血凝仪SOP文件CA1500

全自动血凝分析系统标准操作规程

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审查登记： 审查日期 签名 修订依据 签名/日期 页码 修订内容 修订依据 签名/日期 文件編號：Lab.SOP-COA-0001 版 次：01 使用单位： 标准作业程序 ——全自动血凝仪CA1500 編修日期：05.09.15 頁 次：第 頁共頁 编 写： 1 .设备基本技术参数 1．1 原理——CA1500凝血仪仪器具有三种检测原理方法：凝固法、发色底物法、免疫法

1.1.1 凝固法：基本测试原理是光学法的散射光检测（用660nm光电二极管检测散射光强度的变化），还并用了百分比方式的测定原理：当试剂加入标本后，凝血开始启动，随之光学出现变化，仪器把这种光学的变化描绘成凝固曲线：把开始出现凝集的起始点作为0%、把完全凝固的终点作为100%、把50%变化点处作为凝固时间（报告点），当测定含有干扰物（黄疸、溶血、高脂血症等）或低纤维蛋白原血症的特殊标本时，其作为起始点的0%的基线会随之上移或下移,相当于扣除本底干扰.

以上凝固法检测原理所测定的项目包括了最常用的如PT、APTT、FIB、TT、内源凝血因子（F VIII、XI、XI、XII），外源凝血因子（F II、V、VII、X）等

1.1.2. 发色底物法的检测原理：是通过测定产色物质的吸光度变化，以推算待测物的含量，这种

方法属生物化学法，其基本原理是：试剂中为人工合成的含某种酶裂解位点的短肽，与产色物质如对硝基苯胺(pNA)连接，待检物品中含有活性酶或无活性的酶原被加入的激活剂活化，在检测过程中产色物质被解离下来，使被检物品出现颜色变化，其与被检物含量呈一定的数量关系。此方法以酶学方法为基础，可检测项目包括如：AT-III、Plg、PC、PS、FM、PAI，Tpa，α2-AP等。

1.1.3. 免疫法： 以被检物作为抗原，制备相应的多克隆抗体，利用抗原抗体的特异结合反应来对被检物进行定性和定量检测，在凝血仪上多采用免疫比浊法测定，其基本原理是当一定波长的光线通过反应混合液时，被其中抗原抗体反应形成的免疫复合物吸收而减弱，在一定范围内，其吸光度与复合物量呈正相关，因此当抗体量固定时，根据复合物的吸光度值，即可推算出待测抗原含量，可测定项目如D-二聚体、vWF因子、FDP等

1．2 检测环境要求:

1.2.1 温度: 10° - 30° C；湿度: 20 - 80% (无冷凝)

1.2.2 电源: 交流电100-240V，50/60Hz；功率：720VA

1.2.3 请勿将仪器直接置于水、直射阳光、冷凝或大风的环境中,这样会导致不正确的检测结

果并导致仪器工作不正常而损坏 1.2.4 仪器的背面和墙之间要始终保持20厘米以上的距离。否则，仪器会过热，连接导管和

连接负载过大而可能引发火灾。

1．3 主要项目检测指标: 1.3.1 检测范围：

PT，TT——5~180sec（最宽可设置到600秒） APTT —— 5~300sec （最宽可设置到600秒）

Fbg —— 0.25~10 g/L（＜0.5g/L或＞10g/L建议使用重稀释重检模式） D-Dimer Plus 50~16000 ug/L（＞2000ug/L需使用重稀释重检模式） 1.3.2 重复性：

PT, APTT ≤ CV 2 % Fbg ≤CV 4 % 因子 ≤CV 5 % TT CV ≤10 % AT-III CV ≤ 5 %

D-Dimer Plus CV ≤ 10 %

1.3.3 检测速度：

单项测试时最快180T/h， 组合时约120~140T/h；

2. 标本

? ? ?

使用3.8%或3.2%(W/V)拘橼酸钠溶液作为抗凝剂； 血样与抗凝剂的比例为9:1，如果血球压积<20%或>55%，则需调整这个比例，方法是：0.00185×血液毫升数×(100-压积)=抗凝剂毫升数，按比例重抽血检验； 血浆分离（如果不能立即测试，应尽快分离血浆）；

——采样后60分钟内进行；

——分离血浆应在3000r/min 离心10分钟，务使血小板去除； ? ?

盛血浆容器应加塞，防止PH改变； 血浆存放时间不能太久：

温度 室温 2—8℃ -20℃ -70℃ ?

