临床检验标本采集要求指南6月7日新
更新时间:2024-06-13 07:57:01 阅读量: 综合文库 文档下载
临床检验标本采集要求指南
根据卫生部制订《医疗机构临床实验室管理办法》第十五条要求,必须有分析前质量保证措施,制订患
者准备、标本采集、标本储存、标本运输、标本接收等标准操作规程,检验科结合本院实际工作情况制定临床检验标本采集要求指南,要求临床科室医护工作人员严格遵守,临床科室与检验科积极配合,共同提高我院临床检验质量和临床诊断水平。
、一、患者准备
1.病人状态
一般需在安静状态下采集标本,因运动能影响许多项目的测定结果。活动的影响可分暂时和持续性两类。暂时性影响如使血浆脂肪酸含量减少;丙氨酸、乳酸含量增高。持续性影响,如激烈运动后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的测定值升高,有些恢复较慢,如ALT在停止运动1h后测定,其值仍可偏高30%~50%。 2.饮食
多数试验要求在采血前禁食12h,因为饮食中的不同成分可直接影响实验结果。
(1) 餐后血液中ALT、GLU、BUN、Na等均可升高,但空腹达24h以上,可出现低血糖,血中TG、游离甘油及脂肪酸可
增高。
(2) 高脂餐后2~4h采血,多数人ALP含量增高,主要来自肠源性同工酶,且与血型有密切关系,O型或B型兼为Le+分泌型者增高更为明显。
(3) 高蛋白质餐使血浆尿素、血氨增加,但不影响肌酐含量。
(4) 高比例不饱脂肪酸食物,可减低胆固醇含量;香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。 (5) 含咖啡因饮料,可使血浆游离脂肪酸增加,并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。 (6) 食物如含有动物血液,可引起粪隐血假阳性。
(7) 饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸等增加,长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高、平均血细胞体积增加、谷氨酰转肽酶亦较不饮酒的病人为高,甚至可以将这三项作为嗜酒者的筛选检查。
(8) 吸烟:瘾大者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8%,而不吸烟者含量在1%以下。此外,儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为高,血液学方面亦有变化,白细胞数增加、嗜酸粒细胞减少、中性粒细胞及单核细胞增多、血红蛋白偏高、平均红细胞体积偏高。吸烟组血浆硫氰酸盐浓度明显高于非吸烟组。 3.药物
药物对检验的影响非常复杂,在采样检查之前,以暂停各种药物为宜,如某种药物不可停用,则应了解可能对检验结
果产生的影响。 4.体位
体位影响血液循环,由于血液和组织间液因体位不同而平衡改变,则细胞成分和大分子物质的改变较为明显,例如由卧位改为站位,血浆ALB、TP、酶、Ca、胆红素、Tch及TG等浓度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于体位的因素,在确立参考值时,应考虑门诊和住院病人可能存在的结果差异,故采集标本时要注意保持正确的体位和保持体位的一致性。 5.时间
病人准备还应考虑病人的生物钟规律,特别是激素水平分析,如女性生殖激素与月经周期密切相关;胆固醇则在经前期最高,排卵时最低;纤维蛋白原在经前期最高,血浆蛋白则在排卵时减少。生长激素于入睡后会出现短时高峰。胆红素、血清铁以清晨最高;血浆蛋白在夜间降低;血Ca往往在中午出现最低值。故采血时间应在相同时间进行。 二、标本采集
标本采集是直接关系检验结果的基本要素,如果标本采集不当,即使最好的仪器设备也难以弥补在采集标本时引入的误差和错误,现将各种标本的采集要点分述如下: (一) 血液标本的采集
血液标本可来自于静脉、动脉或毛细血管。静脉血是最常用的标本,静脉穿刺是最常用的采血方法。毛细血管采血主要用于儿童,血气分析多使用动脉血。
一) 静脉采血法 1 .采血步骤
采血前核对病人姓名、性别、年龄、编号及检验项目等,按试验项目要求,准备好相应的容器,如空白试管、抗凝管或促凝管等。病人应取坐位或卧位,采血部位通常是前臂肘窝的正中静脉。若用普通采血法,采血后应取下针头,将血液沿管壁缓慢注入试管内。
2 .注意事项
( 1 ) 防止溶血:造成溶血的因素有注射器和容器不干燥、不清洁;淤血时间过长;穿刺不顺利,组织损伤过
多;抽血速度太快;血液注入容器时未取下针头或注入速度过快产生大量泡沫;震荡过于剧烈等。若用普通注射器采血后,未取针头直接将血注入真空管内,也易造成溶血。体内溶血属合格标本,但应在报告单上注明。
( 2 ) 避免充血和血液浓缩:采血时应动作迅速,尽可能缩短止血带使用时间。用止血带压迫时间最好不超过
