综合实验一 芦丁的提取鉴定和复方芦丁胶囊的制备

综合性实验一

芦丁的提取鉴定和复方芦丁胶囊的制备

研究材料：槐花米

提取成分：芦丁 制剂：胶囊

本实验提供了参考的提取方法，要求学生自行设计一种不同的提取方法。

一、实验目的

⑴比较黄酮类化合物不同提取的方法的产品提取率； ⑵掌握黄酮类化合物的一般鉴别原理及方法；

⑶掌握硬胶囊剂制备的一般工艺过程，及用胶囊板手工填充胶囊的方法； ⑷掌握硬胶囊的质量检查内容及方法。 二、实验原理 ⑴ 芦丁提取原理

槐花米为一常用中药，可用作止血药，具有清肝泻火、治疗肝热目赤、头痛眩晕的功效。其主要含有黄酮类成分，其中芦丁的含量高达12％～20％，另含有少量的皂苷。

芦丁（rutin）亦称芸香苷，C27H30O6·3H2O淡黄色针状结晶。有减少毛细血管通透性的作用，临床上主要是治疗高血压的辅助药物。其广泛存在于植物中，现已发现含有芦丁的植物有70多种，其中以槐花米和荞麦叶中含量较高，可作为提取芦丁的原料。

本实验参考的提取方法是利用芦丁分子中具有酚羟基，显弱酸性，用碱水为溶剂煮沸提取，提取液加酸酸化后又成为游离的芦丁而析出，利用芦丁对冷水和热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制，并通过显色反应和纸色谱法进行检识。并比较两种提取方法的优缺点。 ⑵ 胶囊剂的制备及质量控制基本概念

胶囊剂（capsules）系指将药物盛装于硬质空胶囊或具有弹性的软质胶囊中

制成的固体制剂。一般可分为硬胶囊剂、软胶囊剂和肠溶胶囊剂。本次实验是制备硬胶囊，将一定量的药物加辅料制成均匀的粉末或颗粒，充填于空胶囊中，或将药物粉末（颗粒）直接分装于空胶囊中制成。空胶囊的规格由大到小分为000、00、0、1、2、3、4、5号共8种，一般常用的是0～5号。 ⑶ 胶囊剂的质量控制

①外观 胶囊剂应整洁，不得有粘结、变形或破裂现象，并应无异臭。 ②装量差异 平均装量0.30g以下，装量差异限度为±10％；0.30g或0.30以上，装量差异限度应为±7.5％。

③崩解度与溶出度 胶囊剂作为一种固体制剂，通常应作崩解度、溶出度或释放度检查。 三、实验步骤 ⑴ 芦丁的提取

① 碱溶酸沉法 取槐花米粗粉30g（压碎），置于800ml烧杯中，加0.4％硼砂水沸腾溶液200ml。在搅拌下以石灰乳（CaO溶于水中）调至pH＝8～9，加热微沸30min，补充失去的水分，并保持pH＝8～9，倾出上清液，用4层纱布过滤，重复提取一次。合并滤液，将滤液用6mol/L盐酸调pH＝5左右，放置析晶，过夜。趁热抽滤（先倒出上层清液），用蒸馏水洗3～4次，放置于空气中自然干燥得粗芦丁（或烘箱中60℃干燥1h），称重。 ② 自行设计一种提取方法。

⑵芦丁的精制 取粗芦丁2g，加400ml蒸馏水，煮沸至芦丁全部溶解，趁热立即抽滤，放置冷却。冷却后即可析出结晶，抽滤得芦丁精制品。 ⑶芦丁的鉴别

① 熔点的测定。用熔点测定仪测定芦丁标准品及精制芦丁的熔点。 ② 原料芦丁含量测定 A） 芦丁标准曲线的制作

芦丁对照品10mg，精密称定至50ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即为0.200mg/mL的原溶液。分别精密量取上述溶液2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0mL置于50ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度摇匀，以溶剂为空白，在360nm处测定吸光度A。以吸光度A为纵坐标，以浓度（mg/mL）为横坐标，

