细胞生物学Microsoft Word 文档

第一次作业

1、简述动物细胞在禁用词语内的特性？

答：1）动物细胞在胚胎期即已高度分化，而且这种分化是不可逆转的。

2）禁用词语内的动物细胞按照分裂能力可以分为三大类：

第一类是能保持继续分裂能力的细胞；第二类细胞群是永久失去分裂能力的细胞； 第三类是静止细胞群，即所谓的Go细胞。

2、简述激素对器官分化的调控？

激素在细胞生长与个体发育中具有重要的调控作用。离体培养下的器官分化，在大多数情况下是通过外源提供适宜的植物激素而实现的。在众多的植物激素中，生长素与细胞分裂素是两类主要的植物激素，在离体器官分化调控中占有主导地位。离体培养中，外源激素在细胞内的吸收和代谢影响到激素的活性从而影响其培养效果。

3、简述单倍体植物的特点及应用潜力？

单倍体植物的特点：1）体细胞染色体数减半

2）生长发育弱，体型小，各器官明显减小

3）雌雄配子严重败育，有的甚至不能进入有性世代。

单倍体的应用潜力：1）迅速获得纯合型材料，缩短育种年限

2）获得育种中间材料

3）与诱变育种相结合可提高诱变效率

4）与细胞融合相结合，使这一育种途径更具有实际应用意义

5）作为遗传工程受体更为有效

6）用作基础遗传研究的各个领域

4、举例说明按细胞分裂潜力划分的几种细胞类型？

答：1）全能性细胞：细胞具有发育成完整个体的潜能。如受精卵、2-细胞期细胞、8 -细胞期细胞(哺乳类)

2）多能性细胞：具有分化出多种组织的潜能。如成体中的有些多能干细胞(骨髓干细胞、淋巴干细胞)。

3）单能性细胞：只能分化出一种细胞的分化潜能。

如成体中的有些单能干细胞，如：精原细胞。

第二次作业答案

1、极性：指植物的器官、组织、甚至单个细胞在不同的轴向上存在的某种形态结构以及生理生化上的梯度差异。

2、细胞分化：细胞的后代在结构和机能上发生差异，形成不同细胞的过程。分化细胞获得并保持特化特征，合成专一性的蛋白质。

3、染色体工程：染色体工程是指按照一定的设计，有计划地消减、添加或代换同种或异种染色体的技术。

4、胚性发育：植物幼胚接种到培养基以后，仍然按照在禁用词语内的发以及方式发育，最后形成成熟胚（有时甚至可能类似种子），然后再按种子萌发途径出苗形成完整植株，这种途径发育的幼胚一般一个幼胚将来就是一个植株。

5、胚胎培养：是植物组织培养的一个主要领域。植物胚胎培养是指对植物的胚(种胚)及胚器官(如子房,胚珠)进行人工离体无菌培养,使其发育成幼苗的技术。

6、试管动物：是指经体外受精获得的早期胚胎并被移植到假孕动物子宫发育而产生的动物。

7、超数排卵：排卵率可以通过药物的方法进行控制。

应用外源性促性腺激素诱发卵巢多个卵泡发育，并排出多个具有受精能力的卵子的方法， 称为超数排卵。

第三次作业

1、异核体：两不同体细胞融合，形成同时含有两个细胞核的细胞称异核体。

2、胞质体：对细胞用细胞松弛素B处理后,离心去除细胞核,剩余的细胞结构。

3、细胞重组：由不同细胞的细胞核与细胞质在融合因子介导下并合形成完整细胞的技术叫细胞重组。这种细胞叫重组细胞。

4、嵌合体：又名喀迈拉现象，是动物学的一种特殊现像，指动物的两颗受精卵融合在一起身为一个个体并成长。

5、基因转移：定义1：将目的基因导入受体细胞的过程。

定义2：将外源基因导入细胞(包括体外培养或体内细胞、真核或原核生物细胞)的过程。

第四次作业

1、愈伤组织：在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。

2、同步培养：同步培养是指在培养中大多数细胞都能同时通过细胞周期的各个阶段，同步

化程度一般用同步百分数来表示。

3、接触抑制：细胞在一代的生存过程中，即从接种到长满底物表面后，由于细胞繁殖数量

增多相互接触时，细胞数不再增加。

4、细胞融合：细胞融合是指用自然或人工方法、使两个或更多个不同的细胞融合成一个细

胞的过程。

5、雌核发育：俗称假受精，意指精子虽然正常地钻入和激活卵子，但精子的细胞核并未参

与卵球的发育，精子的染色体很快消失，胚胎的发育仅在母体遗传的控制下进行。

第五次作业

1、 为什么可以利用HAT培养基筛选出杂交瘤细胞？

在HAT培养基中含有次黄嘌呤（H）、氨基喋（A）及胸腺嘧啶核苷（T）。由于选用次黄嘌呤鸟嘌呤核糖转移酶缺陷型（HPRT－）骨髓瘤细胞或胸腺嘧啶核苷激酶缺陷型（TK－）骨髓瘤细胞为亲本，该细胞只能通过全合成途径合成DNA。因为淋巴细胞具有合成DNA的两条途径，因此杂种细胞通过互补作用获得HRPT或TK基因，可应用培养基中次黄嘌呤及胸腺嘧啶核苷，通过补救合成途径合成DNA。在HAT培养基中，HPRT－或TK－亲本细胞死亡，淋巴细胞亦逐渐死亡，只有杂种细胞存活。

