中药大蒜素体外抗弓形虫效应及其机制的研究
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大蒜素体外抗弓形虫效应及其机制的研究
【收稿日期】2009-06-22
【作者简介】陈光(1975-),女,医学博士,从事抗感染免疫的研究;蔡
连顺(1964-),通讯作者,女,医学硕士,教授,硕士生导
师,从事医学寄生虫分子免疫学研究, Emai:l cailianshun@
yahoo. com. cn
文章编号: 1005-376X(2009)09-0812-05【论 著】
中药大蒜素体外抗弓形虫效应及其机制的研究
陈光1, 2,马淑霞3,蔡连顺1,罗兰4,毕胜1,代月1
(1.佳木斯大学基础医学院寄生虫学教研室,黑龙江佳木斯 154000; 2.佳木斯大学儿童神经康复实验室,黑
龙江佳木斯 154000; 3.佳木斯大学基础医学院微生物学教研室,黑龙江佳木斯 154000; 4.佳木斯大学第一
附属医院消化一科,黑龙江佳木斯 154000)
【摘要】 目的 观察大蒜提取物体外抗弓形虫的作用效果及其机制。方法 将弓形虫RH株速殖子与兔肾
细胞共同培养,加入不同浓度的大蒜素(实验组)和磺胺嘧啶(阳性对照组),培养不同时间后取出细胞,固定染色
后观察细胞感染率及每个纳虫泡中弓形虫速殖子的数量;采用MTT比色法观察大蒜素对弓形虫速殖子侵袭细胞
及其正常细胞增殖的影响;采用台盼兰着色法观察大蒜素对弓形虫速殖子活性的影响;采用TUNEL末端标记法检
测弓形虫速殖子凋亡率,对药物的效应和机制进行探讨。结果 (1)10~80μg/ml的大蒜素能抗弓形虫的感染,呈
现剂量依赖性,与时间无明显的相关性。(2)40μg/ml、80μg/ml的大蒜素不能抑制细胞的增殖,对细胞无明显的
毒副作用; 160μg/ml的大蒜素对细胞有明显的毒副作用。(3)大蒜素80μg/ml时,台盼兰着色率最高,弓形虫的
活力最低。(4)大蒜素80μg/ml的浓度时,弓形虫速殖子凋亡率最高。结论 大蒜素可以抑制弓形虫速殖子的活
力、对宿主细胞的感染力、在细胞内的增殖,无明显的毒副作用,最适宜浓度为80μg/ml。大蒜素是一种良好的抗
弓形虫药物,诱导弓形虫速殖子凋亡是其抗弓形虫机制之一。
【关键词】 大蒜素;体外培养;弓形虫;效应;机制
【中图分类号】R328. 3 【文献标识码】A
Effect and m echanism ofAllitridi againstToxoplasma gondii in vitro
CHEN Guang1, 2,MA Shu-xia3,CAILian-shun1,LUO Lan4,BI Sheng1,DAIYue1
(1.Department ofParasitology, College ofBasicMedicalScience, JiamusiUniversity, Jiamusi154007, China;2. Labora-
tory ofChildren′sRehabilitation, JiamusiUniversity, Jiamusi154003, China;3. DepartmentofMicrobiology, JiamusiUni-
versity, Jiamusi154007, China;4.TheFirstAffiliatedHospital,JiamusiUniversity,Jiamusi154007,China)
【Abstract】 Objective To observe the effectandmechanism ofallitridi againstToxoplasma gondii in vitro.M eth-
ods TheToxoplasma gondii(RH str
ain) and the kidney cells of rabbitwere co-cultured, adding differentconcentration of
allitridi and Sulphadiazine. The cultured cellswere taken
大蒜素体外抗弓形虫效应及其机制的研究
out after24 h or48 h, fixed and strained. The infected rate and
the number ofToxoplasma gondiiper parasitophorous vacuolewere observed; The effect of allitridi inhibiting the prolifera-
tion of cells invaded byToxoplasma gondiitachyzoite and normal cellswere detected byMTT; The effectof allitridi inhibi-
ting the vigorofToxoplasma gondiitachyzoitewere observed by placenta staining; And the effectofallitridi inducing the ap-
optosis ofToxoplasma gondiitachyzoiteweremeasured by TUNEL.Results (1) 10~80μg/ml allitridi could resist the
infection oftoxoplasma gondiiin dosage-dependentway, but therewasn′tvery obvious time-dependenteffect; (2)W ith lit-
tle side-effect to the cells, 40μg/ml and 80μg/ml allitridi couldn′t inhibit the proliferation of cells; 160μg/ml allitridi
had an obvious side-effect to the cells; (3) Under80μg/ml allitrid,i the rate ofTypanblue colouringwas the highest, and
the vigor ofToxoplasma gondiitachyzoitewas the lowest; (4) Under80μg/mlallitrid,i the rate ofapoptosis ofToxoplasma
gondiitachyzoitewas the highest.Conclusion Allitridi could inhibit the vigorof tachyzoite, restrain its ability to infect the
host′s cells and its proliferation in the cellswhile showing no obvious poisonous side effects. The optimal effective concen-
tration was 80μg/m.l Allitridi is a goodmedicine againstToxoplasma gondii. One of themechanisms of its anti-Toxoplas-
ma gondiiis to induce the apoptosis ofToxoplasma gondii.
