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饲料添加剂 木聚糖酶

编制说明

（报批稿）

1 标准制定背景及任务来源 1.1制定背景

木聚糖酶指可将木聚糖降解为低聚糖和木糖的一类酶。目前，随着玉米等常规饲料原料供应日趋紧张，麦类及杂粕类非常规饲料原料的使用逐渐增多。麦类及杂粕类原料中的木聚糖具有一定的抗营养作用，由此，作为木聚糖的降解酶，木聚糖酶在畜禽养殖业的用量正在不断提高。但是，尽管饲料添加剂木聚糖酶产品市场活跃，但我国目前没有相应的产品标准。所以制定《饲料添加剂 木聚糖酶》标准，用以规范饲料添加剂木聚糖酶产品的生产和经营，尤为必要，将对保障我国饲料安全具有重要的意义。 1.2任务来源

本标准制订任务于2011年度下达，项目计划编号20100293-Q-469，由中国农业科学院北京畜牧兽医研究所、武汉新华扬生物股份有限公司和广东溢多利生物科技股份有限公司负责起草，由农业农村部提出并归口。

2 国内外木聚糖酶生产和质量标准情况 2.1国内外木聚糖酶生产情况

目前国内外生产厂家大多采用液体深层发酵生产木聚糖酶，产品以固体剂型为主，也有少量液体产品。其中，木聚糖酶液体产品生产工艺流程为：菌种培养→接种→发酵→板框过滤→精滤→浓缩或稀释→成品包装。菌种经过斜面培养、摇瓶培养后接种到种子罐培养，在种子罐中生长到合适时转移到发酵罐继续生长；在发酵过程中配有自动在线监控系统监测温度、PH值、溶氧等指标，然后根据数据显示及时调整发酵环境和补充原料，同时会按规定的时间间隔取发酵液测酶活，以准确判断其生长情况；在微生物生长到一定程度，停止发酵，放罐，经过板框粗滤、精滤进行固液分离，得到液体木聚糖酶半成品，稳定化处理后的液体酶半成品通过浓缩或添加不同比例的饮用水稀释成不同酶活规格的液体酶产品，然后按要求计量、包装；木聚糖酶固体产品生产工艺流程为：菌种培养→接种→发酵→板框过滤→浓缩→喷雾干燥→成品包装。板框过滤后，需要生产粉状固体酶时，在发酵液中加入载体（玉米淀粉等）混合均匀后，经喷雾干燥塔干燥，得到粉状酶半成品，添加载体（玉米淀粉、小麦粉等）将粉状酶半成品稀释成不同酶活规格的产品，按要求计量、包装；需要生产颗粒酶时，根据终端产品的酶活要求，在喷雾干燥前一次性添加载体，然后喷雾干燥制得颗粒酶成品，然后按要求计量、包装。

目前，国内市场占有率较大的生产厂家有新华扬生物股份有限公司、广东溢多利生物科技股份有限公司、北京昕大洋科技发展有限公司、北京挑战生物技术有限公司、宁夏夏盛实业集团有限公司、宁夏和氏壁生物技术有限和湖南尤特尔生化有限公司等，此外，还有巴斯夫、丹尼斯克、迪斯曼和阿迪苏合AB酶制剂等国际品牌产品。国内可用于生产木聚糖酶的发酵菌种有米曲霉、黑曲霉、毕赤酵母和里氏木霉，国外常用的菌种有黑曲霉、米曲霉、里氏木霉、长柄木霉和绿色木霉等。 2.2国内外木聚糖酶质量标准情况

国内与饲料添加剂木聚糖酶相关的标准有：国家标准GB/T 23874《饲料添加剂 木聚糖酶活力的测定 分光光度法》和农业行业标准NY/T 722《饲料用酶制剂通则》。通常，国内生产企业在执行《饲

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料用酶制剂通则》的基础上，制定企业产品标准，经质监局备案或网上公示后使用，采用GB/T 23874《饲料添加剂 木聚糖酶活力的测定 分光光度法》测定木聚糖酶酶活。