有效时间 ≤2hr ≤4hr ≤2Weeks ≤6months 低温保存的样品，要在37℃迅速解冻，减低凝血因子的消耗，并立即测试。

3 试剂及配套消耗品

3.1试剂

3.1.1反应试剂: 采用CA1500血凝仪配套Dade Behring试剂，具体见相应项目要求

3.1.2 系统清洁液:厂家配套Sysmex Clean I清洁液,用于检测过程中样品针、试剂针的冲洗； 3.1.3 系统冲洗液：蒸馏水，实验室自制，用于检测过程中系统管路的冲洗

3.1.4 :稀释液：配套Dade Behring的Owern’s Veronal Buffer 和CA System Buffer，用于检

测过程中样本的稀释或定标曲线制定中标准血浆的稀释；

3.2 其它消耗品

3.2.1 反应杯：厂家配套Sysmex Reaction Tube反应杯 ,货号：SU-400

4 校准

4.1定期进行光学通道灵敏度校准检测 （半年一次，由厂家工程师进行） 4.2 定期进行温度检测校准

（半年一次，或有相应温度错误报警时进行，由厂家工程师执行） 4.3 定期进行机械位置检查调校

（半年一次，或有相应定位错误报警时进行，由厂家工程师执行）

4.4 项目定标：入Fbg，D-D，AT-III这些报告单位为含量浓度、活性单位的项目，原则上每更换一

批号试剂就要进行定标曲线的重新制备，方法如下： 4.4.1 按要求溶解好定标血浆,放室温10分钟后使用

4.4.2 在主菜单选择< Stand Curve >→选择项目(如Fbg)→选→将定标液的

定值输入[Assay Sheet Val.]处

4.4.3确认输入值上端显示为[Sampler]和[ Auto Dil.],否则,通过按最底端的Sampler/Holder 和

Change Mode改变→通过按 Select Dil. Ratio选择合适的稀释度→在每个稀释度后面输入要测试的次数,如1或2 (Times); 4.4.4 以上全部输入完后,按,[ Return], →[OK]储存设置

4.4.5 将定标液用小样本杯放置在样本架上的第一位,放在进样器上,将相应试剂\\稀释液等放好

在试剂盘相应位置

4.4.6 在主菜单选< Work List>→点击相应项目→[Return]→[Start],则定标曲

线测试自动进行;

4.4.7 重新进入定标曲线画面[Standard Curve],等所有稀释点结果都测定出来后,如果曲线可接

受,则按[ Update]→[ Update]储存新曲线.

5 质控

5.1质控液种类：Dade Behring Citrol I，II，III

5.2质控液的准备

5.2.1准备方式依照质控血浆配制要求：每瓶用1ml蒸馏水溶解，置室温15分钟后方可使用，室温下4小时内使用完；

5.2.2溶解后未使用完的质控血浆注明开瓶日期，分装保存于—20℃，3周内使用完。 5.3质控血浆使用时机

5.3.1每天做检体之前 5.3.2做完仪器校正之后 5.3.3重要的维修之后

5.3.5怀疑病患的报告有异常时 5.4质控血浆注意事项

5.4.1当作一般检体操作。

5.4.2接受范围(阀值)：按质控血浆说明书标注。 5.5超阀值之补救措施

5.5.1检查质控血浆是否过期、失效

5.5.2检查所使用的试剂、清洁、冲洗液、缓冲液等是否过期、失效

5.5.3若解决上述因素仍无法改善质控结果，必须考虑进行仪器校准及调校，联系厂家工程师进行。

6 操作步骤

6.1测试前准备：检查试剂、清洁液、冲洗液、反应杯等足够当日使用，仪器开机自检OK无报

警； 6.2开机：电源开关位于仪器左侧，打开到“ON”状态，开机后仪器自检……约5分钟,屏幕上方 \

Ready \ 变为 \ Ready \,提示可进行检测；

6.3每日针冲洗：在主屏幕上选“Rinse Probe”，然后按下“Execute”进行针冲洗

6.4标本上机操作步骤：

6.4.1常规标本检测：

从主菜单 选 [ Work List ]---->出现第一架样本工作清单输入画面,选 [ ID. No. Entry ],

输入第一个样本编号------>按相应实验项目名称键 (如 [ PT ]、[APTT]…), 输入此标本每项要

测试项目……则选中项目相应位置标记为\ --> 用↑↓键,同样输入其他病人的编号、项目,

全部输入完, 仪器接受所输入的工作任务, 按键[NEXT] 为下一样本架 ,继续输入…....