半分钟,否则将使生化结果升高或下降。
( 3 ) 若病人正在进行静脉输液,不宜在输液同侧手臂采血;若女性病人做了乳腺切除术,应在手术对侧手臂采
血。
( 4 ) 采血的体位:体位改变可引起一系列的生理变化,使血液中的许多指标发生改变。一般采取直立位采血,其标本的测定值比卧位高 5 %~ 15 %。因此,采血时要注意保持正确的体位(坐位或卧位),以及体位的一致性。
( 5 ) 采血时只能向外抽,决不能向静脉内推,以免注入空气,形成气栓而造成严重后果。 ( 6 ) 很多生化成分受膳食影响,因此,采血前要确认病人是否空腹。 二) 动脉采血法
肱动脉、股动脉、桡动脉以及其它任何部位的动脉都可以作为采血点,但多选择肱动脉和桡动脉。在摸到明显搏动处,按常规消毒,左手固定搏动处,右手持注射器,针头成 60 °角刺入,血液将自动进入注射器内。采血注意事项见血气分析部分。
三) 真空采血法
双向针的一端在持针器的帮助下刺入静脉,另一端插入真空试管内,血液在负压作用下自动流入试管内。由于在完全封闭状态下采血,避免了血液外溢引起的污染,并有利于标本的转运和保存。标准真空采血管采用国际通用的头盖和标签颜色显示采血管内添加剂种类和试验用途。可根据需要选择相应的盛血试管。
1 .普通血清管
红色头盖,采血管内不含添加剂,用于常规血清生化、血库和血清学相关检验。
2 .快速血清管
橘红色头盖,采血管内有促凝剂,可激活纤维蛋白酶,使可溶性纤维蛋白变为不可溶的纤维蛋白多聚体,进而形成稳定的纤维蛋白凝块。快速血清管可在 5 分钟内使采集的血液凝固,适用于急诊血清生化试验。
3 .惰性分离胶促凝管
金黄头盖,采血管内添加有惰性分离胶和促凝剂。标本离心后,惰性分离胶能够将血液中的液体成分(血清或血浆) 和固体成分(红细胞、白细胞、血小板、纤维蛋白等) 彻底分开并完全积聚在试管中央而形成屏障,标本在 48 小时内保持稳定。促凝剂可快速激活凝血机制,加速凝血过程,适用于急诊血清生化试验。
4 .肝素抗凝管
采血管内添加有肝素。肝素直接具有抗凝血酶的作用,可延长标本凝血时间。适用于红细胞脆性试验、血气分析、红细胞压积试验、血沉及普通生化测定,不适于做血凝试验。过量的肝素会引起白细胞的聚集,不能用于白细胞计数。因其可使血片染色后背景呈淡蓝色,故也不适于白细胞分类。
5 .血浆分离管
浅绿色头盖,在惰性分离胶管内加入肝素锂抗凝剂,可达到快速分离血浆的目的,是电解质检测的最佳选择,也可用于常规血浆生化测定和 IC U 等急诊血浆生化检测。血浆标本可直接上机并在冷藏状态下保持 48 小时稳定。
6 . E DT A 抗凝管
紫色头盖,乙二胺四乙酸( E DT A ,分子量 292 ) 及其盐是一种氨基多羧基酸,可以有效地螯合血液标本中的钙离子。螯合钙或将钙从反应位点移去将阻滞和终止内源性或外源性凝血过程,从而防止血液标本凝固。适用于一般血液学检验,不适用于凝血试验及血小板功能检查,亦不适用于钙离子、钾离子、钠离子、铁离子、碱性磷酸酶、肌酸激酶和亮氨酸氨基肽酶的测定及 PCR 试验。
7 .枸橼酸钠凝血试验管
蓝色头盖,枸橼酸钠主要通过与血样中钙离子螯合而起抗凝作用。适用于凝血实验,抗凝剂与血液的比例是 1 ∶ 9 。
8 .枸橼酸钠血沉试验管
黑色头盖,血沉试验要求的构橼酸钠浓度是 3 . 2 % (相当于 0 . 109 mol / L ),抗凝剂与血液的比例为 1 ∶4 血 根据不同的检验项目,选用合适的抗凝剂十分重要。 1.选择抗凝剂注意事项:
(1) 含有K+、Na+的抗凝剂不能用于测定K+、Na+的标本。
(2) EDTA、氟化物、草酸盐等不能用于测定Ca2+的标本,因为Ca2+可与它们形成不溶性物质。
(3) 草酸盐、氟化物不能用于测定酶和用酶法测定的标本,因为它们有激活或抑制某些酶活性的作用,如草酸盐可抑制 A MY、ACP、LDH的活性,氟化物则有激活尿素酶、AMY的作用。
(4) 草酸钾:钙离子螯合剂,常用量为1~2mg/ml血液。草酸钾虽仍可应用,但使红细胞缩小,水分从红细胞渗入血浆,使血浆成分浓度相应偏低。
(5) 草酸钾氟化钠混合抗凝剂:专供葡萄糖测定用,氟化钠1g,草酸钾3g混合,混合剂4mg抗凝1ml血。
(6) 肝素:是一种粘多糖体,可抑制凝血酶原转化为凝血酶,使纤维蛋白原不能转化为纤维蛋白。以15±2.5IU抗凝血液1 1ml。肝素抗凝血不影响红细胞体积,可用于生化及血液学检验标本,但不可用于筛选DIC的3P和TT试验,因肝素与 鱼 精蛋白作用,发生沉淀,使3P出现假阳性以及肝素的抗凝血酶作用出现产生干扰。
(7) EDTA:与钙离子络合而抗凝,通常血液学常规检验应用其钾盐EDTA-K2或EDTA-K3 。
(8) 使用抗凝剂要注意血与抗凝剂的比,如血沉取106mmol/L的枸橼酸钠0.4ml,抽1.6ml血;凝血机制取0.2ml,抽1.8ml血;血常规用EDTA抗凝管抽1.5ml血;血生化用肝素抗凝管抽3ml血等。 (9)普通管主要用于各种临床化学、临床免疫检验项目标本采集.