【Key words】 Allitrid;i In vitro cultivation;Toxoplasma; Effect; Mechanism
弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种专性细胞内
寄生原虫[1],在免疫功能正常的机体内多呈隐性感
染,若机体免疫功能受损,可使隐性感染急性发作,出
现弓形虫性脑炎、肝炎、肺炎等而危及生命,同时也是
引起胎儿流产和先天性弓形虫病的重要原因[2]。弓
形虫呈世界性分布,是一种人类最常见的寄生虫感染
性疾病[3]。弓形虫感染已成为器官移植、医源性免
疫抑制和爱滋病的严重并发症,威胁生命。目前,弓
形虫病的传统治疗仍以乙胺嘧啶与磺胺嘧啶联合用
药为主,虽然取得一定疗效,但常由于其抑制骨髓、损
害肝功能,易出现皮疹等毒副作用而被迫停止用药。
812 Chinese Journal ofMicroecology, Sep·2009,Vol·21 No·9近年来,研制的新药阿奇霉素、双氢青蒿素、美浓霉
素、蒿甲醚等药物抗弓形虫作用较为明显,且给药方
便,但毒副作用仍然很多。因此寻找高效、安全、副作
用少的抗弓形虫药物势在必行。传统中药以其丰富
的资源、多
靶点作用机制、较少不良反应、无耐药性等
优点表现出诱人的应用前景。祖国医学中大蒜为百
合科葱属植物植蒜(Album sativum L),主要成分大蒜
素,是近年来研究较多的传统中药,具有多种功效,除
杀灭细菌、真菌、原虫[4]外,也具有提高机体免疫功
能的作用[5~8],但其
大蒜素体外抗弓形虫效应及其机制的研究
对弓形虫的作用效果尚无报道。
根据弓形虫病的发病机制及其大蒜素的药理作用,推
测它有抗弓形虫作用,因此本研究体外观察该药物对
弓形虫的作用效果,并探索其作用机制,为寻找高效
低毒的抗弓形虫药物提供理论依据。
1 材料与方法
1. 1 实验动物、弓形虫及主要试剂 月龄昆明纯系
健康雌性小白鼠,体重(18±2)g,佳木斯大学实验动
物中心提供;经小鼠传代保种的弓形虫RH株速殖
子,由上海第二医科大学寄生虫教研室提供;大蒜素
注射液,购于武汉康诚有限公司;磺胺嘧啶针剂,购于
山东瑞阳药品有限公司;TUNEL凋亡试剂盒,购于武
汉博士德生物制品有限公司。
1. 2 实验准备
1.2. 1 虫体的传代与弓形虫速殖子悬液的制备 将
种鼠在发病(腹部胀大,全身乍毛,蜷缩,进食、活动
减少)时,断颈处死,常规解剖小鼠,抽取腹水,并用
无菌生理盐水冲洗腹腔。将吸取的腹腔液集中于离
心管中, 1000 r/min离心5 min,取上清液3000 r/min
离心20 min,弃上清液,将沉淀悬浮于适量的RPMI
1640培养基中进行计数,调整虫体数至107/m,l其中
一部分用于小鼠转种,以0. 1 ml/只的量腹腔注射感
染小鼠;另一部分备用。
1.2. 2 肾细胞的培养和传代 兔原代培养的肾细胞
由佳木斯大学基础医学院生物教研室提供,接种于
10%灭活小牛血清的新鲜RPMI1640培养液中,内含
100μg/ml青霉素, 100μg/ml链霉素, 37℃饱和湿
度, 5% CO2培养箱中, 2~3 d传代1次,调整细胞密
度不超过1×106/ml。
1.2. 3 肾细胞盖玻片的制备 将培养瓶中的肾细胞
数用血球计数板调整至1×106/m,l每份1 m,l分装
于内有2张盖玻片(18 mm×18 mm)的培养皿(φ35
mm)中。37℃5% CO2粘贴4 h后,以PBS漂洗盖
玻片上未粘贴细胞,即得肾细胞盖玻片,备用。
1. 2. 4 各种浓度大蒜素的制备 大蒜素用RPMI
1640培养基分别稀释为10、20、40和80μg/ml 4个
浓度。
