Survivin蛋白在子宫内膜癌中的表达研究_王伟

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医药学刊

MEDICINE

May2011

2011年5月ARCHIVESTRADITIONALCHINESE

Survivin蛋白在子宫内膜癌中的表达研究

王伟，储洪娟，蔡仙丽

(台州学院医学院附属市立医院，浙江台州318000)

摘要:目的:探讨抗凋亡蛋白Survivin在正常子宫内膜、不典型增生性子宫内膜及子宫内膜癌中的表达。

探讨Survivin蛋白在子宫内膜癌发生、发展中的作用及其作为判断预后因子的可行性。方法:应用免疫组织化学S－P法，20例不典型增生性子宫内膜、33例子宫内膜腺癌及2例子宫内膜乳头状浆液检测20例正常子宫内膜、性癌(UPSC)中Survivin蛋白的表达，并结合临床病理特点进行分析。结果:Survivin蛋白在不典型增生的子宫内87．5%及100%，膜、子宫内膜腺癌及UPSC阳性表达率很高，分别为70．0%、三者差异无显著性意义(P＞0．05)，

Survivin的表达与手术－病理分期和但均高于在正常子宫内膜中的表达率10．0%(P＜0．05)，在子宫内膜癌中，组织学分级密切相关(P＜0．05)，但与肌层浸润无明显关系。结论:Survivin可能通过抑制凋亡和促进增殖两方

面的作用参与了子宫内膜癌的发生、发展，其过度表达提示预后不良，可能成为子宫内膜癌的预后判断因子。

关键词:子宫内膜癌;Survivin蛋白;免疫组织化学

中图分类号:R737．33文献标识码:A文章编号:1673－7717(2011)05－1088－03

ExpressionofSurvivinProteininEndometrialCarcinoma

WANGWei，CHUHong-juan，CAIXian-li

(TaizhouUniversityAffiliatedHospital，Taizhou318000，Zhejiang，China)

Abstract:Objectives:TostudytheexpressionofapoptosisrelatedproteinSurvivininendometrialcarcinoma．Meth-ods:ImmunohistochemicalS－PmethodwasperformedtodetecttheexpressionofSurvivinproteinin20casesofnormal20casesofendometrialatypicalhyperplasia，33casesofendometrialcarcinomaand2casesUPSC，andex-endometrium，

aminedtherelationshipoftheexpressionwithclinicopathologicalvariables．Results:Inendometrialcarcinoma(includeUP-SC)andatypicalhyperplasia，therewasabundantSurvivinimmunoreactivityinthenucleusand/orcytoplasmoftheendo-metrialcarcinomacells(70．0%，87．5%and100．0%)，whichwassignificantlyhigherthanthatinnormalendometrium(P＜0．05respectively)．ButtherewasnosignificantdifferencebetweentheexpressionorrateofSurvivinincarcinomaendometriumandatypicalhyperplasiaendometrium．Moreover，Survivinexpressioninendometrialcarcinomawascorrela-tedwithhistologicalgradeandsurgical－pathologicalstage，butnotwiththeinvasiontomyometrium．Conclusions:Sur-vivinmayparticipateintheonsetandprogressionofendometrialcarcinomathroughinhibitingapoptosisandpromotingproliferation．Survivincouldbeanewbiomarkersinthediagnosis，treatmentandprognosticevaluationofendometrialcar-cinoma．

Keywords:endometrialcarcinoma;Survivinprotein;immunohistochemistry细胞增殖和凋亡失衡是肿瘤发生发展的重要机制，凋亡调节基因被认为是继原癌基因、抑癌基因之后的第三类癌基因。凋亡蛋白抑制物(inhibitorofapoptosisprotein，IAP)是一类抗凋亡蛋白，阻滞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶活化径路后续步骤，是其抑制细胞死亡的部分原因。Survivin作为凋亡抑制蛋白(IAPs)家族的最新成员，倍受关注。其

中

华中医药1088学刊

收稿日期:2010－12－03

基金项目:浙江省医药卫生科学研究基金资助项目(2007B235)作者简介:王伟(1980－)，男，吉林人，主治医师，硕士研究生，研究

方向:妇科肿瘤。

乳头状浆液性癌的关系，国内、外研究不多。本研究检测Survivin在正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生、子宫内膜腺癌及子宫内膜乳头状浆液性癌(UPSC)中的表达，从细胞增殖与凋亡方面探讨子宫内膜癌的发生机制，为子宫内膜癌的诊断、预后判断及治疗提供新的思路。11．1