2.标本采集注意事项:
(1) 末梢采血时,务必清洁消毒,待干燥后穿刺,用1次性采血器。婴儿可取自脚后跟两侧处,一般不取手指,采血中不可用力挤压,以免组织液混入血液,使血液易于凝固和稀释,出现误差。
(2) 采静脉血时止血带结扎过久,可引起误差。如以结扎1min的样品结果为基数,则结扎3min,可使血浆总蛋白增加5%,胆固醇增加5%,铁增加6%,胆红素增加8%,乳酸则不能使用止血带。 (3) 血清标本应避免溶血,并及时分离血清,如需隔日检验,应封口后冰箱储存。 (4) 采血用针头过细会使血K+升高。
(5) 要特别注意采血不能在输液的同侧进行,更应杜绝在输液管内采血,因输液成分会影响检测结果(使相应的结果偏高,如输K+、Glu时,可使所测K+、Glu明显增高),或使血液稀释结果偏低。
(6) 血气和pH值测定的血液以动脉血为原则,且不可漏气。细胞培养的样品要采用无菌技术,防止污染。 (7) 标本采集后,必须在试管或容器上帖上检验申请单号码、住院病人应有床号、姓名,且应当场核对无误。
(二)、尿液标本的采集
一) 采集方法
尿液标本有随机新鲜尿、定时尿及 24 小时尿,根据检查项目选择标本的采集类型。定量生化分析多收集 24 小时尿液, 24 小时尿标本采集方法如下:
嘱病人在早晨 8 时排尿弃去,以后每次排尿均收集于一大容器内,至次日早晨 8 时最后一次尿亦收集于容器内。测量并记录 24 小时尿液总量,然后混匀尿液,取适量尿液送检。
根据采集时间可分为清晨空腹尿、随机尿、计时尿(2h、3h、12h、24h等)、午后尿、餐后尿、症状典型时尿等。 (1) 晨尿为住院病人留尿的主要方法,早晨起床后收集第一次尿,可用尿常规检验。 (2) 随机尿多为门诊就诊病人的留尿检验方法。
(3) 餐后尿为收集进餐后2h尿,主要用于了解葡萄糖代谢情况,用以筛查隐性糖尿病或轻症糖尿病。
(4) 计时尿应于计时开始时排空尿液,然后于规定时间内至截止时间留尿,计时尿多用于肾功能和有形成分排出率的评估,亦用于计算淀粉酶或肌酐的排出率。 二) 注意事项
收集尿液标本的容器必须清洁干燥, 最好是一次性使用的容器。若容器反复使用,则须用洗涤液和自来水清洗, 再用蒸馏水冲洗。尿标本要防止混入月经血、阴道分泌物、精液、前列腺液、粪便等异物。尿标本收集后应 12 时内送检,
以免细菌作用和化学成分分解。若不能及时检验(如收集 24 小时尿液),将标本置冰箱保存,若加入防腐剂,保存效果更佳。
(三)、粪便标本采集
标本的收集、存放与运送的得当与否,直接关系到检验结果的准确性。
应采取新鲜粪便,盛于洁净、干燥无吸水性的有盖容器内,不得混有尿液、水或其他物质,以免破坏有形成分,使病原菌死亡和污染腐生性原虫、真菌孢子、植物种子、花粉易混淆检验结果。
采集标本时应用干净竹签选取含有粘液、脓血等病变成分的粪便;外观无异常的粪便须从表面、深处及粪端多处取材,其量至少为大拇指末段大小(约 5g )。
标本采集后一般情况应于 1h 内检查完毕,否则可因 p H 及消化酶等影响导致有形成分破坏分解。查痢疾阿米巴滋养体时应于排便后立即送检。从脓血和稀软部分取材,寒冷季节标本传送及检查时均需保温。 检查日本血吸虫卵时应取粘液、脓血部分,孵化毛蚴时至少留取 30g 粪便,且须尽快处理。 检查蛲虫卵须用透明薄膜拭子于晚 12 时或清晨排便前自肛门周围皱襞处拭取并立即镜检。
找寄生虫虫体及做虫卵计数时应采集 24h 粪便,前者应从全部粪便中仔细搜查或过筛,然后鉴别其种属;后者应混匀后检查。
对某些寄生虫及虫卵的初步筛选检验,应采取三送三检。因为许多肠道原虫和某些蠕虫卵都有周期性排出现象。 隐血试验,应连续检查 3 天,选取外表及内层粪便,应迅速进行检查,以免因长时间放置使隐血反应的敏感度降低。 粪胆原定量检查应连续收集 3 天的粪便,每天将粪便混匀称重后取出约 20g 送检。查胆汁成分的粪便标本不应在室温中长时间放置,以免阳性率减低。
脂肪定量检查时,应先食定量脂肪食,每天进食脂肪 50 ~ 150g ,连续 6 天。从第 3 天起,收集 72h 粪便,也可定时口服色素(刚果红),作为留取粪便的指示剂,将收集的粪便混合称量,从中取出 60g 左右送检。简易法为在正常膳食情况下,收集 24h 的全部粪便,混合称量,从其中取出约 60g 送检,测脂肪含量。
细菌检验用标本应全部用无菌操作收集,立即送检。无粪便排出而又必须检查时,可经肛门指诊或采便管拭取标本,灌肠或服油类泻剂的粪便常因过稀且混有油滴等而不适于做检查标本。 (四)、分泌物的标本采集
1. 取材所用消毒的刮板,吸管或棉拭子必须清洁干燥,不粘有任何化学药品或润滑剂。
2. 根据不同的检查目的可自不同部位取材。一般采用盐水浸湿的棉拭子自阴道深部或阴道后部、宫颈管口、尿道等处取材,制备成生理盐水液。
(五)、特殊标本的采集 一) 脑脊液的采集