将检体按编号顺序摆入普通样本架，放置好在进样器上，在仪器Ready状态下，按 即可

6.4.2急诊标本检测：在检测过程中如有紧急检体插入，按 [STAT] ，选择[ STAT Holder ] ，当提示

是否要设置急诊标本，选择 [ OK ]，中间5个急诊专用位置设置画面出现，确认急诊位置处指 示灯为绿色，向内推打开急诊小门，按顺序放置好急诊标本，按一下急诊小门左侧门按纽，门 关闭。用[ ID No. Entry]输入相应急诊样本标号，如6.3.1一样按项目名称键为每标本选择要测 试的项目，确认，按，开始急诊检测。

6.4.3 查看结果：返回主屏幕，检测的项目如果由“◎”变为“●”表明此试验已经完成，然后按下

“Stored Data”（储存结果）键，屏幕会换到结果显示界面，按下边第一个菜单“Graph”，查看凝 集曲线、吸光度、结果等，检查是否有Error错误信息，有错误报警的标本需考虑重测

6.4.4关机前冲洗针：关机前需要洗针，按下“Rinse Probe”，然后按下“Execute” 6.4.5关机：回到主屏幕下，切断仪器电源，关闭打印机。

7 维护保养

7.1 每日维护：

7.1.1 清空已用过的反应杯:,从仪器左侧取出废杯箱--->倒空废杯--->清洁废杯箱并放回 清洁试剂位：打开遮光盖--->把试剂架取出. 将试剂架连同试剂放入冰箱，--->用棉纱

布擦干净试剂位冷凝水--->盖好遮光盖

7.2 每周维护

7.2.1 液路冲洗:仪器在\状态下,从主菜单按[Special Menu]--->按[Maintain]键--->按[Rinse&Prepare]键--->按[Execute]键,运行此程序--->完成后按[Return]键返回

7.2.2 清洁仪器:定期用纱布、棉纤等擦干净仪器内外;包括放试剂位置、放反应杯位置、检测通 道和各处表面位置….

7.3 需要时维护：

7.3.1 当有压力报警时，调整压力:仪器在\状态下,从主菜单按[Special Menu]--->按 [Maintain]键--->按[Pressure Adjust.] 键,显示压力是否在其调整范围内？（1.0Kg和2.2Kg压力 可调，负压不可调）若否, 则打开仪器右侧相应的压力调整旋钮(开锁),旋动调整至允许范围--->锁紧 旋钮

7.3.2 当提示“Replace Lamp Unit”，提示亮度不够（≈2000小时寿命），需更换灯泡:关机--->从

仪器右侧取下灯泡外盖及内盖--->更换好的灯泡--->装上内外盖--->从主菜单按Special Menu]---> 再按[Maintain] --->再按[Calib. Lamp]--->确认关上遮光盖,按[Execute]键运行调整程序

8 健康和安全操作指南 所有操作维护需注意以下：

9 参考附件

9.1《CA1500 OPERATOR’S MANUAL》 9.2 《CA1500常规操作流程》

9.3 《CA1500日常维护及常见故障处理》

文件編號：Lab.SOP-COA-0002 版 次：01 单位名称： 标准操作规程 —— 活化部分凝血活酶时间测定（APTT） 編修日期：05.09.15 頁 次：第 頁共 頁 编 写：

1.项目名称：

活化部分凝血活酶时间（Activated Partial Thromboplastin Time, APTT） 2.检验原理：

2.1.检测原理：全自动血凝仪测定，散射光凝固法检测——血浆样本经过一定时间的温育后，加入反

应试 剂，仪器采用波长为660nm的光照射反应物，通过测量散射光光强度的改变来测定凝血过程（纤维蛋白原 转化为纤维蛋白）中的浊度变化，从散射光光强度的测定可得凝集曲线，再通过百分比原理方法求得凝血 时间。

2.2. 反应方法学溯源：37℃条件下，以鞣花酸激活因子Ⅻ和Ⅺ，以脑磷脂（部分凝血活酶）代替血小板， 在Ca2+参与下，观察贫血小板血浆凝固所需时间，即为活化部分凝血活酶时间，是内源凝血系统较敏感和 常用的筛选试验。

3.设备参数：

3.1.设备:仪器型号Sysmex CA1500全自动血凝分析仪

3.2.分析和计算参数：报告单位 秒(S)

3.3.样本量：50μl ,试剂量:50ul激活剂,50ul CaCl2

3.4.检验时间：在最长检验时间之内测出结果，标准设置最长检验时间：190秒 3.5.重复性：CV≤2%

4.试剂及配套品：

4.1.激活剂:Cephaloplastin试剂（Dade? Actin? Activated Cephaloplastin Reagent）

4.1.1.商标：德灵（DADE BEHRING）

4.1.2.包装规格： 10×2ml 4.1.3.货号：B4218-1 4.1.4.成分：脑磷脂（从干燥兔脑粉中提取）加入含有缓冲液、稳定剂和防腐剂的1.0×10-4M的 鞣花酸溶液 4.1.5.使用方法:液体试剂,直接使用. 4.1.6储存:没开盖试剂放2~8℃存放至包装有效期,开盖后2~8℃有效期7天

