高考生物二轮复习专题限时集训（新课标）：专题十三　实验中常用

专题限时集训(十三)

[专题十三 实验中常用的技术和方法]

(时间：40分钟)

1．一般情况下，完成下列哪项实验不需要用到氯化钠溶液( ) A．观察口腔上皮细胞中核酸的分布 B．观察藓类叶片中的叶绿体

C．用显微镜观察红细胞的正常形态 D．对鸡血细胞中DNA粗提取

2．试剂或材料的选择是实验成功的关键，下列实验处理正确的是( ) A．制备纯净细胞膜时，可用鸡的红细胞代替猪的红细胞 B．人工诱导多倍体时，可用低温处理代替秋水仙素处理 C．观察线粒体时，可用嫩而薄的藓叶代替人的口腔上皮细胞 D．观察植物细胞有丝分裂时，可用吡罗红染液代替醋酸洋红液

3．下列关于实验的叙述中正确的是 ( ) A．氢氧化钠在不同大小的琼脂块(成分一致)中的扩散速率不同

B．氢氧化钙溶液能用来鉴定体外培养的人的某种细胞是否进行了有氧呼吸 C．探究生长素类似物促进植物插条生根的最适浓度时，不需要进行预实验 D．用含有尿素的培养基可以筛选出能分解尿素的微生物

4．下列实验的主要操作步骤有误，并影响实验结果的是 ( ) A 实验名称 脂肪的鉴定 操作步骤 取花生子叶切片→滴染液染色→吸水纸吸去多余的染液→滴酒精洗浮色→吸水纸吸去酒精→滴蒸馏水→盖盖玻片 取口腔上皮细胞涂抹在载玻片的液滴中→烘干→染色→吸去多余染液→盖盖玻片→镜检 培养不定根→低温诱导培养(4 ℃，36 h)→取材→卡诺氏液固定→酒精冲洗→解离→漂洗→染色→制片 切取含酚酞的琼脂块→浸没于NaOH溶液10 min→取出，吸干，纵切琼脂块→量取NaOH扩散深度→计算表面积/体积比 B 观察DNA和RNA在细胞中的分布 C 低温诱导植物染色体数目变化 D 探究细胞大小与物质运输的关系 5.在“观察植物细胞有丝分裂”实验中，三位实验人员制作洋葱根尖装片的操作步骤(“＋”表示操作，“－”表示未操作)如下表所示：

甲 乙 丙

操作 取材 根尖1～3 mm处 根尖1～3 mm处 根尖5～7 mm处 解离 － ＋ ＋ 漂洗 ＋ － ＋ 染色 ＋ ＋ ＋ 压片 ＋ ＋ ＋ 则甲、乙、丙观察到的实验现象分别是 ( ) A．细胞重叠、染色体着色很浅不清楚、细胞分散染色体清楚

B．细胞分散但看不到染色体、染色体着色清楚、细胞分散染色体清楚 C．细胞重叠、染色体着色很浅、细胞着色清楚但看不到染色体

D．染色体着色很浅不清楚、细胞分散染色体清楚、细胞分散染色体清楚 6．(双选)下列生物学研究方法正确的是( ) A．用层析液分离和提取绿叶中的色素

B．利用标志重捕法研究某种植物种群的密度

C．沃森和克里克用建构物理模型的方法研究DNA的结构 D．研究光合作用过程中碳元素的传递，可采用14C标记示踪 7．(双选)据表分析，下列说法正确的是( ) 组别 3%的淀粉溶液 3%的蔗糖溶液 2%的α-淀粉酶溶液 反应温度 碘液 ① 2 mL — 1 mL 0 ℃ 2滴 ② — 2 mL 1 mL 0 ℃ 2滴 ③ 2 mL — 1 mL 60 ℃ 3滴 ④ — 2 mL 1 mL 60 ℃ 2滴 ⑤ 2 mL — 1 mL 100 ℃ 2滴 ⑥ — 2 mL 1 mL 100 ℃ 2滴 注：表中“—”表示没有添加。 A．α-淀粉酶溶液的用量是无关变量

B．①②两组实验可用于验证酶的专一性 C．②④⑥三组实验可说明温度能影响酶活性

D．设计上述实验目的是验证酶的专一性和探究温度对酶活性的影响

8．(双选)利用一定浓度的过氧化氢溶液、海藻酸钠胶体和氯化钙溶液制备大小相同的凝胶珠，再进行以下实验(表中内容不完整)：

试管 1 2 3 加入2 mL过氧化氢 溶液(浓度：mol/L) 0.1 0.3 0.5 加入凝 胶珠(粒) 测定凝胶珠由试管 底部上浮到溶液表 面所需时间(min) 下列关于此实验的分析中正确的是( ) A．凝胶珠可以多次使用