正常脑脊液为无色、清亮水样液体,当脑组织和脑膜有病变,如感染、外伤或肿瘤时,可使脑脊液( cerebrospinal fluid , CSF ) 发生变化,主要反映在颜色、透明度、细胞及各种化学成分的改变。脑脊液标本的采集由医生进行。脑脊液的穿刺部位较多,有腰椎穿刺、小脑延髓池穿刺,婴儿时期的前囟门作侧脑室穿刺等。因腰椎穿刺简单易行且危险性小, 最为常用。将脑脊液标本收集于三支无菌试管中,第 1 管作细菌检查,第 2 管作生化检查,第 3 管作细胞计数。脑脊液标本应尽量避免凝固和混入血液,标本采集后要立即送检,以免因标本放置时间过长使其成分变化,如葡萄糖分解,使葡萄糖含量降低。
二) 浆膜腔积液的采集
正常情况下,人体胸腔、腹腔、心包膜等有少量液体,它们主要起着润滑浆膜的作用,当浆膜发生病变时,如炎症、循环障碍、恶性肿瘤浸润等,浆膜腔液产生增多并积聚在浆膜腔内,称为浆膜腔积液。检测浆膜腔积液的某些化学成分,如蛋白质、葡萄糖、酶及肿瘤标志物等,有助于了解浆膜腔积液的性质和病因。一般由临床医生用浆膜腔穿刺术获得标本。 三) 羊水的采集
羊水( amniotic fluid ) 是产前诊断的良好材料,从羊水成分的变化可了解胎儿的成熟度,有否先天性缺陷及宫内感
染。羊水标本通常由临床医生经腹壁行羊膜穿刺取得。羊膜穿刺有可能损伤胎儿及母体,应掌握好羊水分析的指征及穿刺技术,在妊娠 16 周羊水达到 200 ml 以后才能进行。要注意无菌操作,取羊水速度不宜太快,标本量一般为 10 ~ 15 ml 。
(六)、临床微生物学检验标本的采集
※脓液及创伤感染标本的采集
1 .首先用无菌生理盐水拭净病灶表面的污染杂菌。
2 .对已破溃脓肿一般以无菌棉拭子采取脓液及病灶深部的分泌物, 而瘘管则以无菌方法采取组织碎片,放入无菌试管中送检。
3 .对未破溃脓肿最好用 2 . 5 %~ 3 %碘酊和 75 % 酒精消毒患部皮肤后,以无菌注射器抽取脓汁及分泌物,也可于切开排脓时,以无菌棉拭采取。
4 .有时也可将沾有脓汁的最内层敷料放入无菌平皿内送检。
5 .对放线菌的标本, 常用无菌棉拭挤压瘘管,选取流出脓汁中的“硫磺样颗粒”盛于试管内送检,也可将灭菌纱布塞入瘘管内。次日取出送检。
※血液及骨髓标本的采集
1 .将患者拟采血部位放平,扎以止血带,选好静脉穿刺点,以皮点为中心用 2 . 5 %~ 3 %碘酊从内向外周擦拭,待干后再以同法用 75 %乙醇脱碘。消毒范围不得过小。
2 .以无菌手续由静脉取血 5 ml ,立即注入适当的液体增菌培养基内, 迅速轻摇,使充分混合,以防止凝固。
※尿液标本的采集
采集尿标本必须防止杂菌污染,严格无菌操作,一般多采集中段尿。送检标本以晨起第一次尿液为佳,采集后立即送检,(泌尿系感染大多病原菌,于室温放置时间较久,即可增殖) 并均应在用药之前培养。 1 .中段尿采集方法
( 1 ) 女性采样前应先用肥皂水清洗,再用 0 . 1 %高锰酸钾水溶液冲洗尿道口,然后排尿弃去前段尿,留取中段尿 10 ml 左右于无菌容器内,立即送检。
( 2 ) 男性须将包皮翻开冲洗,然后采集中段尿。
( 3 ) 儿童多数情况下仅冲洗外阴是不够的,故采集标本较为困难,如尿内细菌明显增多,可高度怀疑尿路感染。
2 .肾盂尿采集法
为确定菌尿是否来自肾脏,可用导尿管采集肾盂尿,充分冲洗膀胱,以最后一次冲洗尿作为对照,尔后用导尿管插入输尿管,分别标记左右两侧收集 3 次尿,如输尿管菌数比对照尿菌数多或第 3 次比第 1 次多,该菌尿可能来自肾脏;反之,第 1 次尿菌数多于第 3 次尿菌数,则可能来自膀胱。该方法一般请泌尿科医师协助进行。 3 .膀胱穿刺采集法
采集中段尿完全避免污染是很困难的培养结果与病情不符时,可采用耻骨上膀胱穿刺采集尿液。此法用于厌氧菌培养或留尿困难婴幼儿。 4 .导尿法
采取导尿管留尿是一种较好的无菌采集方法,取 10 ~ 15 ml 于灭菌容器内送检。
※粪便标本的采集
1 .选取有脓血、粘液部分的粪便 2 ~ 3g ,液体粪便则取絮状物,装于灭菌的蜡纸盒中送检。
2 .在无法获得粪便的情况下,可用直肠拭子插入肛门 4 ~ 5cm 处,取直肠表面的粘液,装于无菌试管或保存液送检。
※上呼吸道标本的采集
1 .拟检查白喉棒状杆菌采集标本时, 应使患者对光而坐,头部上仰口张大, 用压舌板轻轻压舌根,直接用棉拭子擦拭病人咽、鼻粘膜、伪膜边缘部分或组织深层的分泌物作直接涂片和分离培养。若无局部病变或作带菌者检查则应于咽部或扁桃体上擦拭。
2 .拟检查百日咳鲍特菌或脑膜炎奈瑟菌时,应自鼻咽部采集标本。即用无菌的鼻咽拭子(一端弯曲的金属棉拭) 由口腔进入伸向鼻咽部,到达咽因后壁涂擦取标本,对患百日咳患儿作标本培养时可采用咳碟法。
3 .拟检查麻风分枝杆菌时, 可采取鼻粘膜标本。即将无菌棉拭子用力擦拭鼻中隔部,直至微有出血为止。
※痰液及下呼吸道分泌物标本的采集
1 .标本在采集前,首先让病人用清水漱口数次,以除去口腔内大量杂菌,让患者用力自气管深部咳出痰液吐至无菌的广口瓶内或小纸盒内。