试管中细胞共有5种(只考虑两个细胞的融合)：效应B淋巴细胞及其自身融合的细胞、鼠骨髓瘤细胞及其自身融合的细胞、杂交瘤细胞。

因为效应B淋巴细胞中DNA的复制有D途径和S途径，但本身不会连续增殖，故培养一段时间后效应B淋巴细胞及其自身融合的细胞全部死亡；鼠骨髓瘤细胞内DNA的复制只有D途径，而D途径可以被氨基嘌呤阻断，故加入氨基嘌呤后培养一段时间，鼠骨髓瘤细胞及其自身融合的细胞也会死亡；只有效应B淋巴细胞和鼠骨髓瘤细胞结合后产生的杂交瘤细胞既可以无限繁殖，又具有S途径，所以可以连续繁殖而被筛选出来。

2、胚胎分割目前存在的问题和发展前景？

答：所谓胚胎分割即是将一枚胚胎用显微手术的方法分割成二分、四分甚至八分胚，经体内

或体外培养，然后移植入受体中，以得到同卵双生或同卵多生后代的技术，也是胚胎克隆的一种方法。

尽管胚胎分割技术已在多种动物包括人类取得成功，但是仍然存在很多问题须作深入研究。

（1）胚胎分割产生的后代初生体重低，在牛切割胚胎移植实践中发现，有些分割胚即使培养到囊胚阶段与正常胚胎相比，细胞数明显减少，移植后代的体重也相应降低。这可能与早期胚胎细胞的分化和定位有关，但发育机理还有待深入研究。（2）还有遗传一致性问题，同一胚胎切割后获得的后代，在理论上，遗传性状应该完全一致，但事实并不这样。人们发现6~7日龄牛胚胎分割后，同卵双生犊牛的毛色和斑纹并不完全相同，而在2-细胞阶段分割，却表现出遗传一致性。这种现象与胚胎细胞的分化有密切关系，但目前对不同阶段胚胎细胞的分化时间和发育潜力了解很少；（3）最后还存在同卵多胎的局限性，从目前的研究来看，由一枚胚胎通过胚胎分割方式获得的后代数量有限。迄今，最好的结果是由一枚牛胚胎获得3个牛犊，这说明孪生胚胎的发育潜力很有限。因此，通过胚胎分割技术生产大量克隆动物目前难以取得进展。

发展前景：胚胎分割技术的应用，不仅可使胚胎移植所用胚胎数目成倍增加。而且可以产生遗传性能相同的后代。这对畜牧业生产和实验研究有着特殊的作用，如研究外界环境和条件对家畜生长发育生产性能等方面的影响。应用遗传性能相同的同卵孪仔或多仔作试验，其所得实验结果就确切的多了。同时应用胚胎分割技术还可以间接地控制性别，从而极大提高了胚胎移植的价值和实际效果。

它对生理学、营养学、遗传学、胚胎学和动物育种研究，尤其是动物遗传研究有很大的促进作用，可为这些学科的研究提供非常宝贵的材料。哺乳动物胚胎冷冻保存技术的研究开始于20世纪50年代，它与胚胎分割结合起来，可以增加胚胎数目和提高产犊率，使胚胎移植不受时间和地域的限制，解决胚胎远距离运输，减低国际间引种的高额费用，减少疾病传播，有利于胚胎移植技术在生产中推广应用；而且胚胎冷冻在加速家畜育种改良进程，建立基因库，保护资源等都有重要的意义。

第六次作业

1、试论述影响体细胞克隆成功的技术要素。

答：（1）、核移植过程中要分离得到供体细胞和作为受体细胞的卵细胞，而且利用电脉冲融合得到融合细胞比病毒介导的细胞融合更为有效。其次要取处在适当发育阶段及细胞周期的受体和供体细胞，当受体细胞和供体细胞处于细胞周期中的同一时期时，核移植成功的几率最大。受体细胞在细胞周期中所处的时间对转核实验成功与否的影响要大于供体细胞所处的时间的影响，一般取G2期进行核移植的效果都较好，其原因可能是在G2期细胞核已经完全恢复了转录，因而具有较强的发育潜力。

（2）、细胞诱导分裂成熟的因子（MPF）的活性有关。MPF的活性高则核膜崩裂，而核膜的完整性对控制DNA的复制至关重要，如果能够维持核膜的完整性，那么细胞核内的染色体能够正常复制，从而可以保证融合细胞具有正常的倍性。MPF活性下降，则发育潜力越大。

（3）、卵细胞中的大分子物质，如RNA、蛋白质等对核移植能否成功可以起决定性的作用。融合卵细胞要在受精初期完成基因组的重新组织，分化程度越高的细胞的核植入卵细胞后，其重新组织越难完成。

2、简述动物细胞体外培养的形态及特征是怎样的？

答：（1）形态：动物细胞无细胞壁，且大多数哺乳动物细胞只有附着在固体或半固体的表面才能生长。（2）动物细胞生长缓慢，培养时间较长，常用空气、氧、二氧化碳和氮的混合气体进行供氧和调节pH。（3）动物细胞培养还需要防治污染问题，污染的标志是培养基pH迅速改变，细胞外形模糊，甚至出现漂浮的集落。因此动物细胞培养难度较大。

3、简述胚胎干细胞的制备？

答：①直接由动物体内获取囊胚再分离ICM的方法，这样得到的囊胚数量少，质量也可能不高，由此会影响分离ES细胞的效率。

②卵细胞去核培养、转入体细胞核，体外培养，获得高质量的去透明带囊胚，由此囊胚进一步分离得到胚胎干细胞。

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