B．试管1、2、3各加入的凝胶珠的数量要相同 C．3号试管凝胶珠上浮所需时间最长 D．此实验探究了酶的高效性

9．酵母菌是生物科学研究中一种重要的生物材料，在高中生物教材中有多个地方涉及酵母菌，如图6－13－1所示，请回答有关问题：

图6－13－1

(1)在①中，酵母菌与醋酸菌的共同点是________________________________。

(2)在②③的实验中，如何测定酵母菌有氧呼吸无酒精产生，而进行无氧呼吸过程中有酒精产生？

测定步骤如下，请补全：

取3支干净的试管编号A、B、C，在A、B两支试管中分别加入2 mL有氧呼吸、无氧呼吸的发酵液，在C试管中加入______________作为对照。在3支试管中分别滴加0.5 mL重铬酸钾的浓硫酸溶液并轻轻振荡，观察溶液是否变成________色。

(3)在④的实验中，如要连续7 天测定恒定体积和浓度的培养液中酵母菌种群数量的变化，需要用7支试管来培养并持续分别测定的原因是________________________________________。

其中操作正确的有________(填下列操作的序号)。

A．将适量干酵母放入装有一定浓度葡萄糖溶液的试管中，在适宜条件下培养 B．静置一段时间后，用吸管从试管中吸取培养液 C．在血球计数板中央滴一滴培养液，盖上盖玻片 D．用滤纸吸除血球计数板边缘多余培养液

E．将计数板放在载物台中央，待酵母菌沉降到计数室底部，在显微镜下观察、计数 (4)酵母菌在⑤中担任的角色是________________。

(5)在制作葡萄酒的过程中，假设某同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该错误操作是____________________________。

(6)在⑧操作中最关键的步骤是__________________。 10．以下是一个测定某植物细胞液浓度的实验： 实验步骤 实验示意图

①准备6组试管，在每组试管中注入等量不同浓度的蔗糖溶液 ②在每组的a试管中加入等量叶圆片和少量亚甲基蓝晶粒(对溶液浓度影响可忽略不计)，并定时轻摇 ③从每组a中吸取1小滴蓝色液滴，小心放入对应b试管的溶液中部，观察蓝色液滴沉浮情况并记录 说明：若a管溶液浓度上升，蓝色液滴将在b管的无色溶液中下沉；反之蓝色液滴将上浮；若a管溶液浓度不变，蓝色液滴将均匀扩散。

实验结果如下表： 组别 蔗糖溶 液浓度 液滴沉 浮情况 a1、b1 a2、b2 a3、b3 0.05M 均匀扩散 a4、b4 0.1M 微上浮 a5、b5 0.2M 上浮 a6、b6 0.4M 明显上浮 0.0125M 0.025M 下沉 微下沉 请回答下列问题： (1)本实验的原理是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________，这种变化可通过蓝色液滴的浮沉反映出来。

(2)本实验的结论是________________________________________________________________________

________________________________________。

(3)本实验不同组别间的自变量是__________________，因变量是________________________________________________________________________。

(4)若在某组a试管中的植物细胞发生了质壁分离现象，则在第③步操作中，将发现蓝色液滴________。

(5)在操作正确情况下，若发现在所有的组别中蓝色液滴都上浮，则实验应该如何改进？

11．现有生长良好的菠菜，在生物实验室里，有下列试剂可供选用： A．10－10M的吲哚乙酸 B．10－4M秋水仙素

C．质量浓度为0.3 g/mL蔗糖溶液 D．醋酸洋红染液

E．质量分数为8%HCl溶液

F．质量浓度为0.8 g/mL蔗糖溶液

(1)分别用上述6种试剂处理菠菜根尖细胞30 min后观察，经哪些试剂处理后的细胞仍有生活力？________。欲观察菠菜根尖细胞染色体，应选用________试剂染色；能促使插条生根的试剂是________；欲使菠菜(二倍体)的单倍体幼苗长大后的植株恢复可育，应选用试剂是__________。欲观察DNA和RNA在菠菜叶表皮细胞中的分布实验，在染色前应选用________试剂进行水解(以上空格均填编号)。

(2)在探究“植物细胞的吸水和失水”实验中，用试剂C(加一些红墨水)处理菠菜叶表皮。镜检时发现表皮细胞________________________部位呈红色。在装片中观察一个细胞首先发生质壁分离的部位是______________。若改为试剂F处理菠菜叶表皮，过一段时间后，用清水替代试剂F，镜检时发现________________________________________________________________________。