2 .若病人痰量较少,需要检查痰中结核杆菌时,则应收集 24 小时痰液。
3 .气管洗涤液:取 8 ~ 9 号消毒导管,从鼻腔插入气管内, 缓慢注入灭菌蒸馏水 5 ml ,取出导管。留取病人在 3 小时内咳出的痰液,放入灭菌瓶内送检,本法可在清晨空腹时进行。
※鼻、咽、眼、耳拭子标本采集
1 .拟检查白喉杆菌采集标本时, 应使患者对光而坐,头部上仰口张大, 用压舌板轻轻压舌根,直接用棉拭子擦拭病人咽、鼻粘膜、伪膜边缘部分或组织深层的分泌物作直接涂片和分离培养。若无局部病变或作带菌者检查则应于咽部或扁桃体上擦拭。
2 .拟检查百日咳杆菌或脑膜炎奈瑟菌时, 应自鼻咽部采集标本。即用无菌的鼻咽拭子(一端弯曲的金属棉拭) 由口腔进入伸向鼻咽部,到达咽后壁涂擦取标本,对患百日咳患儿作标本培养时可采用咳碟法。 3 .眼、耳道疖肿或化脓性疾病通常以无菌棉拭子直接采取分泌物送检即可。
(三)标本的处理
标本处理不当将可能引起比分析更大的误差。因此,应根据分析目的选择合适的抗凝剂、防腐剂和处理方法。
一、抗凝剂
应用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子,阻止血液凝固, 称为抗凝。阻止血液凝固的化学试剂称为
抗凝剂( anticoagulant )。对抗凝剂的一般要求是用量少、溶解度大、不影响测定。生化检验常用的抗凝剂有以下几种: 1 .肝素
是一种含有硫酸基团的粘多糖,其抗凝机理主要是对抗凝血活酶和凝血酶的形成和活性,阻止血小板聚集。肝素抗凝血常用于血气分析和部分生化项目的测定, 使用 1 . 0g / L 的肝素溶液 0 . 5 ml 可抗凝 5 ml 血液。 2 .草酸钾-氟化钠
草酸钾可与血中钙离子生成草酸钙沉淀,从而阻止血液凝固。草酸钾溶解度大,抗凝作用强。氟离子能结合钙而抗凝,但抗凝效果较弱。氟离子可抑制糖酵解中的烯醇化酶,防止糖酵解,若未加氟化钠,血标本中葡萄糖含量将以每小时 6 %的速度下降。而在氟化钠的存在下,血糖浓度在 25 ℃ 可稳定 24 小时, 4 ℃ 可稳定 48 小时。因此,草酸钾-氟化钠是血糖测定标本常使用的抗凝剂。
二、防腐剂
尿液检验最好留取新鲜标本及时检查,否则尿液生长细菌,使尿液中的化学成分发生变化。在留取 24 小时或 12 小时尿液时,尿液标本应置冰箱保存或加入防腐剂( antiseptic ),常用的防腐剂有:
1 .浓盐酸
盐酸使尿液保持酸性,阻止细菌繁殖, 同时防止一些化学物质因尿液碱化而分解,通常用量为 0 . 5 ~ 1 . 0 ml 浓盐酸/ 100 ml 尿液,适用于 24 小时尿儿茶酚胺、秀草扁桃酸( V M A )、 17 -羟皮质类固醇和 17 -酮类固醇等定量测定。 2 .甲苯
甲苯可在尿液表面形成薄膜,防止细菌繁殖,用量 1 . 0 ~ 2 . 0 ml 甲苯/ 100 ml 尿液,适用于尿肌酐、尿糖、蛋白质、丙酮等生化项目的测定。 3 .冰醋酸
用量 5 ~ 10 ml 冰醋酸/ 24 小时尿液,适用于 24 小时尿醛固酮测定。 4 .麝香草酚
可抑制细菌生长,用量为 0 . lg 麝香草酚/ 100 ml 尿液。用 10 % 的麝香草酚异丙醇溶液可增加麝香草酚的溶解量,达到抑菌及保护代谢物的作用,适用于尿钾、钠、钙、氨基酸、糖、尿胆原、胆红素等测定。 (5) 24h尿多用于化学组分的测定,亦用于泌尿道抗酸杆菌的检查。
尿液原则上以不用防腐剂为好,如需12h或24h尿,首选以冷藏为妥,根据不同的检验目的加用合适的防腐剂,加40%
甲醛0.5ml于尿液100ml中,适用于细胞及管型等有形成分的检查;激素检验常以盐酸10ml作为24h尿的防腐剂或硼酸1g加于尿液100ml,麝香草酚0.1g加于尿100ml供抗酸杆菌浓集检查,加二甲苯0.5ml于尿液100ml中,。适用于尿糖、尿蛋白的检查。 (三) 粪便标本
采集后及时送检,如作原虫阿米巴检查应保持一定的温度,且立即送检,立即检查,如检查蛲虫则不必送检粪样,而应于晨起时排便前用棉拭擦肛门周围,可得虫卵。粪便标本应不污染容器外表,盛粪便标本的容器必须有盖,标本应取其中脓血粘液等病理成分,若无病理成分,可多点取材,一般以无滤漏容器留取5~10g即可,细菌检验用标本应全部用无菌操作收集。
(四) 脑脊液、浆膜腔液(胸水、腹水、心包积液)、关节液
均由临床医师穿刺采样,分装于无菌试管,标本采集后应立即送检,放置过久将影响检验结果。脑脊液抽取后,一般分装3个无菌管,按注射器内脑脊液注入无菌管顺序,第一管作常规检查、第二管作化学和免疫检验、第三管作细菌培养:浆膜腔液(胸水、腹水、心包积液) 共分装于4个无菌管,每管2毫升,第一管非抗凝用于观察有无凝块、第二、三管用EDTA·K2抗凝用于常规、培养检查,第四管宜用肝素抗凝用于生化检查,检验科应提供专用的各种试管或容器,及时送送检。
(五) 骨髓
采样由临床医师穿刺,抽吸量不得超过0.2ml,涂片送检。 (六) 胃及十二指肠液