1. 2. 5 200μg/ml磺胺嘧啶的配制 磺胺嘧啶针剂
原液(400μg/ml)用RPMI 1640培养基稀释为200
μg/ml后备用。
1. 3 分组和实验步骤
1. 3. 1 分组 实验组分别为大蒜素80、40、20和10
μg/m,l阳性对照组为磺胺嘧啶200μg/m,l阴性对照
组为无药物的RPMI1640完全培养基。每组5皿,每
皿2张盖玻片。
1. 3. 2 实验步骤
1. 3. 2. 1 大蒜素抑制弓形虫侵入细胞作用的观察
吸去培养皿中肾细胞的培基,取弓形虫速殖子悬
液1 ml和不同浓度的大蒜素同时加入,设磺胺嘧啶
对
照组和阴性对照组。每24 h换液1次,分别于24 h
和48 h取出盖玻片, PBS漂洗,甲醇固定,Giemsa染
色。检测指标: (1)细胞感染率:油镜下观察每张盖
玻片四脚及中央5个高倍视野,记录感染及未感染的
肾细胞数,计算出肾细胞的感染率和抑制率。(2)一
个纳虫泡内的
大蒜素体外抗弓形虫效应及其机制的研究
虫体均数:油镜下观察并记录每张肾细
胞盖玻片内100个纳虫泡内含有的虫体个数,计算出
每个纳虫泡内虫体的平均数(x±s)。抑制率=(对照组
感染率-实验组感染率)÷对照组感染率。
1. 3. 2. 2 大蒜素抑制细胞内虫体增殖作用的观察
吸去培养皿中肾细胞的培养基,加入1 ml弓形
虫悬液, 2 h后,吸去弓形虫悬液,PBS洗涤2次,加入
不同浓度的大蒜素继续培养,设磺胺嘧啶对照组和阴
性对照组,分别于24 h、48 h取出盖玻片洗涤,固定,
Giemsa染色。检测指标:同上。
1. 3. 2. 3 大蒜素对感染弓形虫速殖子侵袭细胞增殖
的影响(MTT) 将传代的肾细胞浓度调整至106/m,l
每孔100μ,l接种至96孔板,设阴性对照,磺胺嘧啶
对照,培养24 h后换液,同时加入虫体(107/ml)50
μ,l培养6 h后,每孔再加入不同浓度的大蒜素药液
50μl,每组3孔,置37℃5% CO2饱和湿度下培养
24 h、48 h,于结束前4 h加MTT工作液10μl/孔,温
育4 h,去上清液100μl后,加入10% SDS、0. 01
mol/LHCl50μ,l破膜,再温育1 h,置酶标仪,波长为
570 nm处测定A值。以3孔平均值表示各组细胞生
长,计算增殖率。此实验重复做3次。增殖率(% ) =
(A值实验组/3-A值未加药组/3-A值培养液组) /(A值未加药组/3-
A值培养液组)×100%。
1. 3. 2. 4 大蒜素对正常细胞增殖的影响(MTT)
将传代的肾细胞浓度调整至106/m,l每孔100
μ,l接种至96孔板,设肾细胞对照,培养24 h后换
液,同时加入不同浓度的大蒜素100μ,l每组3孔,置
37℃5% CO2饱和湿度下培养24 h、48 h,于结束前
4 h加MTT工作液20μl/孔,温育4 h,去上清液后,
加入二甲基亚砜200μ,l再温育1 h,置酶标仪,波长
为570 nm处测定A值。以3孔平均值表示各组细胞
813中国微生态学杂志 2009年9月第21卷第9期生长。此实验重复做3次。
1. 3. 2. 5 弓形虫活力的检测 取已计数的虫体悬液
0. 5 m,l加生理盐水1. 4 m,l混匀后加入不同浓度的
大蒜素0. 1 m,l置25℃水浴,经1、2、4和8 h后,用
生理盐水将虫体洗2次(1500 r/min, 3 min),最后使
虫体悬浮于0. 5 ml生理盐水内。取已作用的虫体悬
液0. 1 m,l离心弃上清,沉淀内加入0. 1%台盼兰生
理盐水液0. 1m,l置37℃15min,然后在高倍镜下观
察100个虫体,分别记录着色与不着色的虫体。
1. 3. 2. 6 大蒜素诱导弓形虫速殖子凋亡的检测