材料与方法研究对象

选取台州学院医学院附属市立医院妇科

结构独特，具有调节细胞周期，细胞分裂以及信号转导通路的作用。与恶性肿瘤的发生、发展及对化疗药物耐药密切相关。由于其在肿瘤组织及正常组织中表达的显著差异，使其成为肿瘤治疗中一个重要靶点。Survivin与子宫内膜

2005年1月－2009年1月住院手术治疗的子宫内膜癌患者共40例，选取临床病理资料完整的35例，术前均未行化疗、放疗或免疫治疗等抗肿瘤治疗。患者年龄37～73岁，中位年龄50．4岁。绝经前11例，已绝经24例，未婚或已婚未孕者3例。按细胞分化程度分为G1级18例，G2级11例，G3级6例。手术－病理分期按(FIGO，1998)标准，其中Ⅰ期28例，Ⅱ期3例，Ⅲ期3例，Ⅳ期1例。35例中30例获得随访，随访率85．7%。随访时间18～72个月，平

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表2

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3例复发(均为均52个月。其中2例死亡(均为中、晚期)，Ⅰ期)。UPSC少见，仅2例，细胞分化为G3，手术－病理分期:Ⅲ期1例，Ⅳ期1例。2例均获得随访，其中1例死亡(为Ⅳ期)，1例复发(为Ⅲ期)。并选取因子宫内膜不典型增生而行诊刮或子宫切除的标本20例，选取同期因子宫脱3组患垂或子宫肌瘤行子宫切除术的标本20例作为对照，者平均年龄差异无显著性意义，且术前均未接受化疗、放疗及性激素类药物治疗。整理临床资料，选取组织分化程度、手术－病理分期、有无肌层浸润等作为观察指标。1．2

标本置备

所选标本经10%中性福尔马林液固定，

常规处理，石蜡包埋，连续切片，每份标本切片2张，厚4μm，分别行常规HE染色和Survivin免疫组化分析。1．3

免疫组化

免疫组织化学方法采用链霉素抗生物素

蛋白－过氧化物酶连接(S－P)法，一抗兔抗人Survivin单克隆抗体(美国StantaCruz公司)，工作浓度1∶100;S－P免疫组化试剂盒(浓缩型)购自北京中山生物技术有限公司。实验步骤按试剂盒说明书进行。试验均设立空白对正常阴性对照及阳性对照。照、1．4

结果判定

Survivin蛋白阳性染色多见于细胞质，偶

见于细胞核，以细胞质或胞核出现棕黄色颗粒为阳性信号。每例均随机观察5个高倍视野(×400)，用半定量积分法判断结果，阳性细胞≤5%为0分，6%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，＞75%为4分;阳性强度黄色为1分，棕黄为2分，棕褐色为3分。两项积分1～4分为弱阳性(+)，5～8分为相乘:0分为阴性(－)，

9～12分为强阳性(﹢+)。中度阳性(﹢﹢)，﹢1．522．1

统计学方法

2

Survivin蛋白表达强度与子宫内膜癌临床病理的关系

例数142015192212

－～+117118161

++～+++313411611

0．0001

12．500

0．073

3．218

0．014

6．091

P

χ2

类别分级

G1G2+G3肌层＜1/2≥1/2分期Ⅰ～ⅡⅢ～Ⅳ

3

讨论

Survivin基因由耶鲁大学的Altieri等于1997年［1］利用效应细胞蛋白酶受体－1(effectorcellproteasereceptor－1，EPR－1)cDNA在人类基因组库中筛选分离出来。是近年来分离的IAP基因家族的新成员。该基因表达的Survivin蛋白是迄今为止分子量最小也是抗凋亡作用最强的IAP［2］。研究发现，Survivin可以抵消由IL－3、Fas(CD95)、TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)、BAX、TNF－α、Caspases抗肿瘤药物及X射线辐射所引起的细胞凋亡。其作用机制并不十分清楚。一些研究

表明Survivin可结合并抑制

7，活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、但不能抑制蛋白酶

［2］

8。另外，Survivin还特异性表达于细胞周期的G2/M期，通

过与细胞有丝分裂纺锤体的微管结合，参与对细胞基因转录的调节，并间接抑制Caspase对纺锤体的水解作用，有利于保护有丝分裂细胞器的完整性，从而抑制细胞凋亡。Survivin的过度表达可使细胞失去正常增殖周期凋亡关卡