4.2. 氯化钙溶液（Calcium Chloride Solution）

4.2.1.商标：德灵（DADE BEHRING） 4.2.2.包装规格：10×15ml 4.2.3.货号：ORHO 37

4.2.4.成分：0.025mol/L的氯化钙溶液 4.2.5.使用方法:液体试剂,直接使用. 4.2.6储存:没开盖试剂放2~8℃存放至包装有效期,开盖后2~8℃有效期7天

4.3． 清洗液（Clean I） :用于测定过程中的吸样针冲洗

4.3.1.商标：希森美康（Sysmex） 4.3.2.包装规格：50ml 4.3.3.货号：GSA500A

4.3.4.成分：1%次氯酸钠及活性成分 4.3.5.使用方法:液体试剂,直接使用. 4.3.6储存:没开盖试剂放2~8℃存放至包装有效期,开盖后放于仪器上有效期仅24小时

4.4.校准质控血浆（Ci-Trol?）

4.4.1.商标：德灵（DADE BEHRING）

4.4.2货号： Level 1 (Normal), 291070 10×1ml Level 2 (Abnormal),291071 10×1ml

Level 3 (Abnormal), 291072 10×1ml 4.4.3.使用方法:1ml蒸馏水溶解置室温15分钟后使用 4.4.4储存: 室温: 2h, 2~8℃: 4h,冷冻分装保存：-20°C <2周,-70°C <6个月

5. 操作步骤：

5.1. 开机：开打印机电源→开CA1500仪器右侧电源→开机后机器进行自检、预热， 当屏幕

上显示“Ready”时可以进行试验 5.2.每日针冲洗：在主屏幕上选“Rinse Probe”，然后按下“Execute”进行针冲洗

5.3.准备试剂：按照仪器试剂位置设定，把上述每项的试剂准备好，放在相应的位置 5.4.准备反应杯：打开仪器顶部反应杯储存槽，查看反应杯是否够量，需及时添加

5.5.准备标本：将室内质控和离心好的样本放在相应的样本架上（一个架子可放10个样本），

准备好放在进样器上 5.6.输入试验项目：按下主菜单上的“Work List”键，在试验项目键点击APTT，使APTT项目下

显示“—”变为“○”，按“↑或↓”将需要测试标本如上操作选择； 5.7.输入样本号：按下“ID No.Entry”，按顺序输入样本的序号或病人的病历号 5.8.开始检测：待一切准备工作就绪，按下屏幕右上角“START”键，仪器开始检测…

5.9.查看结果：返回主屏幕，检测的项目如果由“◎”变为“●”表明此试验已经完成，然后按下

“Stored Date”（储存结果）键，屏幕会换到结果显示界面，按下边第一个菜单“Graph”， 查看凝集曲线、吸光度、结果等，检查是否有Error错误信息，有错误报警的标本需考 虑重测 5.10.关机前冲洗针：关机前需要洗针，按下“Rinse Probe”，然后按下“Execute” 5.11.关机：回到主屏幕下，切断仪器电源，关闭打印机。

6. 参考范围：APTT (sec)：25~35s

7. 临床意义：常用来筛选内源性凝血系统（VIII、IX、XI、XII）及肝素抗凝治疗的监测

7.1.APTT延长：见于先天性凝血因子缺乏（如血友病甲、乙，接触因子XII、XI缺乏，VWF等）；多种凝血子缺乏（如严重肝病、维生素K缺乏、DIC、纤溶亢进等）；血液中有抗凝物存在 7.2.对内源凝血途径因子（Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ）缺乏较CT敏感（血小板异常不影响APTT）能检出Ⅷ：C小于25%的轻型血友病。对凝血酶原、纤维蛋白原缺乏则不够敏感，故APTT延长的最常见疾病为血友病。此时可进一步做纠正试验，即于患者血浆中加入1/4量的正常新鲜血浆、硫酸钡吸附血浆或正常血清（试剂参见凝血酶原消耗试验的纠正试验），再做APTT，如正常血浆和吸附血浆能纠正延长的结果而血清不能纠正，则为因子Ⅷ缺乏；如吸附血浆不能纠正，其余两者都能纠正，则为因子Ⅸ缺乏；如三者都不能纠正，则为病理性循环抗凝物质。 7.3. APTT缩短：见于DIC高凝期和妊娠高血压综合症等高凝状态

7.4. 是监测肝素治疗的首选指标::在使用肝素治疗时，多用APTT监测药物用量，一般以维持结果为基础值的2倍左右

8.标本要求：

8.1.使用3.8%拘橼酸钠溶液作为抗凝剂； 8.2.血样与抗凝剂的比例为9:1，如果血球压积<20%或>55%，则需调整这个比例，方法是：0.00185×血液毫升数×(100-压积)=抗凝剂毫升数；

