耐盐好氧反硝化菌筛选及其反硝化特性的研究

第３４卷第６期

２０１１年６月

ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ

杯诧尉鹳敢求

Ｖ０１．３４Ｎｏ．６

Ｊｉｍ．２０１１

李静，王文文。梁磊，等．耐盐好氧反硝化菌筛选及其反硝化特性的研究阿．环境科学与技术，２０１１，３４（６）：４８＿５２．ＬｉＪｉｎｇ，ＷａｎｇＷｅｎ—ｗｅｎ，ＬｉａｎｇＬｅｉ，ｅｔａ１．ＳｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆａｅｒｏｂｉｃｄｅｎｌｔｒｉｆｙｉｎｇｂａｃｔｅｒｉａｗｉｔｌＩｓａｌｔｔｏｌｅｒａｎｃｅａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆａｅｒｏｂｉｃｄｅｎｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１１，３４（６）：镐－５２．

耐盐好氧反硝化菌筛选及其反硝化特性的研究

李静１，

王文文ｔ，

梁磊２，

冯文清３

（１．广东轻工职业技术学院，广东广州５１０３００；２．广州甘蔗糖业研究所，广东广州５１０３１６；

３．广州奥桑味精食品有限公司，广东广州５１０２８０）

摘要：为了筛选耐盐好氧反硝化菌，对活性污泥进行耐盐与好氧反硝化驯化后，分离得到具有很强反硝化能力的菌株ＧＱ—４２。经菌落形态特征观察、生理生化测定及１６ＳｒＤＮＡ测序及同源性比较等过程，鉴定为蜡状芽孢杆菌。通过对菌株６Ｑ－４２进行反硝化特性的研究，确定适宜的反硝化条件为：碳氮比ｔ＞６，温度２６－３８ｏＣ，ｐＨ６．０－８．０，溶解氧浓度５．４－－８．５ｍｇ／Ｌ，盐度≤１５０擘儿。在此条件范围内，ＮＯｆ－Ｎ去除率均可达到９０％以上，最高的ＮＯｆ－Ｎ去除率为９３．７７％。

关键词：好氧反硝化；筛选；耐盐；蜡状芽孢杆菌中图分类号：Ｘ１７２

文献标志码：Ａ

ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００３－６５０４．２０１１．０６．０１１

文章编号：１０｛ｋ３－６５０４（２０１１）０６－－４｝０４８－－０５

ＳｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆＡｅｒｏｂｉｃＤｅｎｉｔｒｉｆｙｉｎｇＢａｃｔｅｒｉａｗｉｔｈＳａｌｔＴｏｌｅｒａｎｃｅ

ａｎｄＣｈａｒａｃｔｅｒｉｓ廿ＣＳｏｆＡｅｒｏｂｉｃＤｅｎｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ

ＬＩ

Ｊｉｎ９１，ＷＡＮＧＷｅｎ－ｗｅｎｌ，ＬＩＡＮＧ

（１．Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ

Ｌｅｉ２，ＦＥＮＧ

Ｗｅｎ＿ｑｉＩｌ９３

ＬｉｇｈｔＩｎｄｕｓｔｒｙＴｅｃｈｎｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕｓ１０３００，Ｃｈｉｎａ；

２．ＧｕａｎｇｚｈｏｕＳｕｇａｒｃａｎｅａｎｄＣａｎｅｓｕｇａｒＲｅｓｅａｒｃｈ

３．ＧｕａｎｇｚｈｏｕＡｏｓａｎｇ

Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０３１６，Ｃｌｌｉｌｌａ；

ＭｏｎｏｓｏｄｉｕｍＧｌｕｔａｍａｔｅＦｏｏｄＬｉｍｉｔｅｄＣｏｍｐａｎｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０２８０，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎｏｒｄｅｒｔｏ

ＳＣＴ∞ｎａｅｒｏｂｉｃｄｅａｉｔｒｉｆｙｉｎｇｂａｃｔｅｒｉａｗｉｔｈｓａｌｔｔｏｌｅｒａｎｃｅ，ｓＵ＇ａｉｎＧＱ－－４２ｗａｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍａｃｔｉｖａｔｅｄ

ｓｌｕｄｇｅｂｅｃ：ａｕｓｅｏｆｔｈｅｂｅｓｔｄｅｎｉｔｒｉｆｙｉｎｇｓｅｑｕｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓ，ｔｈｅｓｔｒａｉｎ