(TUNEL末端标记法) 不同浓度大蒜素作用4、8、
12和24 h的速殖子悬液经离心洗涤后涂于L-多聚
赖氨酸处理的载玻片凉干, 4%多聚甲醛室温下固定
1 h。PBS冲洗,用渗透液(0. 1%柠檬酸钠配成0. 1%
TritonX-100)冰上(4℃
)穿透2 min, PBS冲洗。,根据
AP的说明书进行TDT末端原位标记:滴加TUNEL
标记溶液37℃孵育1 h, PBS冲洗,滴加AP溶液
37℃孵育30 min, PBS冲洗, BCIPNBT显色10 min,
核快红(nuclear-fastred)复染,封片镜检,镜下
大蒜素体外抗弓形虫效应及其机制的研究
见胞核
呈紫蓝色着染者为凋亡虫体,并计算其凋亡率。
1. 4 统计学分析 实验结果以x±s表示。结果用
SAS软件包做方差分析、t检验及DUNNET′t检验。
2 结果
2.1 大蒜素抑制弓形虫侵入细胞作用的观察 培养
24 h后,对照组的细胞感染率高达98.2%,纳虫泡内平
均虫体数为18个,最多可达30个,且可见许多细胞已
破裂,弓形虫速殖子分散于细胞外(见图1),有些细胞
内可同时形成2个纳虫泡(见图2)。大蒜素作用24 h
和48 h各组细胞感染率及其纳虫泡内虫体均数随着
药物浓度的增加而降低,与作用时间无相关性。
表1 不同浓度大蒜素抑制弓形虫速殖子侵入细胞的效果观察
分组药物浓度
(μg/ml)
24 h
感染率
(% )
抑制率
(% )
平均虫数/纳虫泡
(x±s)
48 h
感染率
(% )
抑制率
(% )
平均虫数/纳虫泡
(x±s)
大蒜素10 84. 7 13. 7 5. 1±0. 968* 85. 1* 14. 9 5. 35±1. 755*
20 74. 4 24. 2 4. 4±2. 234* 74. 1**25. 9 4. 3±1. 174*
40 50. 2*48. 9 2. 0±0. 795* 50. 5**49. 5 2. 3±0. 865*
80 38. 9**△60. 4 1. 3±0. 571*△ 38. 9**61. 1 1. 25±0. 550*△△
磺胺嘧啶200 48. 3 50. 8 2. 0±0. 725 48. 4 51. 6 2. 3±0. 979
对照组0 98. 2 18. 7±3. 495 100 21. 7±3. 389
注:与对照组比,*P<0. 05,**P<0. 001;与磺胺嘧啶组比,△P<0. 05,△△P<0. 001
2. 2 大蒜素对弓形虫在细胞内增殖的影响 弓形虫
感染细胞2 h后加入大蒜素,其感染率显著高于弓形
虫侵入细胞前加入大蒜素的感染率,而纳虫泡内的虫
体均数却接近。大蒜素作用24 h和48 h各组细胞感
染率及其纳虫泡内虫体均数随着药物浓度的增加而
降低,与作用时间无相关性。
表2 不同浓度大蒜素抑制弓形虫在细胞内增殖的效果观察
分组药物浓度
(μg/ml)
24 h
感染率
(% )
抑制率
(% )
平均虫数/纳虫泡
(x±s)
48 h
感染率
(% )
抑制率
(% )
平均虫数/纳虫泡
(x±s)
大蒜素40 54. 5**24. 5 2. 10±0. 91*55. 0**21. 99 1. 9±0. 97*
80 42. 7**40. 9 1. 35±0. 59**44. 3**37. 16 1. 45±0. 60**
对照组0 72. 2 16. 55±4. 30 70. 5 19. 5±5. 48
注:与对照组比,*P<0. 05,**P<0. 001
2. 3 不同浓度大蒜素对弓形虫侵袭细胞增殖的影响
MTT比色法检测,大蒜素作用于弓形虫侵袭的
肾细胞24 h和48 h后, 160μg/ml组与80μg/ml组
相比差异有显著性(P<0. 05)。