8.3.血浆分离（如果不能立即测试，应尽快分离血浆）；

一采样后60分钟内进行；

一分离血浆应在3000r/min 离心10分钟，务使血小板去除；

8.4.血浆保存条件：

温度 室温 2—8℃ -20℃ 有效时间 ≤2hr ≤4hr ≤2Weeks -70℃ ≤6months 8.5.低温保存的样品，要在37℃迅速解冻，减低凝血因子的消耗，并立即测试。

8.6.所有与标本接触的试管、吸管等均采用用塑料或硅化处理的。

8.7. 拒收标本:严重溶血、黄疸、脂血或出现凝块,距采集时间超过2小时并且没有按要求储存的

9. 参考依据：《CA1500全自动血凝仪使用手册》，试剂使用说明书 10. 附件：

10.1 CA1500常规操作流程 10.2. APTT试剂使用说明书

文件編號：Lab.SOP-COA-0003 版 次：01 单位名称： 标准操作规程 —— 凝血酶原时间测定（PT） 編修日期：05.09.15 頁 次：第 頁共 頁 编 写：

1.项目名称：血浆凝血酶原时间测定（prothrombin time ，PT）

2.检验原理：

2.1.检测原理：全自动血凝仪测定，散射光凝固法检测原理——血浆样本经过一定时间的温育后，加

入反应试剂，仪器采用波长为660nm的光照射反应物，通过测量散射光光强度的改变来测定凝血过 程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中的浊度变化，从散射光光强度的测定可得凝集曲线，再通过百分 比原理方法求得凝血 时间。 2.2. 反应方法学溯源：

凝血酶原时间（PT）测定是Quick于1935年创立的。在受检血浆中加入过量的组织凝 血活酶（人 脑、兔脑、胎盘及肺组织等制品的浸出液）和钙离子，使凝血酶原变为凝血 酶，后者使纤维蛋白 原转变为纤维蛋白。观察血浆凝固所需要的时间即凝血酶原时间。 其凝固时间取决于凝血因子Ⅱ、 Ⅶ、Ⅴ、Ⅹ、Ⅰ的水平。该试验是反映外源凝血系统最 常用的筛选试验。

3.设备参数：

3.1.设备:仪器型号Sysmex CA1500全自动血凝分析仪

3.2.分析和计算参数：凝血酶原时间-秒(S), 国际标准化比值-INR, 凝血酶原活动度-%, 凝血酶原比值 -PTR

3.3.样本量：50μl ,试剂量:100ul0

3.4.检验时间：在最长检验时间之内测出结果，标准设置最长检验时间：120秒 3.5.重复性：CV≤2%

4.试剂及配套品：

4.1. 反应试剂:凝血活酶含钙试剂（Thromborel? S） 4.1.1商标：德灵（DADE BEHRING）

4.1.2包装规格： 10×10ml

4.1.3使用方法:每瓶用10ml蒸馏水溶解,须放置室温或37℃30分钟后才使用

保存:未溶解试剂2~8℃ 至包装有效期,试剂溶解后2~8℃ ：7天

4.1.4货号： OUHP49

4.1.5参数：ISI（国际敏感度指数）≈1.02

(每次更换试剂批号需将包装中所附ISI指数表中对应仪器型号的ISI值输入仪器中.(输入方法:主菜单→STANDARD CURVE→SELECT TEST→PT→MANUAL ENTR

Y→光标在ISI处输入ISI值

4.1.5.成分：Thromborel? S Reagent中包含 :

a. 冻干人胎盘促凝血酶原激酶（lyophilized human placental thromboplastin） b. 氯化钙 (calcium chloride) c. 稳定剂 (stabilizers) d.防腐剂（Preservatives）

4.2． 清洗液（Clean I） :用于测定过程中的吸样针冲洗 4.2.1.商标：希森美康（Sysmex）

4.2.2.包装规格：50ml

4.2.3.货号：GSA500A 4.2.4.成分：1%次氯酸钠及活性成分 4.2.5.使用方法:液体试剂,直接使用.

4.2.6储存:没开盖试剂放2~8℃存放至包装有效期, 开盖后放于仪器上有效期仅24小时

4.3 标准血浆: （Standard Human Plasma）-用于PT%的定标校准

4.3.1商标：德灵（DADE BEHRING）

4.3.2货号： ORKL 13 4.3.3包装:6X1ml 4.3.4.使用方法:1ml蒸馏水溶解,放置15分钟后使用 4.3.5储存:没开配试剂放2~8℃存放至包装有效期, 开配后保存条件: 室温: 2h, 2~8℃: 4h, -20°C分装冷冻保存：<2周, -70°C分装冷冻保存：<6个月

4.4.质控血浆（Ci-Trol?）

4.4.1.商标：德灵（DADE BEHRING）

4.4.2货号： Level 1 (Normal), 291070 10×1ml Level 2 (Abnormal),291071 10×1ml Level 3 (Abnormal), 291072 10×1ml