［3］(checkpoint)的限制，促进转化细胞的异常增殖。Sur-vivin蛋白在胚胎发育过程中出现，在终末分化的成人组织

运用SPSS10．0统计软件对所得数据

进行χ检验及t检验。

结

果

Sur-Survivin蛋白在不同子宫内膜组织中的表达

中无表达或低表达，而在转化细胞株和人体内几乎所有的

［4］

恶性肿瘤中都有明显表达。Survivin这种选择性的表达特点使其在肿瘤发生、发展机制和治疗的研究中日益受到重视。本研究表明，Survivin在子宫内膜乳头状浆液性癌，子宫内膜腺癌和子宫内膜不典型增生中有丰富的表达，而

［5］

在正常内膜中的表达非常有限，与文献报道相符。本实验发现，在子宫内膜乳头状浆液性癌，子宫内膜癌和子宫内

87．9%和膜不典型增生中Survivin的表达率分别为100%，

70．0%，均明显高于正常内膜(均P＜0．05)。而在子宫内

膜乳头状浆液性癌，子宫内膜癌和子宫内膜不典型增生中，无论是阳性表达率还是过表达率，差异无显著性意义。这种表达特点提示:Survivin基因是在子宫内膜癌发生的早期阶段(不典型增生阶段)就被激活，并表达出大量的Sur-vivin蛋白。我们推测Survivin在子宫内膜中过度表达，通过抑制细胞凋亡，为存在基因缺陷的细胞提供生存优势，促使基因突变的积聚和细胞恶性转化，最终导致子宫内膜癌的发生、发展。

许多临床病理因素与子宫内膜癌的预后相关，但多数学者认为，组织学分级、分期、肌层浸润等是独立的影响因素

［6］

vivin蛋白在正常子宫内膜中的表达极为有限，分泌期全为阴性表达，增生期仅有1例存在微弱的阳性表达。而在子宫内膜乳头状浆液性癌，子宫内膜腺癌和子宫内膜不典型在三者中表达的阳性增生中Survivin有非常丰富的表达，

87．9%和70．0%，率分别为100%，均高于正常内膜中的表达(均P＜0．05)。但值得注意的是Survivin蛋白在子宫内膜癌和子宫内膜不典型增生中的阳性表达率差异无显著性意义(P＞0．05)(表1)。进一步比较在二者中的过表达率(﹢+)，﹢～﹢﹢在内膜癌中为17/34，在不典型增生中为8/20，差异无显著性意义(P＞0．05)(表1)。

表1

Survivin蛋白在不同子宫内膜组织中的表达

类别子宫内膜腺癌子宫内膜不典型增生

正常子宫内膜

UPSC

例数3220202

－46180

+13620

+阳性表达率%﹢﹢﹢﹢10600

5202

87．57010100

中

华中医药1089学刊

。所以我们选取分期、组织学分级和肌层浸润作为观

2．2Survivin蛋白表达强度与子宫内膜癌临床病理的关系

Survivin的表达与子宫内膜癌的组织学分级、手术－病理分期密切相关，但与肌层浸润无明显关系(表2)。

Survivin的表达强度与子宫内膜癌的察指标。本研究发现，

组织学分级和手术－病理分期密切相关(P＜0．05)，并随肌层浸润加深其表达呈增强的趋势(但P＞0.05)。

第29卷第5期

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Vol．28No．5May2011

2011年5月ARCHIVESTRADITIONALCHINESE

中医药阻止类风湿关节炎骨侵蚀作用研究进展

121

王云卿，刘喜德，王芳

(1．浙江中医药大学，浙江杭州310053;2．浙江省中西医结合医院，浙江杭州310003)

RA)是一种以慢性破坏性关节病变为主要变现的全身性自身免摘要:类风湿关节炎(RheumatoidArthritis，

疫病，筛选具有阻止RA骨侵蚀作用的药物具有重要临床价值。中医药治疗RA有较好临床疗效。对近年中医药阻止RA骨侵蚀作用的临床及实验研究作一综述。

关键词:类风湿关节炎;骨侵蚀;中医药

中图分类号:R593．22

文献标识码:A

文章编号:1673－7717(2011)05－1090－03

DevelopmentofTraditionalChineseMedicinePreventingBoneErosionofRheumatoidArthritis

