常用溶液的配置

试剂配制

（1）液体LB培养基（-） 蛋白胨 酵母提取物 氯化钠

去离子水溶解并定容至 高压灭菌，4℃保存。

（2）氨苄青霉素溶液（100mg/ml） 氨苄青霉素

去离子水溶解并定容至 过滤除菌，-20℃分装保存。 （3）卡那霉素溶液（100mg/ml） 卡那霉素

去离子水溶解并定容至 过滤除菌，-20℃分装保存。 （4）固体LB培养基（-） 蛋白胨 酵母提取物 氯化钠 琼脂糖粉

去离子水溶解并定容至 （5）含抗生素 LB 固体培养基 固体LB培养基溶液

10ml 1g 10ml 10ml 1g 10ml 1000ml 10g 5g 10g 15g 1000ml 1000ml 1000ml 1000ml 10g 5g 10g 1000ml

高压灭菌后铺平板（6cm培养皿），冷却后4℃保存。

高压灭菌, 当培养基降温至50℃左右，加入终浓度为 100μg/ml的氨苄青霉素或 100μg/ml 卡那霉素，并铺平板（6cm培养皿），冷却后， 4℃保存。

（6）0.1M CaCl2溶液—制备感受态 氯化钙

去离子水溶解，定容至 高压灭菌后4℃保存。

（7）0.1M MgCl2溶液---制备感受态 氯化镁

去离子水溶解，定容至 高压灭菌后4℃保存。

1000ml 11.099g 1000ml 1000ml 9.521g 1000ml

（8）0.1M CaCl2-15%甘油溶液----制备感受态 氯化钙 50%甘油

去离子水溶解，定容至 高压灭菌后4℃保存。 （9）50％甘油溶液 甘油 去离子水

（10）0.5M EDTA溶液(PH=8.0) EDTA

（11）10%SDS溶液 SDS

去离子水溶解，定容至100ml。 （12）5M乙酸钾溶液 5M乙酸钾

去离子水溶解，定容至100ml，室温保存。 （13）1MTris-HCl溶液（pH=8.0） Tris碱

（14）50×TAE溶液 Tris碱 冰乙酸 0.5M EDTA

加去离子水溶解定容至100ml，室温保存。 （15）1% 琼脂糖凝胶溶液 琼脂糖粉 1×TAE

（16）碱裂解液I（P1 液） 葡萄糖

1MTris-HCl（pH=8.0） 0.5M EDTA（pH=8.0） 加去离子水至 高压灭菌后4℃保存。 （17）碱裂解液 II（P2 液）

1000ml 9.521g 300ml 1000ml 100ml 50ml 50ml 500ml 93.05g 100ml 10g 100ml 49.07g 100ml 12.1g 100ml 242g 51.7ml 100ml 500ml 5g 500ml 200ml 1.8g 5ml 4ml 200ml 200ml

去离子水溶解，NaOH调PH至8.0，定容至500ml。

去离子水溶解，定容至100ml，浓盐酸调pH值至8.0，室温保存。

微波炉中高火加热3-5min，存放于50℃电热鼓风干燥箱。

10M NaOH 10%SDS

高压灭菌后4℃保存。 （18）碱裂解液 III（P3 液） 5M 乙酸钾 冰乙酸 加去离子水至 高压灭菌后4℃保存。

（19）溴化乙锭（EB）溶液（10mg/ml） EB

去离子水溶解，定容至10ml，避光室温保存。 （20）1×PBS溶液

NaCl KCl Na2HPO4 KH2PO4 （21）细胞培养基 高糖DMEM培养基 FBS

青霉素/链霉素

（22）2×SDS蛋白裂解液 1MTris-HCl（pH=6.8） 甘油 10％SDS

加去离子水至10ml，室温保存。 （23）2×SDS上样缓冲液 1MTris-HCl（pH=6.8） 甘油 10％SDS 1％溴酚蓝 β-巯基乙醇

加去离子水至10ml，分装后室温保存。 （24）1.5MTris-HCl溶液（PH=8.8） Tris碱

4ml 20ml 200ml 120ml 23ml 200ml 10ml 100mg 1000ml 8g 0.2g 1.44g 0.24g 500ml 450ml 50ml