绘制标准曲线，计算回归方程及R值。并绘出标准曲线。

B） 取自制的芦丁样品10mg，按上述方法在360nm处测定吸光度A，带入标准

曲线计算芦丁含量。

③ 取芦丁精制品约10mg，用5ml乙醇溶解，制成样品溶液。

A） 三氯化铝纸片反应 在一张滤纸条上滴加样品溶液后，加1％三氯化铝乙醇 溶液两滴，于紫外光灯下观察荧光变化，记录现象。

B） Molish反应 取样品溶液1ml加10％α-萘酚溶液1ml，振摇后斜置试管，沿管壁滴加浓硫酸，静置，观察并记录液面交界处颜色变化。

C） 盐酸镁粉反应 取样品溶液少量于试管中，加入金属镁粉少许，盐酸2～3滴，观察并记录颜色变化。 D） 芦丁的纸色谱鉴定

点样：样品溶液和芦丁标准品的乙醇溶液。 展开剂：正丁醇－醋酸－水（4：1：5）上层溶液。 展开方式：预饱和后，上行展开。

显色：喷三氯化铝试剂前后，置日光及紫外光（365nm）灯下检视色斑的变化 ⑷复方芦丁胶囊的制备 ① 处方组成

精制芦丁 2.0g 维生素c 1.0g 淀粉 1.0g 滑石粉 适量

② 制法 将主药芦丁提取物研磨成粉末状，过80目筛，按处方称取芦丁、维生素c、淀粉、滑石粉混合均匀即得。

③ 硬胶囊的填充 采用有机玻璃制成的胶囊板填充。板分上下两层，上层有孔洞。先将囊帽、囊体分开，囊体置于胶囊板孔洞中，调节上下层距离，使胶囊口与板面相平。将颗粒铺于板面，轻轻振动胶囊板，使颗粒填充均匀。填满每个胶囊后，将板面多余颗粒扫除，顶起囊体，套合囊帽，取出胶囊，即得。 ⑸质量检查

① 外观 胶囊外观应整洁，不得有黏结、变形或破裂现象，并应无异臭。 ② 装量差异 取供试品20粒，分别精确称定重量，倾出内容物，再分别精确称定囊壳重量，求出每粒胶囊内容物的装量与20粒的平均装量。超出装量差异

限度的不得多于2粒，并不得有1粒超出限度1倍。

③崩解度 硬胶囊应在30分钟内全部崩解。如有1粒不能完全崩解，应另取6粒复试。分别比较其在蒸馏水中、PH6.8的缓冲溶液中及0.1mol/L的盐酸中的崩解时间。

四、实验结果与讨论

⑴记录实验条件、现象、图谱、斑点颜色、各试剂用量及产品芦丁的重量。 ⑵产品应为浅黄色晶体（如呈灰绿色或暗黄色，分析原因）。 ⑶比较三种方法提取的芦丁的理论产量和实际得率之区别。 ⑷记录硬胶囊剂的质量检查情况。 五、附注

槐花米中含大量果胶、粘液等水溶性杂质，用石灰乳或石灰水而不用其他碱性溶液提取，可使上述还羧基杂质生成钙盐沉淀，不致溶出，有利于产品的纯化。 六、思考题

⑴影响提取效果的因素有哪些？ ⑵影响中药硬胶囊崩解的因素有哪些？

⑶层析纸的斑点浸在展开剂中是否可以？为什么？ ⑷悬挂层析纸时为何不能接触层析缸？ ⑸说明显色原理。 备注：

1. 抽滤装置 250ml抽滤瓶 配80mm布氏漏斗（直径70mm中速滤纸）。 2. 饱和石灰乳的配制：氧化钙中加入2.5~3倍量的水，生成氢氧化钙悬浊液，放在玻璃容器中，盖橡皮塞。 3. 纸色谱鉴定

芦丁标准品配好放入小玻璃瓶中加胶塞，玻璃点样毛细管（内径0.5mm） （1） 一个毛细管点一个瓶中的样，吸取—垂直点下去---干后再点，重复2-3

次（直到点样达2-3mm直径即可）

（2） 放入展开缸中（用细绳穿过孔洞，悬挂于缸口，两侧不能碰壁）---烘

干（80度）、显色（层析纸为层析1号滤纸15×6cm），纸与喷壶离得远点，然后横过来放在表面皿上烘干。

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