欧盟没有针对饲料添加剂的具体产品标准，也没有统一的检测方法标准。所有饲料添加剂生产企业依据Regulation (EC) No 1831/2003（动物营养中添加剂的使用）向欧盟委员会（European Commission）申请饲料添加剂的授权。以饲用酶制剂为例，企业在申请材料中要写明酶的名称及其国际编号、生产菌株、最低酶活、检测方法、最小使用量、适用动物种类、试验研究等信息。欧盟委员会移交申请材料到欧洲食品安全局（EFSA），欧共体参比实验室（the Community Reference Laboratory）负责对其检测方法进行评估和验证，并向EFSA提供验证报告。在申请提交后的6个月内EFSA发表自己对该申请的观点，欧盟委员会在收到EFSA观点的3个月内作出关于同意或拒绝授权的规定（Regulation），并在Official Journal of European Union上予以发表。同意授权的规定以列表的形式载有每一种酶制剂产品的名称及其国际编号、生产菌株、最低酶活、检测方法、最小使用量、适用动物种类及授权有效期等信息。各企业使用的酶活测定方法并不相同，酶活单位也不相同（见表1）。

表1 欧盟授权通过的部分饲添加剂木聚糖酶产品酶活和检测方法等信息

名称 菌种 最小酶活 分析方法 酶活单位 1 VU：在30 °C、pH 5.5的条件下，每分钟降低小麦阿拉伯糖基木聚糖液体粘度，从而引起1个液体相对流动性改变所需的酶量。 1 IU：在pH 4.5、30 °C条件下 ，每分钟从桦木木聚糖中释放1mmol还原糖（木糖等价物）所需的酶量。 1 U：在pH 5.3 、50 °C 条件下，每分钟从桦木木聚糖中释放0.0067 mmol还原糖（木糖等价物）所需的酶量。 1 TXU：在pH 3.5、 55 °C条件下，每分钟从小麦阿拉伯糖基木聚糖中释放5mmol还原糖（木糖等价物）所需的酶量。 1 U： 在pH 5.3、50°C 条件下，每分钟从桦木木聚糖中释放0.0067 mmol还原糖（木糖等价物）所需的酶量。 1 FXU：在pH 6.0、50 °C条件下，每分钟从天青交联小麦阿拉伯糖基木聚糖中释放7.8 mmol还原糖（木糖等价物）所需的酶量。 1 U：在pH 4.2、50 °C条件下，每分钟从天青交联小麦阿拉伯糖基木聚糖中释放0.48 μmol还原糖所需的酶量。 1 EPU：在pH 4.7、50 °C条件下，每分钟从燕麦木聚糖中释放0.0083 μ饲料中最少添加量U/kg 1100 VU 760 VU 厂家 REGULATION (EU) 含有内切-1,4-β-木聚糖酶的复合酶 Talaromyces versatilis sp. nov. IMI CC 378536；DSM 26702 异变踝节菌 固体酶: 22000 VU/g 液体酶： 5500 VU/ml 粘度法 Adisseo S.A.S. France 2017/210 内切-1,4-β-木聚糖酶 Bacillus subtilis LMG-S 15136 枯草芽孢杆菌 固体酶、液体酶 400 IU/g 比色法 10 IU Beldem,divisionof Puratos NV. 2017/211 含有内切-1,4-β-木聚糖酶的复合酶 Trichoderma viride (NIBH FERM BP4842) 绿色木霉 Aspergillus Niger(CBS 109.713) 黑曲霉 Trichoderma viride(NIBH FERM BP4842) 绿色木霉 210000 U/g 比色法 10500 U Kemin NV Europa 2017/429 含有内切-1,4-β-木聚糖酶的复合酶 固体和液体酶： 5600 TXU/g 固体酶 35 000 U/g 粘度法 280TXU 560TXU BASF SE 2017/950 含有内切-1,4-β-木聚糖酶的复合酶 比色法 8750 U Kemin NV Europa 2017/963 内切-1,4-β-木聚糖酶 Aspergillus oryzae (DSM 26372)米曲霉 固体酶: 1 000 FXU /g 液体酶: 650 FXU/ml 固体酶、液体酶： 12 200 U/g 固体酶、液体酶 6000 EPU/g 比色法 100 FXU 200FXU DSM Nutritional Products Ltd 2017/1006 含有内切-1,4-β-木聚糖酶的复合酶 Trichoderma reesei (ATCC PTA 5588) 里氏木霉 Trichoderma citrinoviride Bisset(IM SD135) 比色法 1220 U 610U 1050 EPU 1500 EPU Danisco (UK) Ltd 2016/997 内切-1,4-β-木聚糖酶 比色法 Huvepharma NV 2015/1043 2