(3)提取菠菜叶片中的叶绿体色素时，为了防止研磨时叶绿素遭到破坏，应向研钵中加入少许的________(试剂)。在层析液中分离的结果，滤纸条上的色素带最下端的颜色是________，其中色素带最宽的是________，层析液中溶解度最大的是________。

(4)为了观察叶绿体的形态和分布，某同学把撕取的菠菜叶片带叶肉的下表皮置于载玻片上，直接用高倍镜仔细观察，未能达到实验目的，请修改其主要的方法步骤：

________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。

(5)

图6－13－2

如用上述①～⑤材料做观察植物细胞的有丝分裂、叶绿体中色素的提取和分离、观察植物的向性运动等实验。你选择的最佳材料依次是(填图中序号)________。用紫色洋葱表皮做完细胞的质壁分离及复原实验后，又用此装片观察细胞分裂，结果未观察到处于分裂期的细胞。请解释原因：________________________________________________________________________。

专题限时集训(十三)

1．B [解析] 制口腔上皮细胞临时装片时，先在载玻片上滴加生理盐水。用显微镜观察红细胞时，用生理盐水制成红细胞悬液。对鸡血细胞中DNA粗提取用到了氯化钠溶液。故选B。

2．B [解析] 鸡的红细胞含细胞核及膜性细胞器，不易获取较纯的细胞膜，A项错误；低温处理、秋水仙素处理都可以通过抑制纺锤体形成和细胞分裂使染色体数加倍，B项正确；藓叶含叶绿体呈现绿色，影响实验蓝绿色的观察，C项错误；吡罗红染液与RNA的亲和性高，不能直接代替醋酸洋红液，D项错误。

3．B [解析] 氢氧化钠在不同大小的琼脂块(成分一致)中的扩散速率相同，A项错误；氢氧化钙溶液通过检验CO2来确定人体细胞体外能够进行有氧呼吸，B项正确；探究最适浓度时，需要进行预实验，以节省实验材料，C项错误；用尿素为唯一氮源的培养基可以筛选出能分解尿素的微生物，D项错误。

4．B [解析] 观察DNA和RNA在细胞中的分布操作步骤为取口腔上皮细胞涂抹在载玻片的液滴中→烘干→水解→冲洗涂片→染色→吸去多余染液→盖盖玻片→镜检，B项错误。

5．C [解析] 解离的目的是用HCl溶解细胞间的果胶质，使细胞和细胞分离。而分散是在制片的时候轻压盖玻片使细胞和细胞之间分散，甲未解离，细胞相互重叠；漂洗的目的是洗去解离液，便于染色，乙未漂洗，影响染色效果，染色体着色很浅；5～7 mm处为伸长区，细胞已失去分裂能力，染色体呈染色质状态，观察不到染色体。

6．CD [解析] A项中层析液用于分离绿叶中的色素，提取色素用无水乙醇；B项中标志重捕法用于体积大、活动能力强的个体的种群密度的调查。

7．AD [解析] 表中的实验自变量为温度、底物种类，检测指标为底物的剩余量，用碘液检测，所以，实验目的是验证酶的专一性和探究温度对酶活性的影响，D项正确；②④⑥中底物为蔗糖，无论何种温度，都不可能被淀粉酶水解，C项错误；①②两组温度设定为低温，可能会出现酶活性太弱，实验效果不明显或没有而不便于观察，B项错误；无论是探究温度对酶活性的影响还是验证酶的专一性，淀粉酶溶液的用量都是无关变量，A项正确。

8．AB [解析] 将过氧化氢酶包埋在海藻酸钠中形成凝胶珠，即为固定化酶技术，其优点是便于产物与酶的分离，酶可多次使用，以降低生产成本，A项正确；实验目的是探究底物浓度对反应速率的影响，酶为无关变量，酶量应相同，B项正确，D项错误；3号试管过氧化氢溶液浓度最大，产生的氧气最多，凝胶珠上浮所需时间最短，C项错误。

