等操作,因而方便快速,测量灵敏度高。

（2）高效液相色谱法(HPLC)。HPLC法由于具有分离效能高,分析速度快等优点, 近期已广为普及用于中药的定量分析,在中药的定性鉴别中亦能发挥很好的作用。 （3）气相色谱法(GC)。气相色谱法的流动相为气体,称为载气,通常多用氮气,具有高效、高选择性、高灵敏度、用量少、分析速度快等优点。对于一些具有挥发性成分的中药鉴别能发挥独特的优点。如将气相色谱与质谱联用(GC/MC),将经气相分离的成分直接输入质谱仪进行定性鉴别,这样不但可知道不同中药中挥 发性成分的差别,而且可知道两者相同或相差的成分名称。

2.光谱法，选择某一波段波长，以此通过中药的粉末或提取液,测定中药对这一波段波长的吸收并记录其吸收光谱,此为光谱鉴定中药的原理。

（1）紫外光谱(UV)鉴定法，该法是根据中药所含成分的不饱和程度有差异,因而导致其紫外吸收曲线的形态、峰位、峰强度亦异而以此达到鉴别的目的紫外光谱具有较高的灵敏度,因此,可用来检查中药制剂的纯度和杂质的限量,是控制中药制剂质量的重要手段,利用杂质的特征吸收,可以很灵敏的检测出微量杂质(10-5

g)的存在或控制主成分的纯度。多溶剂紫外光谱法:在使用紫外光谱鉴定中药时发现,一些亲缘关系较近的药材,由于成分相差不大,用通常的紫外光谱难以达到鉴别的目的,则可采用多溶剂紫外吸收,通过综合比较其图谱的差异,亦可获得较好的鉴别效果。

（2）红外光谱法(IR)。红外光谱属于分子吸收光谱,在中药鉴别中具有制样简单, 实验快和图谱具有指纹性等优点，故应用较广。

（3）荧光光谱法(FP)，中药所含的某些成分在紫外光照射下吸收一定波长的能量后,又发射出比吸收光的波长更长的光即荧光,用荧光分析仪记录在特定波长 照射下各中药相同溶剂的提取液发射的荧光光谱,并比较其区别,也可达到中药

鉴别的目的荧光法和薄层法相结合,即将中药提取液先经薄层展开,再将薄层板 置于365nm或 254nm波长荧光下观察,比较其斑点荧光的颜色和展开距离或将薄 层板置于薄层扫描仪内,用适当的激发和发射波长进行扫描,可以得到各中药的荧光扫描

图用于鉴别,这类方法对于一些含有能发射荧光成分的药材尤为适用。

（4）核磁共振法(NMR)，类似于红外和紫外光谱,是另一种形式的吸收光谱,在波长为10~100m的无线电频率区域的电磁波照射分子,可引起分子中某种核的能 级跃迁,使原子核从低能态跃迁到高能态,此即核磁共振。由于中药中的组分太复杂,通常选用某一溶剂的特征提取物进行分析,获得该中药的HNMR指纹图。

（5）质谱法(MS）。质谱是按照带电粒子(即离子)的质量对电荷的比值大小依次排列形成的谱图,当中药提取液分子在质谱仪的离子源中以某种方式电离后,所形成的正离子在高压电场作用下加速飞行,此时含有不同质量的离子束,经过质量分析,按质量与电荷比值的大小顺序依次排列,然后采用照相方式或电学方式记录,即可得到质谱图。不同中药提取液所含成分不同,所得质谱图显示的分子离子基峰及进一步的裂解碎片峰亦不一致,可资鉴别。本法准确、灵敏,对提取液中主要成分的含量要求较高,实验费用亦较大,能否作为常用检测方法尚待继续探索。

3.差热分析法(DTA)。研究样品及参比物在相同环境下等速加温时,两者的温度与时间或与加热温度的变化关系,分析的结果用热谱图表示。比较两者热图谱的差 异,以达到鉴别中药的目的,该法样品用量少,只需数毫克或数十毫克,故对贵重药材尤为适宜, 此外对于同属不同种间的中药鉴别也有很大帮助。

4.随机扩增DNA法(RAPD)。不同种的生物甚至同种不同居群的植物,其DNA序列无法不相同,这为用DNA分析技术鉴定中药提供了可能。

5.扫描电镜技术(SEM)。利用扫描电子显微镜的高分辨率,观察立体感强,样品制作简单的特点,对细小药材及叶类药材进行鉴别

6.电泳法.依据中药中的一些带电荷的成分如有机酸、蛋白质、多肽、氨基酸、生物碱和酶等，在一定程度的电场中,在相同时间内,因各中药所含成分的电荷性 质(正电和负电),电荷量和分子量等不同,造成各成分的泳动方向,速度和距离 等也不同,结合谱带条数和染色结果不同,从而达到鉴别中药的目的。按电泳操作中支持物的不同,可分为纸电泳,聚丙烯酞胺硅胶电泳,醋酸纤维薄膜电泳等,其中聚丙烯酰胺法在中药鉴别中应用较多,该法所需试验设备简单,专属性强,灵敏度高。电泳法对含多肽和蛋白质类成分有差异的中药鉴别有较突出的优势，然而本法较易受实验条件的影响,故必须严格把握实验条件的一致性。

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