一般均在门诊或病房采集后送检,收样时应核对标本。胃液分基础胃酸分泌(ABO)、最大胃酸分泌(MAO)等,十二指肠液分甲、乙、丙、丁管。甲管来自总胆管为橙黄色,乙管来自胆囊为黄绿色,丙管来自胆道为柠檬色,丁管来自十二指肠液为灰黄或淡黄色,细菌培养应从乙管取样接种培养基。 (七) 痰液标本
采集晨间第一口痰,多用于细胞学及微生物学检查。采样前应先反复漱口,经深呼吸数次后用力咳痰,不可吐入唾液。微生物培养取样应在抗生素等药物治疗开始之前,如已用药,则应选血液药物浓度最低水平时采样。 (八) 阴道分泌物
由妇产科医师采样后即时送检,如不能及时送检,可在37℃加温数分钟后检查,否则影响滴虫动力,易于漏检。 (九) 精液和前列腺液
采集精液应在禁欲3~5天后进行,且于排精后30min内保温送达检验科,容器以广口玻璃小好,不可贮存于避孕套或塑料瓶内,收到标本后应及时检查。前列腺液由医师作前列腺按摩术取样,收到标本后亦应立即检查。
(十) 其他标本
根据具体检验项目而定,临床医师在开申请单前,应同检验科相关部门联系并询问详细后,注明检查要求,再采样并及时送检。
总之,各种检验标本的采集合适与否,直接关系检验质量,应予以重视。 三四、标本保存和运送
标本保存和运送是检验质量保证的重要环节之一。由于采集的标本受各种因素的影响,可能使检验结果受或大或小的误差,因此必须正确掌握标本保存和运送。
(1) 采样后须立即送检的常规项目:血氨、血沉、血气分析、酸性磷酸酶、乳酸以及各种细菌培养,特别是厌氧菌培养。
(2) 采样后0.5h内送检的常规项目:血糖、电解质、血液细胞学、体液细胞学、涂片找细菌、霉菌等。 (3) 采样后1~2 h内送检的常规项目:各种蛋白质类、色素类、激素类、脂类、酶类、抗原、抗体测定等。 (4) 采样后2 h以上才能送检者,则常对标本采取必要的保存手段。对血糖或乳酸可直接分离血清后冷冻保存,或用NaF作稳定剂2~8℃密封保存;K+ 必须分离血清后密封2~8℃存放;ACP须加稳定剂后分离血清冷冻保存;对其他一般项目,可加盖密封后直接2~8℃存放,但血沉和细胞学检查不能采用此方法。
(5) 标本保存1个月:一般对检测物分离后,-20℃存放。
(6) 标本需长期保存(3个月以上者):对检测物分离后(包括菌种) -70℃保存,还应避免反复冻融。
(7)所有采集临床检验标本的运送及处置都必须按《》《》
四:标本的分离、储存和转运
血液标本采集后应及时分离血清或血浆,否则可发生红细胞与血清之间成分的相互转移,或细胞中的某些酶分解待测物等,而影响检验结果。例如,血清无机磷可由于红细胞内有机磷酸酯被磷酸酯酶的水解而增加;血清中葡萄糖可因红细胞内糖酵解酶的分解作用而降低,此外,钠存在于红细胞与血清中之比为 1 ∶ 2 ;钾在血清和红细胞中之比为 1 ∶ 20 ;钙在红细胞中极少, 几乎全部在血清中。因此,血清钠、钾、钙测定时,需注意及时分离标本,若不能立刻分离血清或血浆,应将标本放置于室温或 37 ℃ 水浴箱内,不能将血液标本直接放入 4 ℃ 冰箱, 以免发生溶血。对不是因操作不当引起的溶血、脂血或胆红素血,应在检验报告上注明,供医生参考。尿液、脑脊液和胸腹水等标本常需离心,取上清液进行分析。
分离后的标本若不能及时检测或需保留以备复查时,一般应放于 4 ℃ 冰箱,某些检测项目的标本存放于- 20 ℃ 冰
箱更稳定。标本存放时需加塞,以免水分挥发而使标本浓缩。需注意的是,某些检测指标如乳酸脱氢酶的标本应存放于室温, 置 4 ℃ 反而不稳定。
标本采集后应尽快送实验室分析,尽可能加快标本传递速度和避免标本的错误传递。若标本不能及时转运到实验室或欲将标本送到上级部门或检测中心进行分析时,应将标本装入试管密封,再装入乙烯塑料袋,置冰瓶或冷藏箱内运输,运送过程中应避免剧烈震荡。
要视所有标本为传染品,对“高危” 标本,如乙肝病人标本、丙肝病人标本等,要注明标识;急症或危重病人标本要特别注明。严禁标本直接用口吸取、接触皮肤或污染器皿的外部和实验台。标本用后均要做消毒处理,盛标本的器皿要消毒处理或毁型、焚烧。 五、药物对检验结果的影响
在服用多种药物的同时进行多项化验检查,药物引起的化验异常会和疾病引起的一样多。因此,在药物治疗中,如何正确地解释和评价检验的结果、探索其影响的定量关系或消除其干扰的方法,这对临床实验学科提出了新的课题。正确的解释检验结果,必须先了解患者正在服用哪些药物。影响检验结果的常用药物包括:抗凝剂、降糖药、兴奋剂、激素、抗
癫痫药、降压药、镇痛药、抗感染药及某些中药等。但影响的程度不一,而且有些药物影响检验结果的机制也不清楚。有的改变是因检验过程中化学反应被干扰;有的则反映特殊器官受损,如肝肾;有的病人代谢功能特殊,对某一化合物的形成或排出呈现加速或迟滞;其他如结合部位的竞争,降解酶的激发或抑制等。 一、对物理学检验的影响 (一) 可能使粪便变色的药物
1.使粪便变白色的药物:抗酸剂(氢氧化铝等)。
2.使粪便变黄色或绿色的药物:蒽醌类(大黄等)、吲哚美辛(消炎痛)。
