中药血清药理学研究方法探讨与思考-黄峰

综述,药理学

中药血清药理学研究方法探讨及 思考

黄峰 中药学 2110948107

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中药血清药理学定义中药血清药理学是指将中药或中药复方经口给动物 灌服一定时间后采集动物血液，分离血清，用含有 药物成分的血清进行体外实验的一种实验技术。

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中药血清药理学研究方法动物模型的选择 动物给药方案确定 确定采血时间 含药血清的预处理和保存

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动物模型的选择 实验动物选择 选择动物时应尽量选与人类生物特性近似 的物种，制备血清的动物应与获取离体器官、 组织细胞的动物相一致，从而缩小或避免动 物血清之间以及动物血清和人类血清之问在 理化、生物等特性上的差异，提高实验结果 的可靠性。 离体组织(细胞)选择 应尽可能减少因动物种属差异而造成的免 疫反应。因此，在体外培养实验中宜采用同 种单一血清，既为细胞提供营养，又为药物 载体，还避免了多种血清的干扰。

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动物给药方案

给药前禁食

给药途径

给药剂量

给药次数与 时间间隔

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给药前禁食饮食可能影响中药复方体内动力学和临床疗 效。如食物对口服小柴胡汤者体内甘草甜素、 甘草次酸和黄芩素等的吸收影响明显。 因此应根据中药复方的功效特点、实验要 求，决定给药前禁食与否，并拟订给药后采血 时间。目前，给药前实验动物多禁食6—12h, 不禁水。

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给药途径一般在制备含药血清时，供体动物的给药途径应该与临床 给药途径一致，以避免由于给药途径的不同带来结果的差异.

目前中药复方多用口服(灌胃)给药来制备含药血清

由于中药新剂型不断产生，在实验中也可根据实际情况，尝 试使用注射、粘膜、呼吸道等给药途径制备含药血清。

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给药剂量(1)以参考公式(给药剂量=临床常用量× 动物等效面积系数×培养基内血清稀释度) 计算给药剂量。 (2)增大给药剂量，即给药剂量=在体实 验的给药剂量×反应体系中被稀释倍数(同 上述所提参考公式)。 (3)按新药药理研究的技术要求设计剂量 给药，将含药血清制成冷冻干燥粉，以冻 干粉形式加人反应体系使其达到所需浓度。

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给药次数与时间间隔关于给药次数与时间间隔的想法主要是根据药代动力学理论，以 固定给药时间间隔，相同剂量多次重复给药后血药浓度达到稳态， 并将在稳态下不同采血时间取得的含药血清进行实验。 目前常用的方法有：1次给药或间隔2~4小时给药，或1天1~3次， 连续3~l0天。 证实同一给药方案连续数日给药较1次给药有明显差异，主要与

药物诱导机体产生内源性生物活性物质有关，主张多次给药.国内很多学者提出每天给药3次，连续5—7天的给药法

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采血时间(1)理

想的采血时间应该在血药浓度的高峰期。 根据实验动物消化生理特点和中药吸收转化特点 确定取血时间范围。如大鼠一般l~2小时可达血 药浓度峰值，此时血清即为含药血清；时间延长 将有部分药物组分发生转化，成为药物代谢血清。 一般采血时间多集中在末次给药后30min~3小时 间。

(2)对不同时间分别采血进行预实验， 将不同时间的含药血清进行比较后再确定 采血时间。

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含药血清的处理和保存含药血清的处理①丙酮法：向血清内加入4~5倍量丙酮， 混匀，于3000 r/min离心，取上清液温 水浴上蒸发，除去丙酮；

②乙醇法：向血清内加人4~5倍95%乙醇， 混匀，于3000 r/min离心，取上清液温水 浴上蒸发，除去乙醇；

③ 加温法：56℃ 水浴上放置30min。

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含药血清的保存研究发现含药血清经长期低温保存(-20℃, 2个月)后药效显著降低(P<O.01),提示含药血 清在保存过程中其中药有效成分会发生分解等 变化，致使药效成分含量显著降低，即使低温 冷冻保存仍影响其药效。 故进行血清药理学试验时宜使用新鲜灭活或保 存时问较短的含药血清。

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存在问题与研究的难点① 不同种属、不同年龄的动物对药物吸收有一定差 异，从而影响到血清中含药成分及其含量。因给 药剂量、采血时间不同，血清中含药成分及其含 量也不尽相同，故必须充分把握好给药剂量及采 血时间； ②在药理研究方法方面主要还, 存在血浆药理方法 和血清药理方法之争。 ③含药血清在体外反应体系中，血清药物浓度被稀 释问题，特别是中药复方制剂中微量成分及蛋白 结合率较高的成分，给药物检测和药理实验提出 了难题；

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存在问题与研究的难点④含药血清制备：实验动物没有采用病理模型制备 动物血清；血清时效、量效关系的确定有待于进 一步探讨； ⑤含药血清对离体系统同样有干扰，如血清本身对 体外酶活性的影响。

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中药血清药理学研究方法的几点设想3.1 含药血浆与含药血清平行对比观察； 3.2 含药血清和中药粗制品协同研究； 3.3 离体试验和在体试验并行离体实验条件易控制， 可以排除体内干扰，但由于体内外的环境不同，体内 外的细胞功能不完全相同。 3.4 血清药理学、血清药化学、药物动力学同步迄今 含药血清试验方法偏重于药效研究，没有对血清中有 效成分作更深层次的分析，尚缺乏对血清中所含药 物成分的定性、定量分析，其在体内的代谢过程也未 知。

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