4.4.3.使用方法:1ml蒸馏水溶解置室温15分钟后使用

4.4.4储存: 没开配试剂放2~8℃存放至包装有效期, 开配后保存条件: 室温: 2h, 2~8℃: 4

h,冷冻分装保存：-20°C <2周,-70°C <6个月

5. 操作步骤：

5.1. 开机：开打印机电源→开CA1500仪器右侧电源→开机后机器进行自检、预热， 当屏幕上显示“Ready”时可以进行试验 5.2.每日针冲洗：在主屏幕上选“Rinse Probe”，然后按下“Execute”进行针冲洗

5.3.准备试剂：按照仪器试剂位置设定，把上述每项的试剂准备好，放在相应的位置 5.4.准备反应杯：打开仪器顶部反应杯储存槽，查看反应杯是否够量，需及时添加

5.5.准备标本：将室内质控和离心好的样本放在相应的样本架上（一个架子可放10 个样本），

准备好放在进样器上 5.6.输入试验项目：按下主菜单上的“Work List”键，在试验项目键点击PT，使PT项目下显示“—”

变为“○”，按“↑或↓”将需要测试标本如上操作选择； 5.7.输入样本号：按下“ID No.Entry”，按顺序输入样本的序号或病人的病历号

5.8.开始检测：待一切准备工作就绪，按下屏幕右上角“START”键，仪器开始检测…

5.9.查看结果：返回主屏幕，检测的项目如果由“◎”变为“●”表明此试验已经完成，然后按下

“Stored Date”（储存结果）键，屏幕会换到结果显示界面，按下边第一个菜单“Graph”，查 看凝集曲线、吸光度、结果等，检查是否有Error错误信息，有错误报警的标本需考虑重测 5.10.关机前冲洗针：关机前需要洗针，按下“Rinse Probe”，然后按下“Execute” 5.11.关机：回到主屏幕下，切断仪器电源，关闭打印机。

6. 参考范围： PT（sec）：10.8—13.5 s

PT% ：80%—120% PTR ：0.85 - 1.15 INR ：0.8—1.20

7. 临床意义：

7.1.PT延长 :

7.1.1外源凝血系统的因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ和纤维蛋白原减低，如先天性某因子缺乏症和低 （无）纤维蛋白原血症，但均很少见，获得性的见于DIC、原发性纤溶、维生素K缺乏症、肝脏 疾病等。

7.1.2．血循环中抗凝物质增加，如肝素或FDP增多等。 7.2. PT缩短 :口服避孕药、高凝状态和血栓性疾病等。

7.3.用于香豆素类等口服抗凝剂的监控 7.3.1一般认为以维持PT值在参考值的2倍左右（1.3~2.5倍），或PTR为1.3~1.5（最大不 超过2）为宜。 7.3.2．PT%应控制在40%以上，减低到40%有出血倾向。 7.3.3．不同情况下口服抗凝药治疗的最佳抗凝强度时INR的范围： a.术前两周或术中口服抗凝药，INR为1.5—3.0； b.原发或继发静脉血栓的预防，INR为2—3；

c.活动性静脉血栓、肺梗塞、复发性静脉血栓的预防，INR为2—4； d.动脉血栓栓塞的预防，心脏换瓣术后，INR为3—4.5。

8.标本要求：

8.1.使用3.8%拘橼酸钠溶液作为抗凝剂； 8.2.血样与抗凝剂的比例为9:1，如果血球压积<20%或>55%，则需调整这个比例，方法是：0.00185×血液毫升数×(100-压积)=抗凝剂毫升数；

8.3.血浆分离（如果不能立即测试，应尽快分离血浆）；

一采样后60分钟内进行；

一分离血浆应在3000r/min 离心10分钟，务使血小板去除；

8.4.血浆保存条件： 温度 室温 2—8℃ -20℃ -70℃ 有效时间 ≤2hr ≤4hr ≤2Weeks ≤6months 8.5.低温保存的样品，要在37℃迅速解冻，减低凝血因子的消耗，并立即测试。

8.6.所有与标本接触的试管、吸管等均采用用塑料或硅化处理的。

8.7. 拒收标本:严重溶血、黄疸、脂血或出现凝块,距采集时间超过2小时并且没有按要求储存的

9. 参考依据：《CA1500全自动血凝仪使用手册》，试剂使用说明书

10. 附件：

10.1 CA1500常规操作流程 10.2. PT试剂使用说明书 文件編號：Lab.SOP-COA-0004 版 次：01 单位名称： 标准操作规程 — 血浆纤维蛋白原定量测定（Fib） 編修日期：05.09.15 頁 次：第 頁共 頁 编 写：

1.项目名称：

纤维蛋白原(Fibinogen)

2.检验原理：

2.1.检测原理：全自动血凝仪测定，散射光凝固法检测原理——血浆样本经过一定时间的温育后，加

入反应试剂，仪器采用波长为660nm的光照射反应物，通过测量散射光光强度的改变来测定凝血过程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中的浊度变化，从散射光光强度的测定可得凝集曲线，再通过百分比原理方法求得凝血时间.先用此方法分别测定不同FIB浓度的标准血浆制定横坐标为凝血时间,纵坐标为Fib浓度的Fib标准曲线,在测定病人血浆时测定的凝血时间与标准曲线上对应的时间-浓度值一一对应,仪器则自动报告出Fib含量(g/L).

