LC1_Waters LC培训教材_液相色谱仪的使用及保养
更新时间:2023-05-25 12:38:01 阅读量: 实用文档 文档下载
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Waters液相色谱仪简介液相色谱仪的使用及保养
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高效液相色谱系统色 谱 泵 进 样 器
数 据 处 理
检 测 器
色 谱 柱
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液相色谱的溶剂输送系统色 谱 泵 恒 压 泵 恒 流 泵
气 注单 双 隔 动 射柱 柱 膜 放 泵塞 塞 泵 大 泵 泵泵
并 联 联 泵 泵 串
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消除压力脉动 -- 非园齿轮
Waters的专利技术 充分利用两泵头非线性运 动所产生的加速度变化 进行流量及压力的交叉互 补 没有凸轮设计中的失速的 问题微 机 控 制 步 进 马 达
长免 寿维 命护 、 的统 润 滑 系
低 摩 擦 性 的 轴 承
提高可靠性的设计 低摩擦轴承 免维护润滑系统 新型的密封材料及控制阀
非∶ 园平 齿 轮 滑地 、输 均 匀 送 溶 剂
改制 进阀 的 控 及泵 新密 型 的 封 材 料
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新型的溶剂输送系统
全新的设计概 念,为高精度 输送流动相。比例阀 进口阀 主柱塞腔 主压力传感器 蓄液柱塞腔 系统压力传感器 柱塞驱动马达
流 动 相
1B A C D
3 7
主 柱 塞
2
蓄 液 柱 塞7 5
4
2 6
到 系 统
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2690工作示意图排 空
主 柱 塞 蓄 液 柱 塞预 压 缩
主 (蓄 柱转 塞移 送 液 液 到 柱 系 塞 统 并 ) 送
+0
蓄 液 液 柱 塞 送
度 速 对 相
观 察 到 的 0 . 4 柱 塞 速 度 周 期 重 复蓄 液 液 柱 塞 吸 (柱 来 从 移 主 过 塞 ) 转
主 柱 塞 吸 液
充 填
时 间 (c s e )
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2690溶剂输送系统的特点 独立的柱塞杆驱动马达
双压力传感器,监视系统及柱塞腔压力 软件根据传感器的反馈,控制所有功能 完全没有压力的脉动 只有两个进口阀,没有出口阀,可靠性极高 精确的溶剂配比
溶剂混合在柱塞腔内完成 精确的先进、先出流路 低系统体积
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色谱泵的操作面板 以510泵为例:出 口 阀 后 部 有 一 清 洗 孔
超恢 压复 警按 告钮 、
压 力 指 示
压 力 限 设 置
流 速 拨 轮
排 液 阀 电 源 开 关
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Waters 515 泵的前面板
515泵的电源开关
排液阀
出口阀后部清洗孔
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Waters 515 泵的操作面板 在Run与Ready之间切 换 用于设定各种参 数
用于更改具体参数 或选择参数项
用于选择和存储泵的操 作参数
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色谱泵的排气操作
使用前,应先确认泵头内没有气体,如有气体要 按以下步骤排气: 将排液阀反时针转2-3圈,用10ml注射器抽,直到出液 按以下方法之一将泵的后面放空
将U6K的C阀打开,或717设在PURGE状态 或,将参比阀打开 或,把色谱柱摘下
打开电源开关 开大流速到6-9ml/min 同时用10ml注射器从排液阀注入流动相 直到泵后的流速稳定无气泡为止
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色谱泵的运行
注意用外部控制器与用泵面板控制的区
别 有些型号的外部控制器与面板不能同时用 如需要面板控制,需要断开控制线或关闭控制器
排气后的色谱泵即可运行 注意∶
排气后,先设流速为 0 恢复排气时断开的部分,如∶进样器、色谱柱 如需要,恢复排气时断开的控制线
根据色谱柱的不同,逐渐提高流速到设定值
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泵进出口阀
进口阀 标准的球型单向阀
出口阀 弹簧引导阀,是主动阀。 在低压下关闭,可有效地 输送挥发性溶剂 在有气泡时也关闭 带过滤片 515的出口阀是标准的球 型单向阀
出口阀的拆装 各个组件是散件,安装时 注意位置,不要挤压
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梯度∶高压混合 高压梯度
使用多台色谱泵,在泵后混合 配置灵活、简单,脱气简单 易调节梯度的滞后体积
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600系列泵 600系列泵是自带微机控制的色谱泵
四元梯度、流速范围宽,大屏幕显示,键盘 操作屏 幕 显 示
数 字 及 方 向 键
功 能 键
纮 门 门 的 开 关 ∶ 开 , 后 , 有 比 例 阀 可 温 装 色 谱 柱 或 柱 箱
机泵 械 部 分 同 5 1 0
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梯度∶低压混合
低压梯度 用单泵产生梯度,泵前混 合 脱气要求高 不易调节梯度的滞后体积 如设计不当,滞后体积会 随反压变化
滞后体积(系统体积) 即∶梯度混合点到色谱柱 入口的体积 结果是∶实际梯度比设置 的梯度要滞后一段时间
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低压混合梯度的设计
先进先出的阀设计 FIFO流路设计 低压梯度的先决条件 保证准确并重现的梯度
出口阀 用普通的球型阀 排气泡方便
滞后体积 固定,不随反压变化 大小合适
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梯度滞后:系统体积的影响低 压 梯 度B A D比例阀
C
溶剂输送 系统(泵)
阻尼器 混合器
色谱柱
进样器
检测器
滞后(系统)体积 注意∶滞后体积包括进样器、阻尼 器、混合器及其管路 滞后(系统)体积 高 压 梯 度溶剂输送 系统(泵)
死体积/谱带展宽体积 (无色谱柱时)
色谱柱 进样器 检测器
溶剂输送 系统(泵)梯度混合器
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梯度滞后大小的影响
滞后体积太大会引起梯度变化的延迟 例如∶滞后体积为 2.0ml,流速 1.0ml/min 实际梯度会比设置值晚 2 分钟响应,没有问题 对微柱色谱影响更大,如上例,流速0.1ml/min 实际梯度会比设置值晚20 分钟响应,不能接受
滞后体积的不同会使方法转换麻烦 滞后体积比文献大或小都会使方法不能重现
普通HPLC的滞后体积为2~4ml 对分析型HPLC没有影响 对作微柱实验用梯度时影响较大,因此应选滞后体积小的液 相色谱仪,以适应梯度实验
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滞后体积变化的影响设计不好的HPLC系统,滞后体积随反压变化 滞后
体积随反压变化的后果∶
方法的适应性不好 梯度的重现性不好
用静态梯度混合器及RPS软件可改善梯度特性有 能 R了 P 梯 S 度 , 改 善 性 普 通 的 低 压 梯 度 系 统 梯 度 百 分 比
梯 度 百 分 比 梯 度 曲 线
不 好 的 梯 度 滞 后 曲 线
好 的 梯 度 滞 后 曲 线 保 留 时 间
保 留 时 间
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600系列泵的操作
600系列泵都有两种操作模式 系统控制器∶PowerLine Controller 梯度控制器∶Gradient Controller
设置方式 按功能键的SetUp 用屏幕键 PUMP CONFIG,选 UNIT TYPE屏 见 幕 屏 键 幕 ∶ 的 其 显 功 示 能 功 标 能 于 键 键 ∶ 上 其 功 能H o m e
1 2 3 4 5 6 7 8 9
CE lr n e a t e r 0 ·
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