9．(1)都有细胞壁、细胞膜、核糖体等结构 (2)2 mL酒精 灰绿

(3)避免了前一次吸取酵母菌培养液对以后测定酵母菌数量的影响 ADE (4)分解者 (5)未及时排气 (6)海藻酸钠溶液的配制

[解析] (1)酵母菌与醋酸菌分别为真核细胞、原核细胞，两者在结构上的不同点是有无成形细胞核，相同点是都有细胞壁、细胞膜、核糖体、细胞质等。(2)C试管中加入2 mL酒精作为对照，或者是C试管中加入没有酵母菌的培养液作为空白对照。酒精的鉴定原理是在酸性环境中，酒精与重铬酸钾反应，呈现出灰绿色。(3)静置一段时间后，应摇匀试管中酵母菌样液，再用吸管从试管中吸取培养液，B项错误；盖上盖玻片，在血球计数板边缘滴加培养液，让其慢慢渗入，C项错误。(4)酵母菌在生态系统中为分解者。(5)制作果酒时，要定时排气，防止发酵瓶因CO2过多而导致瓶塞被冲开。(6)固定化技术中核心步骤是海藻酸钠溶液的配制。

10．(1)植物细胞液与外界溶液存在浓度差时会发生渗透吸水或失水现象，引起外界溶液浓度的改变

(2)植物叶细胞的细胞液浓度大约相当于0.05M的蔗糖溶液浓度 (3)蔗糖溶液的浓度 a管中蔗糖溶液浓度的改变 (4)上浮

(5)设置低于最低溶液浓度的系列蔗糖溶液组别重新进行实验。

[解析] 当植物细胞和外界溶液存在浓度差时会发生渗透吸水和失水，从而引起溶液浓度的变化，这样悬浮在溶液中的蓝色液滴也会随着溶液浓度的改变上升或者下沉；当细胞液和外界溶液浓度相等时，液滴就处于悬浮状态，从表格中数据可以得知植物叶细胞的细胞液浓度大约相当于0.05M的蔗糖溶液浓度；该实验中自变量是起初的蔗糖溶液的浓度，因变量是加入细胞后发生渗透作用后蔗糖溶液浓度的变化；若试管中的植物细胞发生了质壁分离现象，说明发生了细胞失水，会导致溶液浓度下降，会发现蓝色液滴上浮。在操作正确情况下，发现在所有的组别中蓝色液滴都上浮，这说明溶液的浓度太高，需要重新设置一系列低于原实验溶液浓度的系列梯度溶液进行实验。

11．(1)A、B、C D A B E

(2)细胞壁与原生质层(或细胞膜)空隙 细胞的边角部分 质壁分离后不能复原 (3)CaCO3 黄绿色 叶绿素a 胡萝卜素

(4)制作临时装片时应先滴加清水并盖上盖玻片；观察时应先用低倍显微镜观察找到叶肉细胞，然后再换用高倍显微镜仔细观察

(5)①⑤③ 成熟的紫色洋葱表皮细胞已失去了分裂能力

[解析] (1)处理后的细胞仍有生活力，需要用10－10M的吲哚乙酸、10－4M秋水仙素、质量浓度为0.3 g/mL蔗糖溶液处理，其中质量浓度为0.8 g/mL蔗糖溶液浓度过大，不能使细胞保持活性。观察染色体时应该用醋酸洋红染色；促使插条生根可以用10－10M的吲哚乙酸处理；使用10－4M秋水仙素可以诱导染色体数目加倍，从而使单倍体恢复育性。欲观察DNA和RNA在菠菜叶表皮细胞中的分布实验，在染色前应选用质量分数为8%HCl溶液进行水解，从而便于染色剂进入细胞，并且能够使蛋白质和DNA分离，方便染色。(2)在探究“植物细胞的吸水和失水”实验中，应该用质量浓度为0.3 g/mL蔗糖溶液中加一些红墨水处理菠菜叶表皮。由于红墨水色素分子属于大分子，不能通过原生质层，所以镜检时在表皮细胞的细胞壁与原生质层之间的空隙应该呈红色。质壁分离首先应该在细胞的边角部分分离。若改为质量浓度为0.8 g/mL蔗糖溶液处理菠菜叶表皮，由于浓度过大，会导致细胞死亡。死亡的细胞不能复原。(3)提取菠菜叶片中的叶绿体色素的实验中，防止研磨时叶绿素遭到破坏的试剂是CaCO3。由于叶绿素b在层析液中溶解度最低，在滤纸上扩散的速度最慢，所以滤纸条上色素带颜色最下端的是黄绿色。由于叶绿素a的含量最高，所以色素带最宽的是叶绿素a，层析液中溶解度最大的是胡萝卜素。(4)为了观察叶绿体的形态和分布，其正确的实验操作步骤应该是制作临时装片时应先滴加清水并盖上盖玻片；观察时应先用低倍显微镜观察找到叶肉细胞，然后再换用高倍显微镜仔细观察。(5)由于成熟的紫色洋葱表皮细胞已失去了分裂能力，所以不能观察到处于分裂期的细胞。

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