3.使粪便变粉红至红色或黑色(可能有肠出血)的药物:抗凝剂(华法林等)、保泰松类、水杨酸类。 4.使粪便变黑色的药物:铋制剂,如活性炭、亚铁盐、铁盐。 5.使粪便变红色的药物:利福平、恩波维胺(扑蛲灵)。 6.使粪便变泥土状、灰色的药物:钡剂。 (二) 能使尿液改变颜色的药物
1.使尿液变为黄色至红色或红棕色的药物:大黄、氯喹、呋喃妥因、吩噻嗪类、苯妥英钠、华法林、维生素B2、非那西丁、对氨基水杨酸、抗凝剂、肯同氯奎、呋喃唑酮、山梨醇铁、辛可芬、苯氮吡啶、苯茚二酮、酚酞、苯磺胺、伯氨奎、
阿的平、核黄素、水杨酸、磺胺药等。
2.使尿液变为蓝绿色的药物:阿米替林、吲哚美辛、利福平、亚甲蓝、妥龙、氨苯蝶啶等。 3.使尿液变为黑褐色的药物:甲硝唑(灭滴灵)、左旋多巴、甲基多巴、奎宁及其衍生物等。 (三) 能使尿比重增加的药物
左旋糖酐、放射造影对比剂及蔗糖等。 二 对血液检验的影响 (一) 能引起贫血的药物 1. 肯定能引起贫血的药物:
(1) 抗生素类药物:氯霉素、甲氧苯青霉素、博来霉素、长效磺胺、磺胺嘧啶、有机砷类。 (2) 解热镇痛药:保泰松、羟基保泰松、氨基比林、安乃近、阿司匹林、对乙酰氨基酚(扑热息痛)。 (3) 抗癌药:氮芥、阿糖胞苷、环磷酰胺、丙卡巴肼(甲基苄肼)、甲氨蝶呤、长春碱、长春新碱、白消安。 (4) 抗癫痫药:苯妥英钠、乙琥胺。 (5) 抗糖尿病药:甲苯磺丁脲。
(6) 抗甲状腺病药:甲硫氧嘧啶、丙硫氧嘧啶、甲巯咪唑、卡比马唑。
(7) 抗疟药:阿地平。
(8) 其他药物:氯丙嗪、甲丙氨酯、利眠宁、乙氨嗪苯、甲苯、三硝基甲苯。 2.可能引起贫血的药物
(1) 抗生素类:青霉素、红霉素、链霉素、卡那霉素、土霉素、两性霉素B、灰黄霉素。 (2) 解热镇痛药:吲哚美辛。
(3) 抗癫痫药:扑米酮(去氧苯比妥)、三甲双酮。 (4) 抗疟药:氯喹。 (二) 致白细胞减少的药物 1.致白细胞生成减少的药物:
(1) 烷化剂:氮芥、环磷酰胺、苯丙氨酸、消瘤芥、塞替派、白消安、乌拉坦、丙卡巴肼、多潘等。 (2) 有丝分裂抑制剂:长春碱、长春新碱、秋水仙碱等。 (3) 抗抑郁药:丙米嗪、地昔帕明(去甲丙米嗪)等。
(4) 利尿药:乙酰唑胺、氯噻嗪衍生物、依地尼酸(利尿酸)、汞剂等。
(5) 抗生素:氨苄西林(氨苄青霉素)、氯霉素、头孢霉素、庆大霉素、林可霉素、甲氧苄青霉素、链霉素、瑞斯托霉
素、放线菌素K、两性霉素B等。
(6) 抗癫痫药:苯巴比妥、三甲双酮、乙琥胺等。 (7) 其他:氯苯那敏(扑尔敏)、二硝基苯酚、苯、砷等。 2.致白细胞破坏增加的药物
(1) 解热消炎镇痛药:阿司匹林、对乙酰氨基酚(醋氨酚)、氨基比林、吲哚美辛、保秦松等。
(2) 抗生素:乙氧萘青霉素、苯唑西林钠(苯唑青霉素钠)、双氯西林、万古霉素、庆大霉素、头孢噻吩(先锋霉素1)、氯霉素等。
(3) 抗心律失常及强心药:奎尼丁、普鲁卡因胺、地西洋(安定)、地高辛等。 (4) 抗疟药:奎宁、扑疟奎、辛可芬等。 (5) 抗甲状腺药:甲巯咪唑、丙硫氧嘧啶。
(6) 其他:氯丙嗪、呋喃妥因、苯妥英钠、别嘌醇、双嘧达莫(潘生丁)等。 (三) 能引起血小板计数变化的药物
能引起再生障碍性贫血的药物,都能引起血小板减少。这些药物一般均先引起白细胞减少,继而使血小板减少,最后导致全血细胞减少。这是由于白细胞的寿命为4天,血小板为9天,红细胞为120天。
(1) 致再生血小板减少的药物及化学品:氮芥、环磷酰胺、苯丙氨酸氮芥、甲氧芳芥(甲氧基溶肉瘤素)、阿糖胞苷、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤、6-硫鸟嘌呤、阿霉素、柔红霉素、苯、二甲苯、有机砷等。
(2) 引起骨髓再生不良致血小板减少的药物:氯霉素、青霉素、链霉素、氯氮、氯丙嗪、甲巯咪唑、苯妥英钠、乙氧萘青霉素、乙琥胺、保泰松、吲哚美辛、氯苯那敏等。
(3) 选择性抑制巨核细胞致血小板减少的药物:氯噻嗪类、雌激素类、乙醇、瑞斯特霉素、甲苯磺丁脲等。 (4) 致免疫性血小板减少的药物:这些药物多为半抗原,能附着在血小板膜上的特殊部位,形成药物蛋白复合物,在补体参与下,发生免疫作用,致血小板减少。这些药物有:保泰松、吲哚美辛、阿司匹林、水杨酸、非那西丁、抗生素类、异烟肼、利福平、对氨基水杨酸、奎宁、氯喹、洋地黄霉甙、地高辛、奎尼丁、硝酸甘油、甲基多巴、氯噻嗪、百日咳菌苗等。
(四) 能引起出血、凝血时间变化的药物
(1) 能使出血时间延长的药物:右旋糖酐、乙酸水杨酸、泛酰乙醇及其衍生物,链激酶-链球菌脱氧核酸酶等。 (2) 使凝血时间延长的药物:抗凝剂、四环素等。 (3) 使凝血时间缩短的药物:肾上腺素、皮质类固醇等。
(4) 导致凝血酶原时间延长的药物:合成性固醇、水合氯醛、氯霉素、氯贝丁酯(冠心平)、 高血糖素(胰高血糖素)、
