异育银鲫细菌性败血病病原体的微生物学诊断及毒力、药敏实验

对合肥市某养殖基地发病的10余只异育银卿的临床观察,经病原体分离培养与生理生化鉴定,结果初步表明,该病病原体为嗜水气单胞菌,分离菌对多种抗菌素有敏感性,毒力实验证实,分离菌对小白鼠具有致病性。

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安徽农业科学，02 3 ( )70— 3 20,o 5:3 7 1J u lo n u g iu trlS in e o ma fA h iA r l a ce c s c u

异育银鲫细菌性败血病病原体的微生物学诊断及毒力、敏实验药王春燕安水学，肥20) (徽产校合 33 01摘要对合肥市某养殖基地发病的 1余只异育银鲫的临床观察， 0经病原体分离培养与生理生化鉴定，结果初步表明，病痛该原体为嗜水气单胞茵。分离茵对多种抗茵素有敏感性。毒力实验证实，离茵对小白鼠具有致病性。分 关键词异育银鲫；茵性败血病；水气单胞茵细嗜￥ 6 .1; 9 1 4 9 5 17￥ 4 . 9 2文献标识码 A 文章编号 0 1—6 1 (0 2 0— 7 0 0 57 6 12 0 )5 0 3— 2

中图分类号

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淡水鱼细菌性败血病， 2世纪 8年代后期在我国是 0 0大规模流行的传染病，害鲢、、、等多种养殖鱼危鲫鳊鳙类。据初步统计， 2 0世纪 8 0年代末至 9 o年代初，国每全年因该病而造成的损失达 3 0万~ 0万 t价值 1 4, 5亿~2 0亿元，为建国以来所罕见。该病广泛分布于我国黄河以南广大主要养殖地区，徽省也广泛流行。2O安 O2年夏初，

1 - 0 7稀释度平板上得到直径 17ll右，面光 0 61 -高 . nl l左表

滑，边缘整齐，半透明灰白色的圆形菌落。用无菌操作法挑取菌落，别在鲜血琼脂培养基、 il— hr分 Rm e S os氏琼脂 r t培养基上划线接种， 3￣温条件下培养。2后，置 7C恒 4 h可

见在鲜血琼脂培养基上有口一溶血环，呈强烈 p血；溶在 Rme—Sos il r hr氏琼脂培养基上， t有边缘整齐，圆形黄色菌落出现，直径 15ll . l nl。继续 5代在肉汤蛋白胨培养基划线，得到纯单菌落。 12 3生化鉴定。按照《 ..常见细菌系统鉴定手册》方法， 进行该分离菌相关的生理生化实验，主要包括半固体动力、糖类的分解试验、糖代谢类型试验、 2 H s和吲哚的产生、氧化酶和接触酶、机酸盐利用、素酶、酸盐还有尿硝原、氨基酸脱羧酶、 R V—P验。 M、试

安徽省合肥市郊区某养殖场，异育银鲫大量发病，对送检的病鱼剖检，微生物学诊断，定为嗜水气单胞菌经鉴( e m ns yr h a,进行了毒力实验和药敏实验。 Ar oa hd p i )并 o o l1材料与方法

11病鱼来源 .

病鱼异育银鲫取自合肥市郊区某养殖场，个体重 20 0~

50g其主要症状表现为体表不同程度充血， 0,眼球突

出，门红肿，部膨大，大量红色腹水，伴有烂鳃，肛腹有并 鳍条基部充血。个别病鱼鳞片竖起。 12细菌分离培养与鉴定 .

124药敏实验。采用纸片扩散法， ..操作参照文献方 J法进行，抗生素包括丁胺卡那、庆大霉素、氯霉素、复合磺胺、头孢唑啉、氨苄青霉素、青霉素、链霉素、四环素、土霉素、呋喃唑酮、喹诺酮、氟环丙沙星，为国

内医药产品，均 所有药物均先配成一定浓度的母液，用时将无菌水稀使释到所需浓度，用直径 5ml i无菌滤纸片沾抗菌素母液后 l敷贴于涂有 Ar oa hd p i e m ns yr h a菌的平板上，设无菌生 o o l并理盐水为对照， 2℃恒温条件下培养 2后，察抑置 8 4 h观

12 1培养基。自行制备了肉汤蛋白胨培养基u, .. 家兔 J鲜血琼脂培养基， il JRme r—S os氏琼脂培养基及各种 hr t生化反应用培养基。 J 122细菌分离。将病鱼用清水冲洗干净后， 7%乙 ..用 5 醇棉球将病鱼反复擦拭消毒，无菌解剖器将病鱼剖开，用 取腹水、脏、肝肾脏组织。将病鱼组织充分研碎， 1置称 g于 1 l管中， 9m无菌水，释度为 1~,后进 0m试加 l稀 0然行梯度稀释，别得到质量浓度为 1~、0、0 1~、分 0 1~ 1~、0

制圈大小。药敏纸片为上海伊华有限公司生产。12 5毒力实验。将分离的纯培养物置营养肉汤 3￣ .. 7C 培养 1 h用无菌生理盐水 ( .5 NC )冲洗菌苔，用 8, 08% a1,采比浊法，菌液稀释分别为 5×l75×ls7×ls 1×将 O、 O、 O、 195 O个菌/ l腹腔接种小白鼠 (8 0g,量为 0、×l9 m, 1~2 )剂

1- 0 1稀释液。各取 0 2m到肉汤蛋白胨培养 0 61~、0 . l基、兔鲜血琼脂培养基涂布均匀，琼脂将水分吸干后反待扣培养皿， 3℃恒温条件下培养 2。在 1~、置 7 4h 0作者简介：王春燕(95一 )女， 16,安徽省怀宁县人，讲师，主要从事生物学方面的教学和科研工作。收稿日期：0 20 .2 2 o -7 2

05m, . l每种菌液接种 4只，照组腹腔注射 0 5m无菌 对 . l生理盐水，每组 2,只连续观察 5d 。2实验结果

2.形态 1

挑取单菌落，经革兰氏染色，镜检可见有多量的革兰

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