桔绿木霉 mol还原糖所需的酶量。 含有内切-1,4-β-木聚糖酶的复合酶 Trichoderma reesei(ATCC 74444) 里氏木霉 固体酶、液体酶 2700 U/ml 或 g 比色法 1 U：在pH5.0、40°C条件下，每分钟从小麦阿拉伯糖基木聚糖中释放1 mmol还原糖所需的酶量。 135 U 216 U 270U DSM Nutritional Products 2013/403

3主要工作过程

2011年3月，中国农业科学院北京畜牧兽医研究所、武汉新华扬生物股份有限公司和广东溢多利生物科技股份有限公司接到制标任务后，系统查阅分析了国内外有关标准资料、产品类型和主要生产企业的情况，组织召开了标准制定方案研讨会，参会人员经认真分析研究，初步拟定了标准的使用范围、要求等内容，并对有关试验工作与制标起草工作做了具体分工与安排。

2011年12月，在资料汇总、调研和实验室检测的基础上，提出了国家标准《饲料添加剂 木聚糖酶》征求意见初稿，通过发送Email征求意见，发函单位16个（其中包括1个政府部门，4个科研单位，2个大专院校，8个饲料企业，1个饲料检测部门），回函单位16个，未回函单位0个。其中，提出意见单位16个，无意见单位0个，共提出意见42条，起草小组采纳意见37条，部分采纳或未采纳意见5条，意见内容及处理情况见征求意见稿意见汇总处理表。在此基础上，起草小组根据意见对本标准文本和编制说明进行了修改和补充，形成了《饲料添加剂 木聚糖酶》征求意见稿。

2012年9月，召开了标准预审会。在预审会专家意见的基础上，扩大了采样范围和样本量，进一步完善和规范了标准文本，于2017年4月形成了国家标准《饲料添加剂 木聚糖酶》送审稿。

2017年4月10日，全国饲料工业标准化技术委员会组织专家对本标准送审稿进行了审查，根据与会专家意见，起草小组进一步采集样品，补充测定了饲料添加剂木聚糖酶样品中玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉毒素B1和T2-毒素的含量，并对国内外饲料添加剂木聚糖酶的生产和质量标准情况进行了调查研究。在此基础上，修改后形成本标准送审稿，并于2018年2月7日报送全国饲料工业标准化技术委员会秘书处。

2018年03月27日，全国饲料工业标准化技术委员会组织专家对国家标准《饲料添加剂 木聚糖酶》送审稿进行了再次审查，与会专家提出修改标准范围、要求中补充载体的规定、卫生指标中增加“汞”、编制说明中增加固体剂型水分和粒度的实测值等意见。起草小组根据审查意见，对标准文本和编制说明进行了修改和完善，形成了国家标准《饲料添加剂 木聚糖酶》报批稿，报送全国饲料工业标准化技术委员会秘书处。

4 编制原则及主要技术内容确定的依据 4.1本标准制定过程中遵循的基本原则

4.1.1以保护消费者利益，促进对外贸易，促进技术进步，规范产品质量为目的；

4.1.2市场调研和试验室抽检相结合，确定相关技术指标，保证标准的科学性和可操作性； 4.1.3查阅和研究国外相关法律法规和标准资料，结合我国实际情况，保证标准的先进性、衔接性和协调性；

4.1.4充分考虑标准的科学性和可操作性，使实验方法快速方便且易于推广执行；

4.1.5在标准编写的过程中，把木聚糖酶产品的技术指标、木聚糖酶酶活的检测方法和产品保质

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期的确定作为本标准的重点部分，保证其在规范饲料添加剂木聚糖酶产品质量中起到重要作用。 4.2主要技术内容确定的依据 4.2.1范围的确定

