各公司哺乳细胞表达载体比较

Invitrogen公司

pcDNA=CMV; pEF=EF-1a; pUb=Ub;-TOPO=TOPO克隆，/Gateway；-His/V5/myc tagged;抗性Neo/Zeo/Hyg/Bsd

载体名称 pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO pEF5/FRT/V5-DST

pEF5/FRT/V5-D-TOPO pSecTag/FRT/V5-His-TOPO pcDNA5/FRT

分子增强内含

启动子 量 子 子 5.2 CMV 7.5 EF-1a

V5

5.8 5.2 CMV

/

/

/

V5,6*Igk信号，分泌表达

His 融合蛋白

RNA聚合酶

N端Tag C端Tag V5,6*

His

特殊序列

中止poly抗性检测表达方

复制起始 克隆 纯化

序列 A 筛选 方法 式

TOPO

Ni

稳定

Bsd Neo Bsd

备注

有

BGH pUC

Gatewa

抗V5y

抗体

Hyg

检测

TOPO

Ni

酶切 Neo

形成相同基因的细胞；必须和Fip重组表达载体pOG44共转染Fip细胞

pcDNA3.2/V5-G

W/D-TOPO pcDNA6.2/V5-G

W/D-TOPO pcDNA3.2-DEST

CMV / / T7 V5 attB1,attB2 / TK pUC

CMV /

pcDNA6.2-DEST

/ T7 V5

attR1,attR2;ccdB;C

/

mR f1,pUC,SVTK

40 瞬时/稳定

pcDNA3.1/nV5-DEST

pcDNA3.2-DEST40 pDEST26 pDEST27

7.1 V5

attR1,attR2;ccdB;CmR;TEV用于切割V5抗原

BGH

pUC SV4f1,pUC,SV0 40

Neo

7.1 7.6 8.1

V5,6*

His attR1,attR2;ccdB;C

6*His mR

GST

Ni Ni GST

无需酶切,连接即可完成基因克隆

pcDNA3.1-E, pcDNA4/HisMAX-E 载体在原来基础上增加了 -E pcDNA4/HisMax

pcDNA4/HisMax-TOPO pcDNA3.1[+/-] pcDNA3.1/Zeo[+/-]

pcDNA3.1/Hyg[+/-] Echo

f1,pUC,SVBGH Zeo

40

5.3 CMV 5.3 5.4

SP16

/ 3

T7

6*His,

Xpress

EK /

XpresNi s

瞬时/有多种ORF

稳定

TOPO

5 CMCMV /

V

5.6

T7 /

/

/

Neo

f1,pUC,SVBGH

40 Zeo

Hyg

瞬时/

无tag的载体

稳定

pcDNA3.1,4,6/Hi5.5-5s A,B,C .0

CM

CMV /

V pcDNA3.1,4,6/V5.5-5

5-His A,B,C .0

T7

6*His,

Xpress

EK /

V5,6*

有

His

3.1=

f1,pUC,SVNeo, BGH

40 4=Ze

o,6=

共22个载体，分

瞬时/

别具有不同启动

稳定

子、抗性、抗原tag

pcDNA3.1,4,6/m5.5-5yc-His A,B,C .1 pEF1,4,6/His A,B,C

myc,6*

His

Bsd

pEF1,4,6/V5-His

EF-1a

A,B,C EF-1

同上 a pEF1,4,6/myc-Hi

s A,B,C pUB/V5-His A,B,C pRc/CMV2

Ub

f1,ColE1,S

Neo

V40

f1,ColE1,S

Neo

V40

瞬时/稳定

瞬时/稳定

5.5 CMV / T7 / / / BGH

稳定

MCS处有2个

BstXI酶切位点

pRc/RSV 5.2 RSV LTR / / / / / BGH

增加了转化和转

染效率,与

瞬时/pcDNA3.1相同的稳定 MCS, 较pZeoSV

去除了Sp6启动子

pZeoSV2(+/-) 3.5 SV40 /

T7代

/ 替T3

/

BGH pA代替SV40 pA，避

/ 免与Zeo下游的SV40 pAf1,ColE1 Zeo

混淆重排

pBudCE4

CMV/4.6 / EF-1a

/ /

V5-His

/myc-H is SV4

0/BGpUC H Zeo 稳定

同时表达两个目的基因 pCMV/Zeo,pSV40/Zeo和pCMV/Bsd,pEF/Bsd,pUB/Bsd分别是用于在一新载体上构建Zeo/Bsd抗性 Xpress－tagged表达载体融合部分可切；V5/BioEase/His/myc-His/Xpress-tagged表达载体在western Blot实验时低背景；myc-His-tagged的表达载体可有效检测的常用抗原，可免疫沉淀；His-tagged的表达载体可有效免疫沉淀；BioEase－tagged的表达载体可有效检测的常用抗原，可免疫沉淀

