植物组织培养 第2章试题

第2章 《基本原理》复习题及参考答案

一、填空：

1、绝大多数培养植物再生植株时都先经过 愈伤组织 阶段。

★2、愈伤组织形成大致经历 诱导期 、分裂期 和 分化期 三个时期。

3、使用植物生长调节物质时要注意： 种类和浓度生长素和细胞分裂素的比值 。 ★4、愈伤组织的形态发生方式主要有 不定芽方式 和胚状体 方式。

5、组织培养细胞再分化包括四个水平：细胞水平的再分化、组织水平的再分化、器官水平的再分化（器官发生）和植株水平的分化 二、名词解释：

★1、愈伤组织培养(callus culture):是指将母体植株上的外植体，接种到无菌的培养基上，进行愈伤组织诱导、生长和发育的一门技术。

★2、继代培养 (subculture)：愈伤组织在培养基上生长一段时间以后，由于营养物质枯竭，水分散失，以及代谢产物的积累，必须转移到新鲜培养基上培养。这个过程叫做继代培养

3、体细胞胚（somatic embryo）又称胚状体（embryoid）：指在组织培养中，由一个非合子细胞(体细胞)，经过胚胎发生和胚胎发育过程（经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期），形成的具有双极性的胚状结构。

4、体细胞胚胎发生：植物组织培养细胞产生胚状体的过程，称为体细胞胚胎发生。 5、细胞全能性（cell totipotency）：每一个植物细胞具有该植物的全部遗传信息，在适当条件下可表达出该细胞的所有遗传信息，分化出植物有机体所有不同类型细胞，形成不同类型的器官甚至胚状体，直至形成完整再生植株

★6、形态建成：外植体细胞在适宜的培养条件下发生脱分化、再分化，产生芽和根，或者形成胚状体，发育成苗或完整植株。

三、问答题

★1、愈伤组织细胞的分化一般分几个时期？各有何特点？ （1）诱导期（起动期）：是细胞准备分裂的时期。细胞大小几不变，内部发生生理生化变化，迅速合成蛋白质和核酸。

（2）分裂期：外层细胞分裂，中间细胞常不分裂，形成小芯。细胞分裂快，结构疏松，缺少结构，浅而透明。在原培养基上，细胞必分化，及时转移，其可无限制地进行细胞分裂，维持不分化状态。

（3）分化期：细胞在形态和生理功能上的分化，出现形态和功能各异的细胞。 2、优良的愈伤组织必须具备哪4个特性？

（1）高度的胚性或再分化能力，以便从这些愈伤组织得到再生植物

（2）容易散碎，以便用这些愈伤组织建立优良的悬浮系，并且在需要时能从中分离出全能性的原生质体

（3）旺盛的自我增殖能力，以便用这些愈伤组织建立大规模的愈伤组织无性系。 （4）经过长期继代保存而不丧失胚性，便有可能对它们进行各种遗传操作。 3、愈伤组织的形态发生有哪些情况？

（1）愈伤组织仅有根或芽器官的分别形成，即无根的芽或无芽的根；

（2）先形成芽，再在芽伸长后，在其茎的基部长出根而形成小植株，多数植物属这种情况；

（3）先产生根，再从根基部分化出芽而形成小植株。这种情况较难诱导芽的形成，尤其对于单子叶植物；

（4）先在愈伤组织的邻近不同部位分别形成芽和根，然后两者结合起来形成一株小植株。少见。

单子叶植物：与双子叶植物诱导发生过程类似，只是在形态上无鱼雷形胚等阶段，成熟体胚上有盾片、胚芽鞘和胚根等结构。

4、简述细胞脱分化过程。

细胞的脱分化过程可分为3个阶段：

第一阶段为启动阶段，表现为细胞质增生，并开始向细胞中央伸出细胞质丝，液泡蛋白体出现；

第二阶段为演变阶段，此时细胞核开始向中央移动，质体演变成原质体； 5、影响植物离体形态发生的因素有哪些？（不是重点） （1）植物种类和基因型 （2）培养材料的生理状态

发育年龄：一般幼态比老态组织形态发生能力高； 培养器官或组织类型：细胞分裂旺盛的器官较好；

培养时间和细胞倍性：一般取处于旺盛生长期的愈伤来诱导器官形成。 （3）培养基

a营养成分： 一般认为，培养基中的铵态氮和K+有利于胚状体形成，提高无机磷的含量可促进器官发生; 茎尖培养和芽诱导培养基主要是MS及其修改的培养和B5培养基; 碳水化合物种类及浓度对胚状体发育有重要作用,缺糖或低糖无法形成胚状体。 b 植物激素及生长调节剂

（起主导作用，通过影响内源激素的平衡起作用

c培养基的性质：愈伤组织诱导：在固体培养基上；细胞和胚状体的诱导在液体培养基上 （4）培养条件：光照；温度；气体；湿度等 ★6、分裂期愈伤组织的共同特征：

细胞分裂快，结构疏松，缺少有组织的结构，维持其不分化的状态，颜色浅而透明。 ★7、胚状体发生途径与器官发生途径形成植株的区别:

? ①胚状体具有两极性，即在发育的早期阶段，从其方向相反的两端分化出茎端和根端；而不定芽和不定根都为单向极性。

? ②胚状体的维管组织与外植体的维管组织无解剖结构上的联系。而不定芽或不定根往往总是与愈伤组织的维管组织相联系。

? ③胚状体维管组织的分布是独立的“Y”字形。而不定芽的维管组织无此现象。 ★8、器官发生形成小苗的方式

? （1）愈伤组织仅有根或芽器官的分别形成，即无根的芽或无芽的根； ? （2）先长芽，后长根，多数情况；

? （3）先长根，再从根的基部长芽。这种情况较难诱导芽的形成，尤其对于单子叶植

物；

? （4）先在愈伤组织的邻近不同部位分别形成芽和根，然后两者结合起来形成一株植

株。

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