5ml，4℃保存。 10ml 1ml 2ml 4ml 10ml 1ml 2ml 4ml 2ml 0.15ml 100ml 18.2g

去离子水溶解，10M NaOH调PH=7.4，定容至1000ml，灭菌后室温保存。

加入10M HCl 7ml调整PH到8.8，加去离子水定容到100ml，室温储存。 （25）1.0MTris-HCl溶液（PH=6.8） Tris碱

（26）10%APS溶液 APS 去离子水

（27）10％SDS溶液 SDS

加去离子水定容至 （28）30%丙烯酰胺溶液 丙烯酰胺

N,N-亚甲基双丙烯酰胺 加去离子水定容至 （29）10×电泳缓冲液 Tris碱 甘氨酸 SDS

（30）10×转膜液 甘氨酸 Tris碱

（31）1×转膜液 10×转膜液 甲醇 去离子水

（32）10×TBS溶液 Tris碱 NaCl

（33）0.1%TBST溶液 1×TBS Tween-20

（34）5%脱脂奶粉

100ml 12.1g 10ml 1g

10ml，4℃保存。 100ml 10g

100ml，室温保存 100ml 29g 1g

100ml，4℃避光保存 1000ml 30g 108g 10g 1000ml 144g 30g 1000ml 100ml 200ml

700ml，室温保存。 1000ml 25.6g 87.5g 1000ml 1000ml

1ml，室温保存。 40ml

加入10MHCl 12ml调整PH到6.8，加去离子水定容到100ml，室温储存。

加入10M HCl 9ml调整PH值到8.3，加去离子水定容到1000ml，室温保存。

加入HCl调整PH值到8.3，加去离子水定容到1000ml，室温保存。

加入HCl调整PH到7.4，加去离子水定容到1000ml，室温保存。

伊利高蛋白脱脂高钙奶粉

加0.1%TBST溶液定容至40ml，4℃保存。 （35）0.1M PMSF溶液 PMSF 异丙醇

（36）stripping buffer 氯化钠 乙酸

加去离子水至 （37）1×PDL溶液 PDL原液 无菌去离子水 （38）G418溶液 G418

加无菌去离子水至

0.22μm一次性滤器过滤后分装，-20℃保存。 （39）0.2%PBST溶液—免疫荧光用 Triton X-100 1×PBS

（40）封闭液PBSB—免疫荧光用 BSA 山羊血清 0.2%PBST

（41）100×DAPI溶液 DAPI

（42）1×DAPI溶液 100×DAPI溶液 去离子水

（43）4％多聚甲醛 多聚甲醛 1×PBS

（44）10% NP-40溶液 NP-40

2g 1ml 17.42mg

1ml，-20℃保存。 500ml 15g 17.5ml

500ml，室温保存。 20ml 1ml

19ml，4℃保存。 100mg/ml 1g 10ml

250ml 500μl

250ml，室温保存 10ml 300mg 500μl

10ml，4℃保存。 200μg/ml 1mg 2μg/ml 0.1ml

10ml，4℃避光保存。 1mg 4g 90ml 100ml 10ml

加去离子水定容至5ml，分装成0.1ml，-20℃避光保存。

60℃搅拌溶解6小时，调pH值于7.4，定容到100ml，4℃保存。

加去离子水至

100ml，4℃保存。

（45）RIPA裂解液 10% NP-40 甘油

0.5M EDTA (PH=8.0)

加1×PBS溶液定容到20ml，4℃保存。 （46）PBS lysis buffer-GST pull down溶液 1×PBS Triton X-100

（47）GST pull down buffer 1M Tris-Cl（PH =8.0） 5M NaCl 0.5M EDTA 甘油 10%NP-40

加去离子水定容至50ml。 （48）考马斯亮蓝溶液 考马斯亮蓝G250 甲醇 冰醋酸 （49）脱色液 甲醇 冰醋酸 去离子水

（50）100mM IPTG溶液 IPTG

10ml 1ml 1ml 20μl 50ml 49.5ml 0.5ml 50ml 1ml 2ml 1ml 5ml 2.5ml 1000ml 1g 450ml 100ml 1000ml 100ml 100ml 800ml 100ml 2.383g

去离子水定容至1000ml，过滤器除去染渣，室温贮存。

加去离子水至100ml，0.22μm滤器过滤，分装，-20℃保存。

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