Stratagene公司

载体名称

分子增强内含

启动子 量 子 子

RNA聚合酶

N端

Tag C端Tag

特殊序列

中止poly抗性检测表达方

复制起始 克隆 纯化

序列 A 筛选 方法 式

有

SV4f1,colE1,

无

0 SV40

SV4

f1,colE1, Neo0早

SV40 上游期

b-lac

抗体FLA筛选 G/c-m

WB,免疫沉淀, 免疫荧 光, pull down实验, 亲和

层析;核酸探针,功能筛选, 抗体筛选

备注

pExchange-1 core

3.6

vector pExchange-2 pExchange-3A,3B,3C pExchange-4 pExchange-5 pExchange-6 pCMV-Script

4.3 CMV

/

早期 4.3 CMV

/

早期 4.3

/

FLAG,c-myc kozak T7,

T3 FLAG

c-myc

FLAG

c-myc

有

c-myc,

FLAG kozak(gcca/gccatgg) 有2套MCS+终止子

A,B,C三型;有3个ORF,易错;须在克隆目的片断后插入Neo/ Hyg/Pur

有2套MCS+终止子

/

T7, T3

pCMV-Tag1

pCMV-Tag2 pCMV-Tag3 pCMV-Tag4

FLAG c-myc

FLAG

pCMV-Tag5

兔b-球蛋

T7 / 白基因 T3,T

lac 7

c-myc

启动 子/ SV4 0 ori,下游 TK polyA,Ka n

yc抗体

有3个ORF,易错

pSG5 4.1 SV40 / / / 有 f1 无

在T抗原的细胞

瞬时表

中高表达;可体内/

达

外表达 原核/真核细胞中

噬菌体融合表达;产生一表达 系列exo/ mung删

除

pBK-CMV CMV / / lacZ

SV4

f1,colE1,SKan,0早

V40 Neo 期

抗体探针,

兰白斑

pDual 5.5 CMV

/

突变

/

T7

pDual-GC

6.6

Neo上游

SV4

CBP瞬时/凝血酶酶切位b-lac启动子/ lacO T7 0晚

点,RBS/ kozak 亲和 稳定

期 f1,colE1,SSV40 ori,下兰白原核/真核细胞中

游TK

V40 斑 融合表达

polyA,Kan

c-myc, 抗体 T7 RBS/ kozak 6*His /Ni

Novagen公司

载体名称 pTriEx-1.1 pTriEx-2 pTriEx-3 pTriEx-4

分子增强内含

启动子 量 子 子

CMV b-actin

RNA聚合酶

N端

Tag C端Tag

特殊序列 p10，

中止poly抗性检测表达方

复制起始 克隆 纯化

序列 A 筛选 方法 式

Ni

瞬时

备注 T7lac利于在

E.coli中诱导表达;p10利于在昆虫细胞表达;在MCS两端每个ORF上都有平末端的酶切位点以利于克隆

/ His

CMT7la

有 V c /

His

兔b-球蛋

His,

T7 白pUC

HSV p10

polyA p10,凝血酶/肠激酶

酶切位点-N端tag

p10,凝血酶/肠激酶酶切位点-N端tag

以上是瞬时表达载体，在其后加Hyg/Neo即是稳定表达载体，药物抗性基因由增强子CITE控制，其他特性同上

Promega公司

载体名称 pCI pSI pCI-neo pTARGET

分子增强内含

启动子 量 子 子 4 CMV 3.6 SV40 5.5

CMV 5.7

RNA聚合酶

N端C端Tag Tag

特殊序列

中止poly抗性检测表达方

复制起始 克隆 纯化

序列 A 筛选 方法 式

无

瞬时

备注

T7 有 T7,T/

3

T7

/

SV40晚期 f1

Neo

T克隆

瞬时/ 稳定

pCMVTNT 4.1 无 瞬时

QIAGEN公司

载体名称 pQE-TriSystem His-Strep 1 pQE-TriSystem His-Strep 2 pQE-TriSystem Strep

pQE-TriSystem

分子增强内含

启动子 量 子 子

RNA聚合酶

N端

Tag C端Tag Strep,8*His

特殊序列

中止poly抗性检测表达方

复制起始 克隆 纯化

序列 A 筛选 方法 式

兔-b

球蛋白,T7

pUC

Strep

Tactin Ni

Ni,Str epTactin

备注

5.8 actin

CMT5/la

有 V c,p10

Strep 8*His

SD,kozak

Strep

8*His

原核/真核表达

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/v4ww.html