ｃａｐａｂｉｌｉｔｙ．Ｂａｓｅｄ

ｏｎ

ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ

ａｎｄｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙｏｆｃｏｌｏｎｙ

ａｓ

ｗｅｌｌ

ａｓ

１６ＳｒＤＮＡ

ｗａｓｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄａｓＢａｃｉｌｌｕｓｃｅｒｅｕｓ．Ｔｈｅｆａｖｏｒａｂｌｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆａｅｒｏｂｉｃｄｅｎｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｆｏｒｓｔｒａｉｎ

２６－３８℃，ｐＨ６．０￣８．０，ｄｉｓｓｏｌｖｅｄｏｘｙｇｅｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ５．４—８．５ｍｇ／Ｌ

ｒａｔｅ

（投ｑ２

Ｗａｓ

ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ

ａｓ

Ｃ／Ｎｍｏｒｅｔｈａｎ６，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ

ａｎｄｓａｌｉｎｉｔｙｌｅｓｓ

ｒａｔｅ

ｔｈａｎ１５０ｇ几．Ｏｎｔｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ａｌｌｏｆｒｅｍｏｖａｌ

ｏｆＮＯｆ－ＮｗｅｒｅｍＯｌＤｔｈａｎ９（ＰＡ，ｗｉｔｈｔｈｅｂｅｓｔｒｅｍｏｖａｌ

ｏｆＮＯｆ－Ｎａｓ９３．７７％．

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ａｅｒｏｂｉｃｄｅｎｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ；ｓａｌｔ－ｔｏｌｅｒａｎｔ；Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｅｒｅｕｓ

当前，水体的富营养化问题日益严重，氮素污染是引起水体富营养化的主要原因之一，污水的脱氮处理对于维持水体清洁具有重要意义【ｌＪ。生物脱氮是废水除去氮素污染的有效技术之一，包括硝化与反硝化

程应用特性。由于一些工业废水具有含氮高与盐度高的特点，对反硝化菌要求较高，针对这类问题，本试验人员对味精工厂的活性污泥进行耐盐好氧反硝化菌的筛选，并对筛选所得菌株的反硝化特性进行了初步研究。

１材料与方法１．１材料

活性污泥：广州奥桑味精食品有限公司提供。１．２培养基

反硝化培养基（ＤＭ培养基）参照文献【９】：琥珀酸钠９．４ｇ／Ｌ，ＫＮ０３１．０ｇ／Ｌ，ＫＨ２Ｐ０４１．５ｇ／Ｌ，Ｎａ２ＨＰＯ， ７Ｈ２０

两个过程ｌＺ－毒ｌ，传统理论认为细菌的反硝化是一个严格

的厌氧过程，然而，随着研究的不断深入，好氧反硝化菌的发现及其具有好氧脱氮的独特优势，使好氧反硝

化技术成为生物脱氮领域研究的热点闻。目前，已发

现许多菌属都存在好氧反硝化现象，如红球菌属（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）、副球菌属（Ｐａｒａｃｏｃｃｕｓ）、假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、产碱菌属（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｃｅｓ）、蜡状芽孢菌属（Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｅｒｅｕｓ）等［６－８１，这些好氧反硝化菌各有工

＜环境科学与技术＞编辑部：（网址）ｈｔｌｐ堋ｋｓ．ｃｈｉ腿ｊ㈣ａ１．ｎ晓∞（电话）０２７—８７６４３５０２（电子信箱）ｈｊｋｘｙｊｓ＠１２６．ｃｏｍ

作者简介：李静（１９７４－），女，工程师．主要从事环境科学与工程的研究，（手机）１３撇８９ｌ（电子信箱）ｅｅｓｌｅｃ２００５＠１６３．ｃｏｍ。

收稿日期：２０１１－０１—１８；修回２０１１－－０２－２５

第６期李静，等耐盐好氧反硝化茵筛选及其反硝化特性的研究

４９

７．９

ｇ／Ｌ，ＭｇＳＯ， ７Ｈ２０

ｐＨ７．ｏ；１２１

ｇ／Ｌ，微量元素溶液２

ｏＣ灭菌２０ｍｉｎ，备用。

１．０

ｍＬ，

引物１斗Ｌ，ＴａｑＤＮＡ聚合酶Ｏ．５肛Ｌ，超纯水３４．５¨Ｌ。ＰＣＲ反应条件为：９４℃预变性５ｍｉｎ，９４ｏＣ变性３０ｓ，５５．４℃退火３０ｓ，７２℃延伸９０ｓ，进行３０个循环，最后７２℃延伸１０