WANGYun-qing1，LIUXi-de2，WANGFang1

(1．ZhejiangUniversityofTraditionalChineseMedicine，Hangzhou310053，Zhejiang，China;

2ZhejiangProvincialHospitalofIntegratedTraditionalandWestemMedicine，Hangzhou310003，Zhejiang，China)

Abstract:RheumatoidArthritis(RA)isasystemicautoimmunedisease，themainmanifestationofwhichischronicandcrosivearthritis．ScreeningthedrugtopreventboneerosionofRAhaveimportantclinicalvalue．ThetreatmentwithtraditionalChinesemedicineofRAhasbetterclinicalefficacy．ThisarticlesummarizedtheclinicalandexperimentalstudyonpreventingtheboneerosionofRAwithTraditionalChineseMedicine．

Keywords:rheumatoidarthritis;boneerosion;traditionalChinesemedicine

Survivin在中、低分化的子宫内膜癌中的过表达率明显高于高分化的子宫内膜癌(P＜0．05)，在Ⅲ～Ⅳ期子宫内膜癌

中的过表达率高达91．7%(11/12)，明显高于Ⅰ～Ⅱ期的27．3%(6/22)(P＜0．01)，也就是肿瘤分化越差，分期越晚，则Survivin蛋白的表达越高。本次研究目前尚未能分析Survivin的表达与患者生存率的关系，因而对于评价其作为预后因子的价值，尚须通过今后的临床追踪来确定。本研究中子宫内膜乳头状浆液性癌仅为2例，标本数不足(因病例少见)，无法做出有意义的统计结果，但2例UPSC中均见Survivin的过表达，关于UPSC中的Survivin的表达及Survivin表达强度与UPSC的分期、组织学分级、肌层浸润的相关性尚需扩大样本数进一步研究。

Survivin可能通过抑制细胞凋总之，本研究结果提示，亡和促进细胞增殖而在子宫内膜癌的发生发展中起着重要

的作用，且Survivin的表达与子宫内膜癌的预后影响因素

中

华中医药1090学刊

关系密切。体外研究表明，用反义和突变体Survivin可诱导肿瘤细胞凋亡，并能增加肿瘤细胞对放疗和化疗的敏感性

［7］

内膜癌的早期诊断、预后判断具有潜在价值，为子宫内膜癌

的分子诊断和治疗提供了更多的选择。参考文献

［1］AmbrosiniG，AdidaC，AltieriDC，etal．Anovelanti－apopto-sisgeneSurvivin，expressedincancerandlymphoma［J］．Na-tureMed，1997，3(8):917－921．

［2］ShinS，SungBJ，ChoYS，etal．Ananti－apoptoticprotein

humansurvivinisadirectinhibitorofcaspase－3and－7［J］．2001，40:1117．Biochemistry，

［3］IamimI，WangY，SausvilleED，etal．IAP－familyprotein

survivininhibitscaspaseactivityandapoptosisinducedbyfas(CD95)，Bax，Caspases，andanti－cancerdrugs［J］．CancerRes，1998，58:5315．

［4］RohayemJ，DiestelkoetterP，WeigleB，etal．Antibodyrespon-setothetumorassociatedinhibitorofapoptosisproteinsurvivinincancerpatients［J］．CancerRes，2000，60:1815．

［5］TakaiN，MiyazakiT，NishidaM，etal．Survivinexpressioncor-relateswithclinicalstage，histologicalgrade，invasivebehavior-．CancerLett，andsurvivalrateinendometrialcarcinoma［J］2002，184:105．

［6］沈铿，．北京:人民郎景和．妇科肿瘤面临的问题与挑战［M］

2002:64－68．卫生出版社，

［7］AmbrosiniG，AdidaC，SirugoG，etal．Inductionofapoptosi-sandinhibitionofcellproliferationbysurvivingenetargeting［J］．JBiolChem，1998，273:11177．

。因此研究Survivin与子宫内膜癌中的关系，对子宫

收稿日期:2010－12－03

2008CA086);基金项目:浙江省中医药科技计划项目(2007CB195，

杭州市科技发展计划项目(20092133W09)

作者简介:王云卿(1985－)，男，河南南阳人，硕士研究生，研究方

向:中西医结合诊治风湿病的临床及实验研究。

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/ur4m.html