2.2. 反应方法学溯源：纤维蛋白原测定（Clauss法）原理-37℃条件下，凝血酶将可溶性的血浆蛋白纤维蛋白原转化为不溶性的多聚体纤维蛋白。当凝血酶浓度较高（约为100NIH/ml）且纤维蛋白原浓度较低（0.05—0.8g/L）时该反应决定于纤维蛋白原浓度,凝血酶凝血时间与纤维蛋白原浓度相比较呈线形关系。

3.设备参数：

3.1.设备:仪器型号Sysmex CA1500全自动血凝分析仪

3.2.分析和计算参数：报告单位 秒(S),Fib定量g/L

3.3.样本量：1/10稀释标本100ul(10ul血浆+90ul缓冲液),试剂量:50ul 3.4.检验时间：在最长检验时间之内测出结果，标准设置最长检验时间：190秒 3.5.重复性：CV≤4%

4.试剂及配套品：

4.1.反应试剂：凝血酶试剂（Thrombin Reagent）

4.1.1商标：德灵（DADE BEHRING） 4.1.2包装规格： 10×5ml 4.1.3货号：B4233-27

4.1.4成分：牛凝血酶冻干粉（lyophilized preparation of bovine thrombin）（近似

100 NIH units/ml）

4.1.5使用方法:5ml蒸馏水充分溶解后使用 4.1.6储存: 没开配试剂放2~8℃存放至包装有效期, 开配后保存条件: 2~8℃: 5天

4.2．缓冲液（Dade? Owren'S Veronal Buffer或CA System Buffer）--用于标本稀释 4.2.1商标：德灵（DADE BEHRING）

4.2.2包装规格： 10×15ml或1X500ml 4.2.3货号：B4234-25或B4265-35

4.2.4成分： a.2.84×102M的巴比妥钠 (sodium barbital) b.1.25×101M的氯化钠 (sodium chloride) c.PH 7.35±0.1

4.2.5使用方法:每次倒出刚够当天使用的量放置于仪器上使用. 4.2.6储存: 没开配试剂放2~8℃密封存放至包装有效期, 开盖后放置仪器上保存:＜24h,使用放置时

间太长的缓冲液会导致凝血时间延长即Fib含量测定偏低!

4.3. 清洗液（Clean I） :用于测定过程中的吸样针冲洗 4.3.1.商标：希森美康（Sysmex）

4.3.2.包装规格：50ml 4.3.3.货号：GSA500A

4.3.4.成分：1%次氯酸钠及活性成分 4.3.5.使用方法:液体试剂,直接使用.

4.4 标准血浆: （Standard Human Plasma）-用于Fib的定标校准

4.4.1商标：德灵（DADE BEHRING）

4.4.2货号： ORKL 13 4.4.3包装:6X1ml 4.4.4.使用方法:1ml蒸馏水溶解,放置15分钟后使用 4.4.5储存:没开配试剂放2~8℃存放至包装有效期, 开配后保存条件: 室温: 2h, 2~8℃: 4h, -20°C分装冷冻保存：<2周, -70°C分装冷冻保存：<6个月

4.5.质控血浆（Ci-Trol?）

4.5.1.商标：德灵（DADE BEHRING）

4.5.2货号： Level 1 (Normal), 291070 10×1ml Level 2 ,291071 10×1ml Level 3 , 291072 10×1ml

4.5.3.使用方法:1ml蒸馏水溶解置室温15分钟后使用

4.5.4储存: 没开配试剂放2~8℃存放至包装有效期, 开配后保存条件: 室温: 2h, 2~8℃: 4

h,冷冻分装保存：-20°C <2周,-70°C <6个月

5. 操作步骤：

5.1. 开机：开打印机电源→开CA1500仪器右侧电源→开机后机器进行自检、预热， 当屏幕上显示“Ready”时可以进行试验 5.2.每日针冲洗：在主屏幕上选“Rinse Probe”，然后按下“Execute”进行针冲洗

5.3.准备试剂：按照仪器试剂位置设定，把上述每项的试剂准备好，放在相应的位置 5.4.准备反应杯：打开仪器顶部反应杯储存槽，查看反应杯是否够量，需及时添加

5.5.准备标本：将室内质控和离心好的样本放在相应的样本架上（一个架子可放10个样本）准

备好放在进样器上 5.6.输入试验项目：按下主菜单上的“Work List”键，在试验项目键点击FIB，使FIB项目下显示“—”