ｍｉｎ。

，反硝化培养基的微量元素溶液：ＥＤＴＡ

ＺｎＳＯ，２．２

ｇ／ｔ，，ＣａＣｌ２

５０．０ｇ／Ｌ，

５．５妒。，ＭｎＣｌ２’４Ｈ２０

５．０６ｇ／ｔ，，

ＦｅＳＯ， ７Ｈ２０５．０

ｇ／Ｌ，（ＮＨ４）６Ｍ０７０２。４１１２０１．１ｇ／Ｌ，ＰＣＲ产物经琼脂糖凝胶电泳纯化，然后进行测序，所得碱基序列与ＧｅｎＢａｎｋ核酸数据库进行比对分析，在数据库中找出具有很高同源性的菌株。１．７碳氮比对好氧反硝化的影响

以琥珀酸钠为碳源，通过调节琥珀酸钠浓度来改变反硝化培养基的碳氮摩尔比，使其分别为９：ｌ、８：１、７：１、６：ｌ、５：１、４：ｌ、３：ｌ、２：ｌ、ｌ：１，将不同碳氮比的反硝化培养基装入三角瓶中，每瓶装液量为１００ｍＬ，各瓶接入斜面菌种，置于３０较菌株在不同碳氮比下的反硝化性能。１．８温度对好氧反硝化的影响

在１．７节试验基础上，选择最适碳氮比的反硝化培养基，调节ｐＨ７．０，接入斜面菌种，分别置于２２℃、２６℃、３０℃、３４℃、３８℃、４２℃下进行２００ｒ／ｍｉｎ振荡培养，直至Ｎ０铲－Ｎ浓度无变化，比较菌株在不同温度下的反硝化性能。

１．９

ｏＣ、２００ｒ／ｍｉｎ

ＣｕＳＯ ５Ｈ２０１．５７ｇ／Ｌ．ＣｏＣｌ２。５Ｈ２０１．６１ｇ／Ｌｏ

耐盐驯化培养基：用ＮａＣｌ将ＤＭ培养基的盐度调节为２０％；１２１ｏＣ灭菌２０ｍｉｎ，备用。

ＢＴＢ分离培养基参照文献【ｌｏ】：Ｌ一天冬酰胺酸

１．００．０５

ｅ，ｍ，ＫＮ０３

１．０

ｇ／Ｌ，ＫＨ２Ｐ０４１．０ｅ，ｍ，ＦｅＣｌ２。６Ｈ２０

１．０

ｇ／Ｌ，ＣａＣｌ２ ２Ｈ２００．２ｇ／Ｌ，ＭｇＳＯ，。７Ｈ２０ｇ／ｔ，，

ＢＴＢ１．０

ｇ／ｔ，，琼脂２０

ｇ／ｔ，，ｐＨ７．０－７．２；１２１

ｏＣ灭菌２０

ｍｉｎ，备用。

１．３活性污泥的驯化

将ｌｏｇ活性污泥加入装有１００ｍＬ耐盐驯化培养基的５００ｍＬ三角瓶中，置于３０培养２４ｈ，然后对培养液进行６

ｏＣ、２００

的条件下进行振荡培养，直至Ｎ０。—廿ｉ浓度无变化，比

ｒ／ｍｉｎ振荡

０００

ｒ／ｍｉｎ离心分离，

称取ｌＯｇ沉淀物，再加入新鲜的耐盐驯化培养基继续进行振荡培养，如此重复１５次，使活性污泥中微生物得到耐盐与好氧反硝化的驯化。１．４驯化培养液的平板分离

最后驯化所得的培养液经梯度稀释，涂布于ＢＴＢ分离培养基上，置于３０℃培养４８ｈ，挑取蓝色和具有蓝色晕圈的菌落接种于斜面培养基，培养后备用。１．５好氧反硝化茵的摇瓶筛选

将从ＢＴＢ分离培养基上挑取的菌种接入装有

１００

ｐＨ对好氧反硝化的影响

在１．７节和１．８节的试验基础上，选择最适碳氮

比的反硝化培养基，分别调节ｐＨ４．０、ｐＨ５．０、ｐＨ６．０、ｐＨ７．０、ｐＨ８．０、ｐＨ９．０，置于最适温度和２００ｒ／ｒａｉｎ的条件下进行振荡培养，直至ＮＯ。－一ＩＮ浓度无变化，比较菌株在不同ｐＨ的反硝化性能。