表3 不同浓度大蒜素对弓形虫侵袭细胞增殖的影响(x±s)
分组药物浓度(μg/ml) 24 h 48 h
大蒜素 160 1. 168±0. 192**△ 1. 319±0. 160**△
80 0. 587±0. 107*△0. 865±0. 013*
40 0. 427±0. 018*0. 836±0. 012*
磺胺嘧啶200 0. 4206±0. 022 0. 8643±0. 028
未加药组0. 222±0. 012
0. 567±0. 017
注:与未加药组比,*P<0. 05,**P<0. 001;与磺胺嘧啶组比,△P<0. 05,△△P<0. 001
814 Chinese Journal ofMicroecology, Sep·2009,
大蒜素体外抗弓形虫效应及其机制的研究
Vol·21 No·92.4 不同浓度大蒜素对正常细胞增殖的影响 MTT
比色法检测,大蒜素作用于正常肾细胞24 h和48 h
后,与阴性对照组相比, 160μg/ml组对正常肾细胞
的增殖有明显的抑制作用(P<0. 001),而80μg/ml
组无明显变化(P>0. 05)。
表4 不同浓度大蒜素对细胞增殖的影响(x±s)
分组药物浓度(μg/ml) 24 h 48 h
大蒜素160 0. 8834±0. 0186* 1. 197±0. 106*
80 0. 4552±0. 2570 0. 6746±0. 024
肾细胞组0. 4540±0. 0260 0. 6728±0. 026
注:与肾细胞组比,*P<0. 001
2. 5 大蒜素对弓形虫速殖子活力的影响 弓形虫速
殖子孵育在不同浓度大蒜素的RPMI 1640培养基中
不同时间,观察其台盼兰着色情况(见表5)。观察发
现,对照组的速殖子虫体透明,呈香蕉形或半月形,运
动活跃,能作螺旋式转动,台盼兰着色率低,而大蒜素
作用的虫体部分略肿胀或呈椭圆形,活动不明显,着
色率明显升高,并随着大蒜素浓度的升高,着色率也
不断升高,呈剂量依赖性;与对照组比较,大蒜素作用
的虫体活力显著降低(P<0. 05),并随着孵育时间的
延长而不断降低,呈时间依赖性,而且虫体肿胀更加
明显。
表5 不同浓度大蒜素抑制弓形虫速殖子活力的效果观察
组别用药后着色率(% )
1 h 2 h 3 h 4 h
大蒜素组10 16 21 36 50
20 22 37 48 57
40 35 47 56 62
80 45 54 66 74
对照组4 6 10 17
2. 6 大蒜素不同浓度和不同处理时间对弓形虫速殖
子凋亡的影响 不同浓度大蒜素作用不同时间的弓
形虫速殖子的凋亡率见表6。其凋亡率与药物浓度
及其作用时间呈正相关。当大蒜素浓度为80
μg/m,l作用24 h时,出现大量胞核呈紫蓝色着染的
凋亡虫体(图3),速殖子凋亡率达(30. 0±2. 0)%;
而对照组速殖子基本上胞核不着色(图4),凋亡率仅
为(6. 0±2. 0)%。
3 讨论
目前中医药对弓形虫病的治疗研究很广,临床上
选用的治疗用药种类较多,其主要研究思路归纳为抗
弓形虫叶酸代谢、干扰弓形虫能量代谢、破坏弓形虫
细胞结构及其增强免疫等药物[9]。
本实验结果发现:虽然加入弓形虫速殖子的数量
是靶细胞的10倍,大蒜素单独使用仍能进入细胞发
挥作用,达到抗弓形虫的效果。大蒜素80μg/ml作
用于弓形虫速殖子,细胞感染率最低、抑制率最高、纳
虫泡内虫体均数最少(见表2)。大蒜素能进入宿主
细胞抑制弓形虫速殖子在细胞内的增殖,具有较好的
抗弓形虫效果,每个纳虫泡内弓形虫数量明显减少,
最适宜浓度为
80μg/m,l与作用时间无相关性。由
表1和2比较发现,大蒜素抑制弓形虫侵入细胞的能
