第8章液固-液液色谱法

色谱分析

第八章 高效液相色谱法

液－固吸附色谱

液－液分配色谱

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主要内容

一 二

液-固吸附色谱法 液-液分配色谱法 正相硅胶反相洗脱色谱法

三

宋 敏

中国药科大学药分教研室

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一、液－固吸附色谱法

宋 敏

中国药科大学药分教研室

3

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1、液－固吸附色谱法的定义

液 ︱ 固 吸 附 色 谱 色谱分离是基于吸附效应的色谱法称 为吸附色谱法，以固体吸附剂为固定 相，以液体为流动相的色谱法，称为 液－固吸附色谱法（Liquid-Solid Adsorption Chromatography，LSC）， 简称液－固色谱法。

液－固吸附色谱是最早出现的，也是最基本的一 种柱色谱类型。

宋 敏 中国药科大学药分教研室

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2、液－固吸附色谱法的固定相

优良的固定相填料应具备以下特性：

表面具有极性活性基团即吸附位点；形状适宜，最

好成微米级微球形，且粒径分布均匀；多孔性且比

表面积大，载样量大；化学性质稳定；机械强度高；

价格合理 。

宋 敏

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在吸附色谱中，最常用的吸附剂是硅胶，其次是氧 化铝，此外还有高分子多孔微球（有机胶）、分子 筛及聚酰胺等。 固定相按极性大小分类如下： 酸性吸附剂：硅胶、硅酸镁 极性吸附剂 按极性 大小分 碱性吸附剂：氧化铝、氧化镁 非极性吸附剂：活性碳

宋 敏 中国药科大学药分教研室

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硅胶的性质

硅胶表面主要存在着硅羟基（Silanol，或称硅醇基） 和暴露于表面的Si－O－Si键，另外还有一些硅醇基 可能与水以氢键键合。硅羟基的表面浓度在液－固 吸附色谱中很重要，因为人们通常认为硅羟基是强 吸附位点，而Si－O－Si则是疏水性的。

OH Si

自由型硅醇基

宋 敏

O Si O Si

硅氧烷型

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硅胶表面的活性作用点

物理吸附水

干燥表面

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中国药科大学药分教研室

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硅胶按结构类型分类如下： 薄壳型 硅胶 全多孔型 无定形

球 形

薄壳玻珠

宋 敏

球形 无定形 全多孔硅胶 全多孔硅胶 中国药科大学药分教研室

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薄壳玻珠和全多孔微粒硅胶性能比较

性能 薄壳玻珠 全多孔微粒硅胶

平均粒度/μm

比表面积/（m2/g）

30～40

1.0～1.5

5～10

400～600

样品容量/（mg/g）

填充

0.05～0.1

干法装柱

1～ 5

湿法装柱

分析速度

宋 敏

慢

快

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（1）无定形全多孔硅胶

无定形全多孔的填料容易制备、价格低、 粒径一般为5 μm～10 μm，粒度分布较均 匀，理论塔板数可达50000 /m，比表面积 约300 m2/g，载样量大，但涡流扩散大， 渗透性差，比较难填装出稳定的柱床，一 般用来做制备柱。

宋 敏

中国药科大学药分教研室

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（2）球形全多孔硅胶

球形全多孔填料外

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