１．１０溶解氧对好氧反硝化的影响

在１．７节、１．８节和１．９节的试验基础上，选择最适碳氮比的反硝化培养基，调节最适ｐｒｉ，置于最适温度下，分别调节转速为１００

ｒ／ｍｉｎ和３００

ｒ／ｒａｉｎ、１５０ｒ／ｍｉｎ、２００ｒ／ｍｉｎ、２５０

ｍＬ反硝化培养基的５００ｍＬ三角瓶中，置于３０ｒ／ｍｉｎ振荡培养，每隔２４小时，取样检测培养

ｏＣ、２００

液中的Ｎｏ卜Ｎ的质量浓度ｐ，直至ｉｏ不再变化。根据

ＮＯ。－－Ｎ的去除率分析各菌株的好氧反硝化能力，从而选择好氧反硝化能力最高的菌株。１．６菌种的鉴定

１．６．１菌落的形态特征观察及生理生化鉴定

对菌株进行菌落形态、染色显微镜观察叫，并采用微量生化反应管进行细菌生理生化反应，其结果参照《伯杰氏细菌鉴定手册》吲和《常见细菌系统鉴定手

ｒ／ｍｉｎ，进行振荡培养，直至Ｎ０３—州浓度

无变化，比较菌株在不同溶解氧下的反硝化性能。１．１ｌ盐度对好氧反硝化的影响

在上述试验基础上，选择最适碳氮比的反硝化培养基，用ＮａＣｌ调节盐度，使其分别为５０

１００ｇ／ｔ，、１２５

ｇ／ｔ，、７５ｇ／ｔ，、

册》Ⅱ３链行菌株鉴定。

１．６．２

９７Ｌ、１５０班、１７５叽、２００ｇｒＬ、２２５班、２５０

１６Ｓ

ｒＤＮＡ测序

参照文献［１４一１５】的方法提取菌株的ＤＮＡ，作为

ｇ化，调节最适ｐＨ，置于最适温度和最适转速下进行振荡培养，直至Ｎ０３－－Ｎ浓度无变化，比较菌株在不同盐度下的反硝化性能。１．１２测定方法

参照文献【１７】，采用酚二磺酸紫外分光光度法测定ＮＯ。－－Ｎ，采用ＹＳｌ５０００型ＤＯ测定仪测定溶解氧。２结果与分析

物［１６１，正向引物为２７Ｆ：５’一ＡＧＡＧ唧ＡＴＣｃ础Ｔ

１６Ｓ

ｒＤＮＡ扩增模板。ＰＣＲ反应的引物为一对通用引

ＣＡＧ－３’；反向引物为１４９２Ｒ：５’－ＧＧＴｒＡＣＣＴｒＧＴＩ＇Ａ

ＣＧＡＣＴｒ－３’。ＰＣＲ反应体系（５０此）的组成：ＩＯｘＰＣＲ反应缓冲液５止，ｄＮＴＰ混合物２止，２５ｍｍｏｌ／Ｌ的ＭｇＣｌ２４Ｉｄ－，，ＤＮＡ模板２此，正向引物ｌ此，反向

弘砣尉鹳教求

第３４卷

２．１好氧反硝化菌的筛选

活性污泥经耐盐与好氧反硝化驯化、ＢＴＢ培养基分离以及好氧反硝化摇瓶筛选，其中具有较强反硝化能力的１０株菌株摇瓶试验结果如图ｌ所示。结果表明，菌株ＧＱ－－４２的好氧反硝化能力最强，其对ＮＯｆ－Ｎ的去除率达９３．７７％。

萋萎｝＿二Ｉ＿＿＿＿－＿＿

ＧＱ－ｌｌＧＱ一１７ＧＱ－２３ＧＱ－２５ＧＱ－４２ＧＱ－５６ＧＱ－６１Ｃ，Ｑ－７７ＧＱ７９ＧＱ－９５

菌株

图１较强反硝化能力的１０株菌株摇瓶试验结果

Ｆｉｇ．１

Ｒｅｓｕｌｔ

ｏｆｓｈａｋｉｎｇｆｌａｓｋｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｆｏｒ１０ｓｔｒａｉｎｓ

ｗｉｔｈｂｅｔｔｅｒｃａｐａｃｉｔｙｏｆａｅｒｏｂｉｃｄｅｎｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ

