不同水果中的维生素C的含量比较

不同水果中的维生素C的含量比较

学院：生命科学学院 班级：2014级生物技术（产业计划） 实验组成员：杨勇 寇伟 胡蜜蜜 孙洵 韩晨 张旭 彭雅琴

一.实验目的

1.掌握2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C的原理和方法； 2.了解维生素C的功能及测定意义；

3.了解不同水果中的维生素C的含量，给维生素C的摄入提供有价值的建议；

二.实验原理

维生素C又称作抗坏血酸。在1928年，从牛的肾上腺皮质质中提取出来的结晶物质，证明对治疗和预防坏血病有特殊功效，因此称作抗坏血酸。

染料2,6－二氯靛酚的颜色反应表现两种特性,一氧化还原状态,氧化态为深蓝色,还原态变为无色;二介质的酸度影响,在碱性溶液中呈深蓝色,在酸性介质中呈浅红色。 用蓝色的碱性染料标准溶液,对含维生素C的酸性浸出液进行氧化还原滴定,染料被还原为无色,当到达滴定终点时,多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色,由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。

OCCCOHOHO+ClONClOHHOHOCCHCH2OHOCCOClO+COHOHOCCHHONHClOHCH2OH

三.实验器材

实验仪器：组织搅碎机 容量瓶（50ML） 电子分析天平 锥形瓶（100ML）碱式滴定管 胶

头滴管 漏斗 滤纸 移液枪（带移液枪头）

实验试剂：

1. 2%草酸溶液：草酸2g溶于100ML蒸馏水中。 2. 1%草酸溶液：溶1g草酸于100ML蒸馏水中。 3. 标准抗坏血酸溶液（0.1mg/ml）:准确称取50.0mg纯抗坏血酸，溶于1%草酸溶液中，

并稀释至500ML。贮存于棕色试剂瓶中，冷藏备用。 4. 1%的盐酸溶液

5. 0.1%2,6-二氯酚靛酚溶液：溶500mg2,6-二氯酚靛酚于300ML含有104mgNaHCO3热水

中，冷却后加水稀释至500ML，过滤掉不溶物，贮存于棕色试剂瓶中，冷藏，每次使用时用标准抗坏血酸标定。

6. 新鲜水果（苹果、橙子、柚子、西红柿）。

四.实验步骤

1. 提取样品：将新鲜水果用水洗净，用纱布或者吸水纸拭去表面的水。然后各称取

20.0g，加2%草酸100ML置于组织搅碎机中打成浆状。然后各称取桨状物5.0g,倒入50ML容量瓶中以2%的草酸溶液稀释到刻度。静置10min，过滤(最初的数ML不要）。过滤液体备用。 2. 标准液滴定

准确吸取标准抗坏血酸1.0ML（含有0.1mg的抗坏血酸）置于50ML锥形瓶中，加入9ML1%草酸，碱式滴定管以0.1%2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色，并且保持15s即为滴定终点。有所用染料的体积计算1ML染料相当于多少mg的抗坏血酸。 3. 样品溶液滴定

对上述的过滤液各准确吸取两份，每份10ML分别放入50ML锥形瓶中，滴定方法同标准液的滴定。

五.计算

m=(V*T/m)*100

注明：m:100mg样品中含抗坏血酸的质量（mg）; V:滴定时所用去的染料体积数（ML）；

T:每毫升染料能够氧化抗坏血酸的质量数（mg/ml）；

m：10ML样液相当于含样品之质量数（g）;

六.注意事项

1.维生素C属于不稳定维生素，尤其是在溶液状态下，容易被热、碱、氧和光破坏，在酸性条件下较为稳定。提取维生素C应该迅速，以防样品暴露于空气中被氧化破坏。

2.滴定速度应该迅速，一般情况下最好不要超过2min。滴定所用的染料不要少于1ML或者说多于4ML，如果样品中所含有的维生素C的量很高或者很低，可以适当加减样液。

七.实验思考

1. 简述维生素C的生理意义； 2.为什么滴定速度要求迅速？

3.为什么滴定终点在淡红色存在15s为准？

4.比较本实验中的实验结果同小组收集到的参考文献中维生素C的含量，对小组做的实验做出评估和分析；

5.通过实验，比较试验的几种水果中维生素C的含量，对日常生活摄入维生素C提出有价值的意见；

八.说明

1.参加本次实验的小组成员须遵守 生物化学实验室的秩序及各项规定，认真实验，各同学精诚合作，争取取得满意的实验成效；

2.关于《不同水果中维生素C的含量比较》实验中实验小组成员分工依据实验情况合理分工，锻炼各成员的操作技能，较好的发挥每个同学的实验优点，互相学习，共同进步；

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