815中国微生态学杂志 2009年9月第21卷第9期图6 正常速殖子Gimsa染色(400×)
力较弱,而抑制弓形虫在细胞内增殖的能力较强。
MTT比色法测定不同浓度大蒜素对弓形虫侵
大蒜素体外抗弓形虫效应及其机制的研究
袭的细
胞和正常细胞增殖影响时发现,大蒜素的浓度80
μg/ml时,对细胞增殖无抑制作用,无明显的毒副作
用,而160μg/ml的大蒜素对细胞表现出明显的毒副
作用(见表3、4)。大蒜素作用不同时间的弓形虫速
殖子台盼兰染色后发现,其活性随着大蒜素浓度的增
加而降低,其速殖子台盼兰着色率却表现出明显的时
间依赖性。当药物浓度为80μg/ml时显效非常明
显,作用8 h虫体着色率达74. 5%,与对照组虫体着
色率2. 7%相比差异有非常显著性(P<0. 001)(见
表6 不同浓度大蒜素诱导弓形虫速殖子凋亡的效果观察
药物浓度
(μg/ml)
凋亡率(% )
4 h 8 h 12 h 24 h
大蒜素10 3. 0±1. 309 4. 5±2. 449 5. 5±2. 449 6. 5±2. 449
20 3. 25±1. 448 5. 5±2. 449 6. 5±2. 449 7. 5±2. 449
40 3. 625±2. 264 6. 5±2. 449 9. 0±2. 0 10. 0±2. 0
80 4. 0±2. 0 7. 0±2. 0 16. 0±2. 0 30. 0±2. 0
对照组3. 0±1. 309 4. 0±1. 309 4. 875±2. 031 6. 0±2. 0
表5)。因此,大蒜素有明显的抗弓形虫作用,最适宜
浓度为80μg/ml。但大蒜素抑制弓形虫侵入宿主细
胞能力较弱,预计与其他抗弓形虫药物联合应用将会
有较好的疗效。
另外,在探讨大蒜素抗弓形虫作用机制的实验中
发现,大蒜素作用后的弓形虫速殖子形态发生了明显
的改变,虫体变短粗,呈圆形或椭圆形,结构模糊,虫
体破裂。采用TUNEL末端标记法检测弓形虫速殖子
的凋亡率,结果发现:大蒜素可诱导弓形虫速殖子的
凋亡,并呈时间和剂量依赖性(见表6)。大蒜素除了
能诱导弓形虫速殖子凋亡外,还能对其直接杀灭。有
限的实验研究发现:大蒜素抗弓形虫作用可能是因为
大蒜素中有一种重要生物活性成分二丙烯基二硫化
物,其活性基团是-os-s-基,该基团可对硫基进行氧
化,从而使蛋白质灭活,还可以与含硫基的半胱氨酸
竞争,抑制蛋白质的合成,从而影响弓形虫的生长和
繁殖,起到直接杀灭病原体的作用[10]。
临床上治疗弓形虫病经常联合应用免疫增强剂、
细胞因子等免疫调节性药物,能破坏虫体结构、减少
抗原物质的刺激及提高机体的免疫功能,祛除病邪,
全面调节人体机能,从而达到消灭和抑制体内弓形虫
的效果[9]。相关的研究发现机体抗弓形虫免疫以细
胞免疫为主,参与细胞免疫的主要成分包括巨噬细
胞、NK细胞、T淋巴细胞及其分泌的细胞因子[11]。
大蒜素是一种较好的免疫激发性中草药,可以促进T
细胞活化[12]、增强巨噬细胞介导的细胞毒作用,对于
治疗机会致病性原虫引起的先天性和获得性弓形虫
病都具有极高的价值。因此大蒜素在抗(下转第821页)
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(上接第816页)弓形虫病方面具有抑制虫体生长繁殖和
免疫调节双重功效,有必要进行深入的体内试验研究
和临床疗效观察,为抗弓形虫病新药的开发和研制提
供必要的理论依据。
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821中国微生态学杂志 2009年9月第21卷第9期
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