变为“○”，按“↑或↓”将需要测试标本如上操作选择； 5.7.输入样本号：按下“ID No.Entry”，按顺序输入样本的序号或病人的病历号 5.8.开始检测：待一切准备工作就绪，按下屏幕右上角“START”键，仪器开始检测…

5.9.查看结果：返回主屏幕，检测的项目如果由“◎”变为“●”表明此试验已经完成，然后按下

“Stored Date”（储存结果）键，屏幕会换到结果显示界面，按下边第一个菜单“Graph”，查看凝集曲线、吸光度、结果等，检查是否有Error错误信息，有错误报警的标本需考虑重测

5.10.关机前冲洗针：关机前需要洗针，按下“Rinse Probe”，然后按下“Execute” 5.11.关机：回到主屏幕下，切断仪器电源，关闭打印机。

6. 参考范围： Fbg ：2—4g/L 7. 临床意义：

7.1.Fib减少见于：

先天性低（无）纤维蛋白原血症、严重肝脏疾病、原发性纤维蛋白溶解、DIC、异常纤 维蛋白原血症、新生儿及早产儿、某些产科意外、恶性肿瘤等。 7.2. Fib增高见于：

各种血栓前状态及血栓栓塞病、月经期及妊娠期、糖尿病、动脉硬化、结缔组织病、手 术后、休克、癌肿、骨髓瘤、放射治疗后等。

8.标本要求：

8.1.使用3.8%拘橼酸钠溶液作为抗凝剂； 8.2.血样与抗凝剂的比例为9:1，如果血球压积<20%或>55%，则需调整这个比例，方法是：0.00185×血液毫升数×(100-压积)=抗凝剂毫升数； 8.3.血浆分离（如果不能立即测试，应尽快分离血浆）；

一采样后60分钟内进行；

一分离血浆应在3000r/min 离心10分钟，务使血小板去除； 8.4.血浆保存条件：

温度 室温 2—8℃ -20℃ -70℃ 有效时间 ≤2hr ≤4hr ≤2Weeks ≤6months 8.5.低温保存的样品，要在37℃迅速解冻，减低凝血因子的消耗，并立即测试。

8.6.所有与标本接触的试管、吸管等均采用用塑料或硅化处理的。

8.7. 拒收标本:严重溶血、黄疸、脂血或出现凝块,距采集时间超过2小时并且没有按要求储存的

9. 参考依据：《CA1500全自动血凝仪使用手册》，试剂使用说明书

10. 附件：

10.1 CA1500常规操作流程 10.2. FIB试剂使用说明书

编写者: 日 期：

科主任签字： 文件編號：Lab.SOP-COA-0005 版 次：01 单位名称： 标准操作规程 —— 凝血酶时间测定（TT） 編修日期：05.09.15 頁 次：第 頁共 頁 编 写： 1.项目名称：血浆凝血酶时间测定（Thrombin time ，TT）

2.检验原理：

2.1.检测原理：全自动血凝仪测定，散射光凝固法检测原理——血浆样本经过一定时间的温育后，加

入反应试剂，仪器采用波长为660nm的光照射反应物，通过测量散射光光强度的改变来测定凝血过 程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中的浊度变化，从散射光光强度的测定可得凝集曲线，再通过百分 比原理方法求得凝血时间。

2.2. 反应方法学溯源：

受检血浆中加入凝血酶试剂，使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，观察血浆凝固所需的时间即凝血酶时间。

3.设备参数：

3.1.设备:仪器型号Sysmex CA1500全自动血凝分析仪

3.2.分析和计算参数：凝血酶原时间-秒(S)

3.3.样本量：50μl ,试剂量:100ul0

3.4.检验时间：在最长检验时间之内测出结果，标准设置最长检验时间：120秒 3.5.重复性：CV≤4%

4.试剂及配套品：

4.1. 反应试剂:凝血活酶含钙试剂（Test Thrombin Reagent ） 4.1.1商标：德灵（DADE BEHRING）

4.1.2包装规格： 10×5ml，货号： OWHM13

4.1.3使用方法:每瓶用5ml专用缓冲液溶解,须放置室温10分钟后才使用

保存:未溶解试剂2~8℃ 至包装有效期,试剂溶解后2~8℃ ：7天 机上有效期（15℃）：10小时

4.1.4.成分：试剂成分为凝血酶冻干品

4.2． 清洗液（Clean I） :用于测定过程中的吸样针冲洗

4.2.1.商标：希森美康（Sysmex）

4.2.2.包装规格：50ml 4.2.3.货号：GSA500A

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