２．２菌种鉴定

菌株ＧＱ－４２的菌落为圆型，微凸起，有光泽，黄色。革兰氏染色呈阳性，菌体呈直杆状。芽孢染色观察到芽孢呈椭圆形，次端生，孢囊无明显膨大。其生理生化特征如表ｌ所示。

表１菌株ＧＱ一４２的生理生化特征

Ｔａｂｌｅ１

ＭｏｒｐｈｏｌｏｇｙａｎｄｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆＳｔｒａｉｎＧＱ一４２

生理牛化实验

结果

淀粉蔗糖葡萄糖麦芽糖果糖乳糖木糖硝酸盐柠檬酸盐乙酰胺

Ｖ．Ｐ．

甲基红吲哚过氧化氢酶氧化酶

Ｈ２ｓ

菌株ＧＱ－４２经ＤＮＡ提取、ＰＣＲ扩增、１６Ｓ

ｒＤＮＡ

测序后，再进行ＢＬＡＳＴ检索。如表２所示，菌株ＧＱ一４２与多株Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｅｒｅｕｓ的同源性大于９９％，其中，

菌株ＧＱｑ２与Ｂａｃｉｌｌｕｓ

ｃｅｒｅｕｓ

Ｇ９８４２之间同源性为

１００％。

根据分子鉴定结果，结合形态观察和生理生化特征，可判断菌株Ｃ硷＿４２为蜡状芽孢杆菌属（Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｅｒｅｕｓ）。２．３碳氮比对菌株ＧＯ一４２好氧反硝化的影响

在不同碳氮比的反硝化培养基中进行好氧反硝化试验，结果如图２所示。碳源足构建菌体碳素骨架

表２与菌株ＧＱ一４２具有高度同源性的菌株

Ｔａｂｌｅ２

Ｈｉｇｈｉｓｏｇｅｎｏｕｓ

ｂａｃｔｅｒｉｕｍ

ｗｉｔｈｓｔｒａｉｎ

６Ｑ－４２

的来源，也提供菌体生命活动的能源，碳源不足对菌体生长和代谢活性有很大影响，从而影响菌体反硝化效率。可以看出，当Ｃ／Ｎ为１．０时，ＮＯｆ－Ｎ的去除率只

有６．８７％；随着Ｃ／Ｎ的增大，Ｎｏ。堋的去除率快速增

大，当Ｃ／Ｎ为７时，Ｎ０３一－Ｎ的去除率达到９３．７５％，且趋于稳定，继续增大碳氮比对Ｎ０３－－Ｎ的去除率并没有明显影响。因此，菌株ＧＱ一４２在本试验中，满足好氧反硝化的基本碳氮比是７。由于反硝化效率与菌体生长量有关，可以推断，硝化作用所需的碳氮比会随接种量变化而变化，这些需在反硝化工艺研究时进一步摸索。

Ｃ，Ｎ

图２碳氮比对ＮＯ，。一Ｎ去除率的影响

Ｆｉｇ．２ＥｆｆｅｃｔｏｆＣ／Ｎｒａｔｉｏ

ｏｎ

ｒｅｍｏｖａｌｒａｔｅ

ｏｆＮ０３’－Ｎ

２．４温度对菌株ＧＱ－４２好氧反硝化的影响

不同温度对好氧反硝化的影响如图３所示。各种微生物都有其最适生长温度和代谢温度，不利于菌株ＧＱ一４２生长和代谢的温度，都会影响其反硝化效率。结果表明，菌株ＧＱ－－４２在２６～３８℃的范围内能够保持较高的反硝化活性，ＮＯ。＿＿Ｎ的去除率均可达到９０％以上，３０℃时的Ｎ０３－－Ｎ的去除率为最高。