根据2018年3月27日的专家组审查意见，本标准适用于通过毕赤酵母液体发酵生产的液体或经干燥生产的固体饲料添加剂木聚糖酶。 4.2.2要求项目的确定

通过相关检索，未查到国外的同类产品标准，国内外的饲料生产过程中又比较普遍使用了木聚糖酶产品。因此，本标准在制定过程中主要参考了国内相关或类似标准内容，针对饲料添加剂木聚糖酶在生产和应用中的特点，在与生产企业反复研究讨论和对产品实际检测的基础上制定本标准。

酶活是衡量产品质量的关键指标，是饲料用酶制剂的核心内容。卫生指标是衡量产品是否安全、无毒的重要依据。所以，根据饲料添加剂木聚糖酶的产品特点，在市场调研的基础上把产品的感官指标、酶活、卫生指标、固体剂型水分和粒度、液体剂型pH值确定为本标准的要求项目。另外，饲料添加剂木聚糖酶产品在实际应用中有液体和固体两种剂型，各生产厂家的产品有其独特的形状、色泽、气味和包装。因此，本标准对产品的外观和包装未做统一的规定。饲料添加剂木聚糖酶的剂型不同，使用方法也随之不同；发酵后吸附载体的比例不同，在饲料中的添加比例也会不同，因此，对产品的使用剂量、使用方法未做统一的规定。 4.2.3要求参数的确定 4.2.3.1 感官指标的确定

根据市场调研和采样结果，确定固体产品的感官指标粒度均匀，流散性好，无发霉变质。无异味，有特殊发酵气味。液体产品的感官指标为允许有少量絮状物。无异味，有特殊发酵气味。 4.3.3.2 固体剂型水分和粒度的确定

现场采集了4个公司的37个固体产品，产品的覆盖率约为90%以上。实际检测其水分含量在6.0%至9.5%之间（表2）。考虑到产品储存过程中可能出现吸潮现象，确定了本标准中固体产品的含水量为≤12%。

现场采集了4个公司37个样品，产品的覆盖率约为90%以上，实测结果见表2。结合专家意见“由于各个商家所用载体不同，粒度差异会较大，并且有些产品进行了包被或微细颗粒工艺，同时考虑饲料颗粒分布及与酶制剂的兼容性，建议适当放宽上限，如1400 μm”，确定了本标准中固体产品的粒度参数为：至少80%通过1.4 mm 孔径分析筛。

表2 固体剂型木聚糖酶产品水分和粒度的检测结果 样品编号 1 2 3 4 5 6 7 8

水分(%) 6.2 6.4 6.9 6.3 6.1 6.5 7.1 6.8 4

粒度（0.42mm标准筛通过率%） 100 100 100 100 100 100 86.0 87.5 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37

4.2.3.3 液体产品pH值的确定

7.5 7.5 7.3 6.9 6.8 7.1 7.2 7.4 7.3 6.8 9.1 9.4 7.8 8.8 8.7 6.9 9.5 7.5 8.0 7.1 7.6 7.1 8.2 7.7 7.9 8.6 7.9 7.8 8.0 87.2 86.1 87.0 86.1 89.1 88.4 89.2 88.7 89.4 89.2 95.5 96.2 96.8 96.7 98.2 97.6 96.6 97.2 98.0 97.0 96.8 96.5 97.0 97.1 97.3 98.2 97.5 96.8 96.8 根据专家对液体产品pH值参数的建议“1、关于液体酶pH值 5.0-6.0: 酶的pH值对酶的贮存及稳定性有一定影响，同样，由于产品浓度不同及对稳定性要求不同，各厂家产品的pH值不同，以不影响酶的活性和生物学效价为基准，建议将下限下调，如4.5-6.0。” 2、建议把液体酶pH值范围放宽，“5.0-6.0”改成“4.0-6.0”。3、这一项是否可以不要，它跟产品质量没有关系。如果要的话，现在市场上经常看到有的是4.5，是否就定4～7。”，同时结合市场采样实测结果（见表3），确定了本标准中液体剂型的pH值为 4.5-6.5。

表3 液体木聚糖酶pH值抽样检测结果

编号 20110812-104 20120816-222 20150213-51 5

pH值 4.7 5.6 6.2

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