吲哚美辛、甲芬那酸(甲灭酸)、新霉素、羟布宗(羟保泰松)、保泰松、苯妥英钠、奎尼丁、水杨酸类、左旋甲状腺素钠等。 (5) 导致凝血酶原时间缩短时间的药物:巴比妥类、格鲁米特(导眠能)、维生素K、口服避孕药、灰黄霉素、庚巴比士等。
(五) 能引起血沉变化的药物
(1) 使血沉加快的药物:左旋糖酐、甲基多巴、氨基青霉素、三氟哌多(三氟哌啶醇)、维生素K、维生素A、茶碱、羟丙基甲基麦角酰胺等。
(2) 使血沉减慢的药物:奎宁、水杨酸盐、引起血葡萄糖升高的药物等。 (六) 可能引起过敏性血管性紫癜的药物(血小板数与功能正常)
非那西丁、阿司匹林、水合氯醛、克尿塞、氯丙嗪(氯普马嗪)、秋水仙碱、香豆素类药、苯海拉明、红霉素、灰黄霉素、碘化物、异烟肼、甲丙氨酯(眠尔通)、土霉素、酚噻嗪类、普鲁卡因青霉素、奎尼丁、磺胺类、已氟吡啦嗪等。 三、 药 药物对尿化学试验的影响 (一) 影响尿pH的药物
碳酸氢钠(重碳酸钠)、乙酰唑胺(醋氮酰胺)等。 (二) 影响尿糖试验的药物
1.引起尿糖假阳性的药物:
(1) 引起血糖升高从而继发糖尿的药物:皮质类固醇制剂、吲哚美辛、异烟肼。 (2) 引起肾损害的药物:过期四环素。
(3) 由于还原作用,与班氏溶液或Cliniest试剂可出现尿葡萄糖假阳性反应,但与Clinistix或Testape试剂无此反应的药物:阿司匹林、对氨基水杨酸、头孢噻吩钠(先锋霉素Ⅰ)、头孢噻啶(先锋霉素Ⅱ)、水合氯醛、辛可芬等。 2.引起尿糖假阴性的药物(对酶法、试纸法):抗坏血酸、左旋多巴、非那宗吡啶等。 (三) 引起尿酮体试验假阳性的药物
对氨基水杨酸、苯乙双胍(降糖灵)、水杨酸盐、肌醇酯等。 (四) 影响尿潜血试验的药物(联苯胺法)
假阳性:溴剂、铜、碘化物、过锰酸化物等。 假阴性:大量维生素C。 (五) 影响尿二胆试验的药物
凡能引起肝功能损害、溶血和胆汁郁积的药物,均可导致尿二胆试验结果的改变。如氯丙嗪、甲芬那酸、非那宗吡啶、 氯噻嗪类。
(六) 影响尿17-酮类固醇测定的药物
(1) 使尿17-酮类固醇增高的药物:氯霉素、氯丙嗪、地塞米松、红霉素、甲丙氨酯、青霉素、非那宗吡啶、酚噻嗪类、奎尼丁、司可巴比妥(速可眠)、螺内酯(安体舒通)、夹竹桃霉素、氨苯甲基丁烷二醇等。
(2) 使尿17-酮类固醇下降的药物:氯氮、雌激素、口服避孕药、酚噻嗪类、利血平、甲丙氨酯、丙磺舒、普马嗪等。 (七) 影响尿17-羟皮质类固醇测定的药物
(1) 使用17-羟皮质类固醇增高的药物:乙酰唑胺、水合氯醛、氯氮、甲丙氨酯、奎宁、螺内酯、利普马嗪、秋水仙碱、红霉素、夹竹桃霉素、副醛等。
(2) 使尿17-羟皮质类固醇下降的药物:雌激素、口服避孕药、酚噻嗪类、利血平等。 (八) 影响儿茶酚胺测定的药物
氨苄西林(氨苄青霉素)、维生素C、水合氯醛、肾上腺素、甲基多巴、奎尼、四环素族、维生素C族、红霉素、肼屈嗪(肼苯达嗪)、乌洛托品、烟酸等。 (九) 影响香草基杏仁酸(VMA)测定的药物
(1) 使VMA增高的药物:阿司匹林、PAS、土霉素、青霉素、非那宗吡啶、磺胺类、愈创木酚甘油醚、唛酚生、PSP等。 (2) 使VMA下降的药物:普马嗪类、甲基多巴、丙米嗪、氯贝酯(冠心平)、胍乙啶同类药、单胺氧化酶抑制剂等。
(十) 影响尿5-羟吲哚醋酸(5-HAA)测定的药物
⑴ 可使5-HAA增高的药物:乙酰苯胺、非那西丁、唛酚生、利血平、愈创木酚甘油醚等; ⑵ 可使5-HAA降低增高的药物:普马嗪类、丙米嗪、异烟肼、甲基多巴、异丙嗪、乌洛托品等。 (十一) 影响妊娠试验的药物 假阳性:氯普马嗪、酚噻嗪等、 假阴性:异丙嗪等。 (十二) 引起假阳性尿蛋白的药物
具有肾毒性药物如金、砷、锑化物等;影响磺胺基水杨酸试验的药物如头孢吩钠、头孢噻啶、磺胺甲唑、甲苯磺丁脲等。
(十三) 引起尿肌酐改变的药物
增加:维生素C(抗坏血酸)、皮质类固醇、左旋多巴、甲基多巴、硝基呋喃类等; 减少:雄激素与合成性固醇、噻嗪类等。 (十四) 引起尿钙改变的药物
(1) 使尿钙增多的药物:雄激素与合成性固醇、考来烯胺(消胆胺)、皮质类固醇、二氢类固醇、维生素D、甲状旁腺
素注射剂、紫霉素等。
(2) 使尿钙减少的药物:植酸钠、噻嗪类等。 (十五) 引起尿PSP试验假阳性的药物
白陶土、镁、亚甲蓝、烟酸、阿的平、奎尼丁、奎宁等。 四、药物对血液生化测定的影响 (一) 影响血液尿素氮测定的药物
(1) 使血尿素氮增高的药物:水合氯醛、氯霉素、铵盐、磺酰尿素、氨基酚、天门冬酰胺等。 (2) 使血尿素氮降低的药物:链霉素、氯霉素等。 (二) 影响血尿酸测定的药物 1. 使血尿酸增高的药物:
(1) 细胞毒性作用使核酸的转化加快的药物:抗代谢剂与肿瘤化疗剂(长春新碱、硫唑嘧啶、白消安、甲氨蝶呤 (2) 使肾清除率或肾小管分泌减慢的药物:各种利尿剂。 (3) 对肾有毒性作用的药物:丝裂霉素等。
(4) 对测定方法有干扰的药物:维生素C、甲基多巴、左旋多巴等。
)等。
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