ｔ／＊Ｃ

图３温度对ＮＯ，－＿Ｎ太除率的影响

Ｆｉｇ．３Ｅｆｆｅｃｔｏｆｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ

ｏｎ

ｒｅｍｏｖａｌｒａｔｅ

ｏｆＮ０３＂－Ｎ

２．５

ｐＨ对菌株ＧＱ－－４２好氧反硝化的影响

第６期

李静，等耐盐好氧反硝化菌筛选及其反硝化特性的研究

５１

不同ｐＨ对好氧反硝化的影响如图４所示。可以看出，在ｐＨ６．０－８．０的范围内，菌株ＧＱ－４２好氧反硝化效率较高，均达９０％以上；其中ｐＨ７．０时的ＮＯ产＿Ｎ去除率为最高。当ｐＨ过低时，不利于菌株ＧＱ４２的生长，从而影响反硝化效率；由于反硝化作用是一个产碱的过程，当ｐＨ超过８．０时，溶液ｐＨ会随着反硝化的进行而趋于更高水平，使ＮＯｆ－Ｎ去除率呈急剧下降趋势。

ｐＨ

图４ｐＨ对Ｎ０３－ＤＮ去除率的影响

Ｆｉｇ．４Ｅｆｆｅｃｔ

ｏｆｐＨ

ｏｎ

ｒｅｍｏｖａｌ

ｒａｔｅｏｆＮ０３‘－－Ｎ

２．６溶解氧对菌株ＧＱ－４２好氧反硝化的影响

在不同转速下，摇瓶溶液含有不同的溶解氧，对菌株ＧＱ－４２的生长和代谢产生影响，从而影响了反硝化效率，其结果如图５所示。可以看出，随着转速增大，溶解氧浓度不断升高，当转速为２００ｒ／ｍｉｎ时，溶解氧浓度为５．４ｍｇ／Ｌ，Ｎ０３－＿Ｎ去除率达到最高；继续升高溶解氧浓度，ＮＯ。－－Ｎ去除率呈下降趋势，当溶解氧浓度高于８．５ｍｇ／Ｌ时，下降幅度开始增大。

。Ｊ

●

曲ｇｏ凸

图５溶解氧对Ｎ０３一－－Ｎ去除率的影响

Ｆｉｇ．５

Ｅｆｆｅｃｔ

ｏｆｄｉｓｓｏｌｖｅｄｏｘｙｇｅｎ

ｏｎ

ｒｅｍ９ｖａｌ

ｒａｔｅ

ｏｆＮ０３＂－Ｎ

２．７盐度对茵株ＧＱ４２好氧反硝化的影响

在不同盐度下，菌株ＯＱ４２的好氧反硝化结果如图６所示。可以看出，菌株ＧＱ４２具有一定耐盐性，

盐度／ｇ Ｌ．１

图６盐度对Ｎ０３－－Ｎ去除率的影响Ｆｉｇ．６

ＥｆｆｅｃｔｏｆｓａｌｉｎｉｔｙｏｎｒｅｍｏｖａｌｒａｔｅｏｆＮ０３－Ｎ在盐度为５０－１００ｇ／Ｌ的范围内，其反硝化活性较高，ＮＯＦ－Ｎ去除率保持在９０％１．２＿Ｅ；当盐度超过１５０ｇ／Ｌ时，随着盐度的增大，ＮＯ卜Ｎ去除率下降得较为明显。３结论

对潘｜生污泥进行耐盐与好氧反硝化驯化后，从中筛

选出一株好氧反硝化活性高的菌株ＧＱ＿４２。经形态观察、生理生化测定、１６ＳｒＤＮＡ测序及同源性比较，菌株ＧＱ４２被鉴定为蜡状芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｅｒｅｕｓ）。在较高盐度条件下，该菌株具有较强的反硝化性能，其反硝化的适宜条件范围较广，分别为：碳氮比／＞６，温度２６—３８℃，ｐＨ６．０～８．０，溶解氧浓度５．４～８．５ｍｇ／Ｌ，

盐度。＜１５０

ｇ／ｔ，。在此条件范围内，ＮＱ州去除率均

可达到９０％以上，最高的ＮＯ：Ｉ－＿Ｎ去除率为９３．７７％。

因此，该菌株具有进一步研究及应用的价值。

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ＺｈａｎｇＧｕａｎｇ－ｙａ，Ｆａｎｇ

Ｂａｉ—ｓｈａｎ，ＭｉｎＨａｎｇ，ｅｔａ１．Ｃｈａｒ－

ａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎｄｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ

ａｎａｌｙｓｉｓｏｆ

ａ

ｓｔｒａｉｎｏｆａｅｒｏｂｉｃ

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ｉｎ

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ｓｅｄｉｍｅｎｔＩ：Ｊ］．ＲｅｓｅａｒｃｈｏｆＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅ，２００９，

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ａｎｄ

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Ａｎａｌｙｓｉｓ

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