实验报告3-微生物细胞形态及菌落特征观察 - 图文
更新时间:2024-04-06 06:31:01 阅读量: 综合文库 文档下载
微生物细胞形态及菌落特征观察实验报告
马子午
生命科学学院 食品科学与工程专业 14101班 02号
1. 引言 1.1实验目的
学习细菌的一般接种方法;了解放线菌、蓝细菌、酵母菌、霉菌的菌落特征;学习并掌握如何观察细菌的形态特征,掌握常用霉菌制片方法。
1.2实验原理
放线菌的菌落会产生大量的基内菌丝和气生菌丝,并进一步分化产生孢子丝和孢子,表面呈粉状、颗粒状或絮状;部分蓝细菌可以形成孢子,由成串细胞连成丝状的蓝细菌,在细胞断裂时形成片段,这个片段由异形胞、营养细胞以及极节组成;酵母菌无性繁殖有芽殖、裂殖和产生掷孢子,有性繁殖可以形成子囊和子囊孢子,当酵母菌繁殖旺盛时,母细胞出芽产生的子细胞没有脱离母细胞的时候,子细胞又开始繁殖,这样许多细胞连在一起,形成藕节状的假菌丝;霉菌有青霉和曲霉,青霉的菌落形态特征呈扫帚状,曲霉的形态特征为菊花状的头和足细胞。
霉菌的有些结构在制片过程中容易被破坏,影响观察,采用载玻片培养法。简单易行,并且还可以在同一标本上观察到微生物发育的不同阶段的形态。[1]
2. 材料与方法 2.1材料与试剂
曲霉(Aspergillus spp.),青霉(Penicillium spp.),放线菌,蓝细菌,啤酒酵母菌(Sac.cerevisiae),复红染液,美蓝染液,棉蓝染液,酸性酒精。
2.2仪器与设备
显微镜,酒精灯,盖玻片,载玻片,镊子,接种环。
2.3方法与步骤
2.3.1放线菌的形态观察(插片法)
准备玻片:取一块干净的载玻片烘干,放于桌面。 接种与观察:用镊子从含放线菌菌种的培养基中取一块盖玻片,再用镊子在盖玻片上取菌种置于载玻片中央位置,直接镜检。
2.3.2蓝细菌形态观察
准备玻片:取一块干净的载玻片烘干,放于桌面。
接种:在载玻片中央滴一滴无菌水,取少量含有蓝细菌寄生的藻类于无菌水中,用镊子的头端慢慢敲碎至无菌水开始呈至绿色,盖上盖玻片。
镜检:直接镜检。
2.3.3啤酒酵母子囊孢子形态观察
准备玻片:取一块干净的载玻片烘干,放于桌面。 取菌涂片:在载玻片中央滴一滴无菌水,用接种环从含有啤酒酵母菌的试管中取菌种涂于无菌水中。
干燥固定:将已接种的载玻片放于酒精灯上方用文火干燥,待干燥后将载玻片穿于火焰中间固定。
染色:向载玻片滴加复红染液,与酒精灯上方加热,5-10分钟即可。 脱色:用酸性酒精脱色30-60s,水洗。
再染色:用美蓝染色5-10s,水洗,干燥。 镜检
2.3.4霉菌形态观察
准备玻片:取两块干净的载玻片烘干,放于桌面,往两块载玻片中央分别滴加一滴无菌水和棉蓝染液。
取菌涂片:在滴无菌水的载玻片上取曲霉菌涂于载玻片中央,在滴棉蓝染液的载玻片上取青霉菌涂于载玻片中央。
镜检:分别盖上盖玻片,直接镜检。
2.3.5微生物菌落特征观察
观察培养基中不同菌落的特征
3.结果与分析 3.1放线菌形态观察
基内菌丝 气生菌丝
40X 显微镜观察
3.2蓝细菌形态观察
异形细胞 营养细胞
40X 显微镜观察
3.3啤酒酵母形态观察
40X 显微镜观察
3.4霉菌形态观察
40X显微镜观察曲霉 40X显微镜观察青霉
3.5微生物菌落特征比较
菌种 放线菌 细菌 酵母菌 霉菌
观察特征
多数放线菌有基内菌丝和气生菌丝的分化,气生菌丝成熟时分化成孢子丝并产生成串的干粉状孢子,使菌落干燥,不透明、表面呈致密的绒丝
状,正反面颜色不一致,并常有辐射状褶状等
多数细菌的菌落一般呈现湿润、光滑、透明、较粘稠、质地均匀及颜色
较一致等
酵母菌的细胞形态一般呈乳白色或红色,表面湿润粘稠,出芽形成的子细胞尚未和母细胞分开,又长出新芽,形成成串的细胞,呈假丝状等 菌落质地比较疏松,外观干燥,不透明,呈现或紧或松的蛛网状、绒毛状或棉絮状,与培养基的连接紧密,不易挑取,菌落正反面的颜色和边
缘与中心的颜色不一致等
4.讨论与结论 4.1注意事项
实验过程中要严格控制无菌操作,取菌过程中试管塞不能放在实验台上,整个过程要在酒精灯的火焰旁完成,接种环取菌前后都应该在火焰上灼烧灭菌。复红加热染色的时候不要让染料蒸干,边加热边滴加染料,脱色的时候用的是酸性酒精,不是平常用的酒精。
4.2结论
不同菌有不同的形态,比如:放线菌、蓝细菌、酵母菌、霉菌的菌落特征各不相同,各有各的特征,要仔细的观察予以区分。
参考文献
[1]樊明涛,赵春燕,朱丽霞,等.食品微生物学实验[M].北京:科学出版社,2015
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